Fruktos och glukos och TAS1R2 vid typ 1-diabetes (TAS1R2)

INTRODUKTION:

Fruktos transporteras via portvenen till levern, där den snabbt tas upp av hepatocyter och fosforyleras till fruktos-1-fosfat oberoende av insulinverkan av enzymet fruktokinas. Under normala förhållanden omvandlas således fruktos huvudsakligen till glukos, glykogen och laktat, och i liten utsträckning även till triglycerider. En hypertriglyceridemi har dock förekommit under högt intag av fruktos.

Stora mängder fruktos, till skillnad från glukos, kan resultera i ökade laktat-, pyruvat- och urinsyranivåer hos friska försökspersoner och patienter med okontrollerad diabetes. Urinsyra har dock också prooxidativa egenskaper. Möjligen neutraliserar urinsyran oxidativ skada.

Sötma är mycket attraktivt för patienter med diabetes, möjligen på grund av genetiska varianter. Den söta smakreceptorn är en heterodimer av 2 proteinsubenheter, T1R2 (smakreceptor, typ 1, medlem 2) och smakreceptor, typ 1, medlem 3, belägen på human kromosom 1. T1R2 är den komponent som är specifik för söt smakuppfattning eftersom smakreceptor, typ 1, medlem 3 också är involverad i upptäckten av umami när den dimeriseras med smakreceptor, typ 1, medlem 1.

För närvarande utvärderade ingen studie TAS1R-varianter hos individer med typ 1-diabetes.

EXPERIMENTELL DESIGN:

Detta är en randomiserad, enkelblind, tvåvägs, crossover-studie utförd vid forskningscentret (Clementino Fraga Filho University Hospital) inklusive 30 vuxna med typ 1-diabetes.

Alla frivilliga kommer att instrueras att fylla i den vanliga dietjournalen, registrera sitt kapillära blodsocker och att avstå från kraftig fysisk aktivitet, alkohol, fettrik mat och överskott av koffein i 24 dagar före varje studiedag.

En dag före varje studiedag kommer vi att ringa till frivilligt för att fråga om möjliga händelser som kan påverka de biokemiska resultaten (såsom: infektioner, influensa, feber). Om vi ​​upptäcker några kommer testet att bokas om.

Basalinsulindoserna kommer att bibehållas, och inget bolusinsulin kommer att tillåtas på morgonen den dagen studien. Studiedagen kommer att utföras om målnivån för blodsocker är mellan 70 och 200 mg/dL på morgonen.

Alla frivilliga kommer att bedömas tvåvägsövergång på ett enda blindt, randomiserat sätt, med de två studierna i samma ämne, med 1 veckas mellanrum. Studien var uppdelad i två dagar (vars ordning var randomiserad): en dag med en lösning innehållande glukos och den andra med en lösning innehållande glukos.

Försökspersonerna antogs till forskningscentret (Nutritional Laboratory) cirka 7 timmar på studiedagen för att testa kapillärt blodsocker, samla in arteriellt venöst blodprov, bedöma aptitförnimmelser. Efter dessa mätningar kommer de snabbt att dricka testlösningen.

Smakvärden för lösningen kommer att bedömas omedelbart efter. Aptitförnimmelser och kommer att testas med VAS-poäng omedelbart före och 70, 130 och 180 minuter efter lösning.

Det andra arteriella venblodprovet tas 185 minuter efter lösningen och testar kapillärblodglukos före och 30, 90, 120 och 180 minuter efter lösning.

Vi uteslöt frivilliga som inte genomförde båda testerna.

TESTLÖSNING Lösningen kommer att innehålla 75 g glukos eller samma mängd fruktos utspädd i 200 ml vatten. Dessa mängder beräknades med hänsyn till det vanliga orala glukostoleranstestet. Dessutom, för närvarande, visar inga studier förmågan hos fruktos hos patienter med typ 1-diabetes, men det har föreslagits att absorptionskapaciteten för fruktos hos friska vuxna varierar från 30 g till 40 g.

VANLIG DIETBEDÖMNING Vanligt kostintag kommer att utvärderas från 3-dagars dietregister, och 24-timmars återkallningar kommer att utföras i dagstudien. Alla kostuppgifter kommer att analyseras med hjälp av en lokal näringsmjukvara.

ANTROPOMETRISK BEDÖMNING BMI kommer att beräknas som kroppsvikt i kilogram dividerat med kvadraten på höjd i meter.

Midjeomkretsen kommer att bestämmas som medelvärdet av två mått beräknade till närmaste 0,1 cm mitt mellan den nedre revbenskanten och höftbenskammen efter en normal utandning.

Kroppssammansättning kommer att mätas med tetrapolär bioelektrisk impedans (Biodynamisk modell 450).

BIOKEMISKA BEDÖMNING Alla arteriellt venösa blodprov kommer att samlas in av utbildad sjukvårdspersonal med engångsmaterial i forskningscentret (Nutritional Laboratory) och analyseras vid Clinical Analysis Laboratory (beläget på Federal University).

Glykosylerat hemoglobin, totalt kolesterol, HDL, kreatinin, aspartataminotransferas, alaninaminotransferas och kreatinin kommer att bedömas för att karakterisera studiepopulationen. Glukos, triglycerider, urinsyra, pyrodruvsyra, laktat och malonaldehyd kommer att mätas före och 180 minuter efter intag av lösningen

Glykosylerat hemoglobin kommer att utföras med högpresterande vätskekromatografi. Glukos, totalt kolesterol, HDL och triglycerider kommer att mätas med enzymatisk kolorimetrisk metod. LDL-kolesterol kommer att beräknas med Friedewalds ekvation. Kreatinin kommer att bedömas med kinetisk kolorimetrisk metod för att beräkna kreatininclearance med Cockcroft-Gault. Pyrodruvsyra, aspartataminotransferas och alaninaminotransferas kommer att bestämmas med ultraviolett kinetisk metod. Urinsyra och laktat utvärderade med enzymkinetisk metod. Malonaldehyd kommer att detekteras genom enzymkopplad immunosorbentanalys.

GENOTYPNING Deoxiribonukleinsyra (DNA) kommer att isoleras från helblod med hjälp av DNA Multi-Sample Kit (Applied Biosystems®) och prover lagrades vid -20 grader Celsius tills amplifieringsanalyser i ett forskningslaboratorium (Laboratory of Molecular Biology, Federal University).

Ile191Val (rs35874116) polymorfism i TAS1R2-genen kommer att detekteras genom att använda en TaqMan-allelisk diskrimineringsanalys (ABI-nummer C_55646_20; Applied Biosystems, Foster City, CA) med polymeraskedjereaktion i realtid på ett ABI 7000-sekvensdetektionssystem (Applied Biosystems System) . Betingelserna för polymeraskedjereaktionen är 95 grader Celsius under 10 minuter och 40 cykler av 95 grader Celsius i 15 sekunder och 60 grader Celsius i 1 minut. Genotypning kommer att verifieras genom att använda positiva kontrollpersoner i varje 30-brunnars platta samt köra om ≥ 5 % av proverna, som var 100 % överensstämmande.

BEDÖMNING AV APPETIT OCH SMAKLIGHET Visuella analoga skalor kommer att användas för att bedöma hunger, mättnad, mättnad, prospektiv matkonsumtion och smaklighet hos testlösningen, och aptitförnimmelser kommer att utvärderas smaklighet, smak, eftersmak, lukt och visuellt tilltalande av lösningarna.

Båda betygen består av en visuell analog skala är en föruppmätt 100 mm skala som kan användas för att representera symtomintensitet visuellt. Varje skala är förankrad i sina ändar av motsatta känsloreskriptorer. Volontärer kommer att uppmanas att beskriva sina känslor genom att placera ett vertikalt märke längs den linje som bäst representerar intensiteten av en given känsla om lösningen. Avståndet för detta märke från lämpligt ankare mäts och översätts sedan till en poäng som sträcker sig från 0 (ingen eller bästa möjliga) till 10 (sämsta möjliga).

HANTERING AV DIABETES TYP 1 Utredarna inkluderade endast frivilliga i en basal-bolusregim med insulininfusionspump eller insulinanaloger (basal: detemir eller glargin; bolus: lispro, glulisin eller aspart) för att undvika glukososcillationer under experimentet.

Alla frivilliga kommer att instrueras att inte ändra basalinsulindoserna och inte ta morgonbolusinsulin. Försökspersonerna kommer att tas in på forskningscentret vid cirka 7-timmar och kommer att testa sitt kapillära blodsocker, och om målnivån för blodsocker är mellan 70 och 200 mg/dL kommer experimentet att utföras.

Före och under experimentet kommer vi att testa de kapillära blodsockernivåerna 5 gånger med Accu-Check® Active, Roche, och kommer att avbrytas i glukos ≥350 mg/dL. I det här fallet kommer vi att ta en insulindos för boluskorrigering.

STATISTISK Statistiska analyser kommer att utföras med statistisk programvara och signifikansnivå på 5%.

Kvantitativa variabler kommer att beskrivas som medelvärde och standardavvikelse. Mann-Whitney test kommer att användas för jämförelse mellan grupper och Wilcoxon test för att jämföra effekterna av lösning i varje grupp. Spearmans korrelationskoefficient och regression kommer också att användas.