Metabolismo de gordura e açúcar durante o exercício, com e sem L-carnitina em pacientes com deficiência do transportador de carnitina (CTD)

8 Pacientes com DTC verificada foram incluídos

• Todos os pacientes realizaram um teste de exercício de carga incremental até a exaustão em um cicloergômetro para determinar a taxa máxima de consumo de oxigênio (VO2 max)
• Teste de exercício de uma hora: Medição das taxas totais de oxidação de gordura e açúcar durante o exercício usando marcadores isotópicos estáveis.

Os indivíduos chegam ao laboratório após 3-9 horas de jejum. Um cateter IV é inserido na veia cubital em um braço e outro em uma veia periférica na outra mão. Os marcadores de isótopos estáveis ​​serão administrados na veia cubital como uma infusão constante de soluções de:

• [U-13C]-palmitato (0,0026 mg x kg-1 x min-1, após um bolus de priming de 0,085 mg x kg-1 NaH13CO3)
• [1,1,2,3,3-2H5]-glicerol (0,0049 mg x kg-1 x min-1)
• [6,6-2H2]-glicose (0,0728 mg x kg-1 x min-1 ) 5 dias antes do estudo, os indivíduos devem evitar o consumo de alimentos que contenham milho. O milho contém quantidades maiores de C13, que usamos como traçador e, portanto, pode atrapalhar as medições.

Durante duas horas, os sujeitos descansam enquanto recebem as infusões até que os traçadores se distribuam no corpo e atinjam um estado estacionário. Após o repouso, os sujeitos exercitam-se no cicloergômetro até a exaustão ou por no máximo 1 hora em intensidade correspondente a 60-70% do VO2max.

A cada dois minutos durante o exercício, a frequência cardíaca é registrada e o sujeito avalia seu grau de esforço (Rate of Perceived Esertion, RPE) em uma escala de Borg.

Amostras de sangue e respiração:

De 20 minutos antes do exercício até o final do exercício, amostras de sangue são coletadas através do cateter IV na veia da mão (10-12 mL por amostra) e amostras da respiração expirada são coletadas em uma bolsa Douglas (Hans Rudolph inc.) a cada dez minutos. A respiração é transferida para Vaccutainer-glas para análise de enriquecimento de 13CO2 (10 mL). As amostras de plasma são analisadas quanto às concentrações de hormônios, metabólitos, carnitina e acil-carnitinas.

Biópsia muscular:

Neste dia, é feita uma biópsia muscular do vasto lateral da coxa para medir as concentrações intramusculares de carnitina e acilcarnitinas.

• Período de wash-out: Durante 4 dias, os doentes foram internados para monitorização cardíaca telemétrica enquanto faziam uma pausa no seu tratamento oral diário com L-carnitina.
• Após o período de washout, os pacientes repetem o teste de esforço de uma hora com os isótopos estáveis. Também a biópsia muscular para concentrações intramusculares de carnitina e acil-carnitina são repetidas-

TRAÇADORES Neste estudo usaremos infusões de isótopos estáveis ​​incorporados em metabólitos como traçadores do metabolismo corporal total. Utilizaremos pequenas quantidades de gordura (palmitato e glicerol) e açúcar (glicose) marcados com isótopos estáveis ​​de carbono (13C) e hidrogênio (2H). Os traçadores palmitato e glicerol (98 % enriquecido, Cambrigde Isotope Laboratories, Andover, MA, EUA) serão dissolvidos em água estéril e infundidos através de um filtro bacteriano em albumina sérica humana. O traçador de glicose (99% enriquecido, Cambrigde Isotope Laboratories, Andover, MA, EUA) será dissolvido e injetado em uma solução salina 0,9% (NaCl) também através de um filtro bacteriano.

Esses marcadores ocorrem naturalmente nos alimentos (por exemplo, no milho) e no corpo humano. Eles são inofensivos e serão manuseados e entregues aos sujeitos em condições estéreis.