カルニチントランスポーター欠損症患者におけるL-カルニチンの有無にかかわらず、運動中の脂肪と糖の代謝 (CTD)

CTDが確認された8人の患者が含まれています

• すべての患者は、最大酸素消費量 (VO2 max) を決定するために、サイクル エルゴメーターで消耗するまでの漸進的負荷運動テストを実行しました。
• 1 時間の運動テスト: 安定同位体トレーサーを使用した、運動中の総脂肪と糖の酸化速度の測定。

被験者は 3 ～ 9 時間の絶食後に研究室に到着します。 1 本の IV カテーテルを一方の腕の肘静脈に挿入し、もう一方の腕の末梢静脈に別の IV カテーテルを挿入します。 安定同位体トレーサーは、次の溶液の一定の注入として肘静脈に投与されます。

• [U-13C]-パルミテート (0.085 mg x kg-1 NaH13CO3 のプライミングボーラス後、0.0026 mg x kg-1 x min-1)
• [1,1,2,3,3-2H5]-グリセロール (0.0049 mg x kg-1 x min-1 )
• [6.6-2H2]-グルコース (0.0728 mg x kg-1 x min-1 ) 研究の 5 日前に、被験者はトウモロコシを含む食品を食べないようにしなければなりません。 トウモロコシには、トレーサーとして使用する C13 が大量に含まれているため、測定を妨げる可能性があります。

トレーサーが体内に分布して定常状態に達するまで、被験者は注入を受けながら2時間休息します。 休息後、被験者は疲労するまで、または VO2max の 60 ～ 70% に相当する強度で最大 1 時間、サイクル エルゴメーターで運動します。

運動中は 1 分おきに心拍数が記録され、被験者は自分の運動の程度 (知覚運動強度、RPE) をボルグスケールで評価します。

血液と呼気のサンプル:

運動の 20 分前から運動終了まで、手の静脈の IV カテーテルを通して血液サンプルを採取し (サンプルあたり 10 ～ 12 mL)、呼気のサンプルをダグラス バッグ (Hans Rudolph inc.) に収集します。 10分ごと。 呼気は、13CO2 濃縮の分析のために Vaccutainer-glas に移されます (10 mL)。 血漿サンプルは、ホルモン、代謝産物、カルニチン、およびアシルカルニチンの濃度について分析されます。

筋生検：

この日に、カルニチンとアシルカルニチンの筋肉内濃度を測定するために、大腿部の外側広筋から筋生検が行われます。

• ウォッシュアウト期間: 4 日間、患者は毎日の経口 L-カルニチン治療を一時停止している間、遠隔心臓モニタリングのために入院しました。
• ウォッシュアウト期間の後、患者は安定同位体トレーサーを使用して 1 時間の運動テストを繰り返します。 また、筋肉内カルニチンおよびアシルカルニチン濃度の筋肉生検が繰り返されます-

トレーサー この研究では、全身代謝のトレーサーとして代謝物に組み込まれた安定同位体の注入を使用します。 炭素 (13C) と水素 (2H) の安定同位体で標識された少量の脂肪 (パルミチン酸とグリセロール) と糖 (グルコース) を使用します。 パルミチン酸およびグリセロール トレーサー (98% 濃縮、Cambrigde Isotope Laboratories、アンドーバー、マサチューセッツ州、米国) を滅菌水に溶解し、細菌フィルターを通してヒト血清アルブミンに注入します。 グルコース トレーサー (99% 濃縮、Cambrigde Isotope Laboratories、アンドーバー、マサチューセッツ州、米国) を溶解し、同様にバクテリア フィルターを通して 0.9% 生理食塩水 (NaCl) の溶液に注入します。

これらのトレーサーは、食品 (トウモロコシなど) や人体に自然に存在します。 それらは無害であり、無菌条件下で取り扱われ、対象に与えられます。