鉄分補給とエキセントリックな運動
さまざまな年齢層における血液酸化還元状態と筋肉パフォーマンスに対する偏心運動と鉄補給の影響
鉄分補給は運動選手の間で非常に一般的ですが、これはおそらく、酸素輸送における触媒的役割と、運動中の酸化酵素とタンパク質の最適な機能のためです。
鉄は、遺伝子発現、シグナル伝達、酵素活性などの重要な生物学的プロセスに関与する活性酸素および窒素種 (RONS) の生成増加につながる可能性があるため、強力な酸化促進剤としても特徴付けられます。 運動では、最適な力の生成には低レベルのRONSが不可欠ですが、RONSの過剰な生成は収縮機能不全を引き起こし、筋肉の衰弱と疲労を引き起こす可能性があります。 一方、RONS はシグナル伝達経路やいくつかの遺伝子の発現のアップレギュレーションに関与しているため、RONS はトレーニング適応などの好ましい効果を引き起こす可能性があります。
本研究の目的は、成人と小児を対象に、有効な筋肉損傷偏心運動モデルの急性発作後の酸化還元状態、筋肉損傷および筋肉パフォーマンスに対する鉄補給の影響を調査することです。
調査の概要
詳細な説明
偏心筋の働きは、歩行などの人間の日常活動、特に下り坂や階段を下りるときに不可欠な部分です。 また、ほぼすべての運動動作の構成要素でもあります。 エキセントリック運動の最も顕著でよく説明されている影響は、運動後 1 ~ 3 日後にピークに達し、いくつかの血液学的、生化学的、生理学的反応を伴う筋肉の損傷です。 偏心運動の結果、活性酸素および窒素種(RONS)が過剰に生成されることが報告されています。 これまでの典型的なアプローチは、酸化ストレスを最小限に抑えるために抗酸化物質を提供することでしたが、そのようなアプローチの有効性についてはまだ議論の余地があります。 以前の研究では、抗酸化物質の補給が筋肉のパフォーマンス、筋肉の損傷、酸化還元状態に及ぼすプラスの効果が報告されていましたが、最近では好評を博した研究が抗酸化物質の補給のマイナスの影響を指摘しています。
鉄は、多くの重要な生物学的機能を完了するために、また最適な運動パフォーマンスのためにも不可欠な元素です。 これは、酸素輸送および鉄貯蔵タンパク質であるヘモグロビンおよびミオグロビンの形成にとって、また細胞内代謝に影響を与える多くの酸化酵素の最も好ましい機能にとって不可欠な成分です。 したがって、鉄補給は、運動による鉄恒常性の乱れを回避し、運動のニーズに対処したり身体パフォーマンスを向上させるために必要な鉄貯蔵量を維持するために一般的に使用されます。 鉄は、遺伝子発現、シグナル伝達、酵素活性などの重要な生物学的プロセスに関与する活性酸素および窒素種 (RONS) の生成増加につながる可能性があるため、強力な酸化促進剤としても特徴付けられます。 それにもかかわらず、エキセントリックな運動後の酸化還元反応の調節における鉄の役割はまだ調査されていません。
2サイクルで実施される二重盲検ランダム化クロスオーバー研究では、健康な男性と男児に鉄サプリメント(エキセントリック運動の3週間前と1週間後、1日当たり鉄元素37mg)またはプラセボのいずれかを投与する。
血液サンプルは、a) 成人の場合は、最初の補給期間の終了前、エキセントリック運動 (5 セット x 最大 15 回) の急性発作後 24、48、72、および 96 時間後に採取されます。b) 小児の場合は、前、最初のサプリメント期間の終了時、および同じ運動プロトコルの72時間後。 採血は、2 回目の補充サイクル中の同じ時点で繰り返されます。
本研究の目的は次のことを調査することです。
- 突発的なエキセントリックな運動が筋肉のパフォーマンス、酸化還元状態、鉄の状態に及ぼす影響。
- 筋肉のパフォーマンス、酸化還元状態、鉄の状態に対する 3 週間の鉄補給の効果。
- 急性偏心運動後の筋肉損傷、筋肉パフォーマンス、酸化還元状態に対する 4 週間の鉄補給の効果。
- 急激な偏心運動と鉄補給後の筋肉損傷、筋肉パフォーマンス、酸化還元状態に対する年齢の影響。
研究の種類
入学 (実際)
段階
- 適用できない
参加基準
適格基準
就学可能な年齢
健康ボランティアの受け入れ
受講資格のある性別
説明
包含基準:
- 生理学的肥満指数 (BMI)。
- 生理学的健康プロファイル。
- 被験者は書面によるインフォームドコンセントを提供します。
除外基準:
- プロのスポーツ選手。
- 過去 3 か月間、栄養補助食品を摂取した。
- 過去 6 か月間、純粋なエキセントリックな運動を行った。
- 非白人。
研究計画
研究はどのように設計されていますか?
デザインの詳細
- 割り当て:ランダム化
- 介入モデル:クロスオーバー割り当て
- マスキング:ダブル
武器と介入
参加者グループ / アーム |
介入・治療 |
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実験的:鉄分補給
経口サプリメント
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鉄剤「レゾフェロン硫酸第一鉄 125(37)mg」1錠を経口摂取
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プラセボコンパレーター:コントロール
経口サプリメント
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この研究は何を測定していますか?
主要な結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
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最大等尺トルク(N・m)の変化
時間枠:鉄補給開始前(ベースライン)、最初の補給期間(3週間:エキセントリック運動前)終了時、エキセントリック運動直後、エキセントリック運動後24時間、48時間、72時間、96時間後
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等速性ダイナモメーター (Cybex、ニューヨーク州ロンコンコマ) を使用して、膝 90 度屈曲時の等尺性膝伸筋のピーク トルクの、ベースラインと 3 週間のサプリメント摂取後 (偏心前運動) の間、および偏心前運動間の変化を推定します。エキセントリックな運動の24時間後、48時間後、72時間後、96時間後。
被験者の片方の下肢での 3 つの最良の最大随意収縮の平均が記録されます。
被験者が最大限の努力を発揮できるようにするため、低いトルク値と高いトルク値の差が 10% を超える場合は測定が繰り返されます。
アイソメトリック運動の間には 2 分間の休憩があります。
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鉄補給開始前(ベースライン)、最初の補給期間(3週間:エキセントリック運動前)終了時、エキセントリック運動直後、エキセントリック運動後24時間、48時間、72時間、96時間後
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最大同心トルク(N・m)の推移
時間枠:鉄補給開始前(ベースライン)、最初の補給期間(3週間:エキセントリック運動前)終了時、エキセントリック運動直後、エキセントリック運動後24時間、48時間、72時間、96時間後
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等速性ダイナモメーター (Cybex、ニューヨーク州ロンコンコマ) を使用して、角速度 60o/秒での等速性膝伸筋のピークトルクの、ベースラインと 3 週間のサプリメント摂取後 (偏心運動前) の間の変化、および運動前と運動前との間の変化を推定します。エキセントリック運動後、およびエキセントリック運動後 24 時間、48 時間、72 時間、96 時間後。
被験者の 1 つの下肢での 5 回の最大随意収縮のうち、より高い絶対値が記録されます。
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鉄補給開始前(ベースライン)、最初の補給期間(3週間:エキセントリック運動前)終了時、エキセントリック運動直後、エキセントリック運動後24時間、48時間、72時間、96時間後
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最大偏心トルク(N・m)の推移
時間枠:鉄補給開始前(ベースライン)、最初の補給期間(3週間:エキセントリック運動前)終了時、エキセントリック運動直後、エキセントリック運動後24時間、48時間、72時間、96時間後
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等速性ダイナモメーター (Cybex、ニューヨーク州ロンコンコマ) を使用して、角速度 60o/秒での等速性膝伸筋のピークトルクの、ベースラインと 3 週間のサプリメント摂取後 (偏心運動前) の間の変化、および運動前と運動前との間の変化を推定します。エキセントリック運動後、およびエキセントリック運動後 24 時間、48 時間、72 時間、96 時間後。
被験者の 1 つの下肢での 5 回の最大随意収縮のうち、より高い絶対値が記録されます。
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鉄補給開始前(ベースライン)、最初の補給期間(3週間:エキセントリック運動前)終了時、エキセントリック運動直後、エキセントリック運動後24時間、48時間、72時間、96時間後
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可動域、ROM(度)の変化
時間枠:鉄補給開始前(ベースライン)、最初の補給期間(3週間:エキセントリック運動前)終了時、エキセントリック運動直後、エキセントリック運動後24時間、48時間、72時間、96時間後
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ベースラインと3週間のサプリメント摂取後(エキセントリック運動前)、およびエキセントリック運動前とエキセントリック運動後24時間、48時間、72時間、96時間後の無痛ROMの変化を評価します。等速性ダイナモメーターを使用して手動で実行します。
研究者は、膝伸展が 0 の状態から被験者が不快感を感じる位置まで、非常に低い角速度でふくらはぎを動かします。
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鉄補給開始前(ベースライン)、最初の補給期間(3週間:エキセントリック運動前)終了時、エキセントリック運動直後、エキセントリック運動後24時間、48時間、72時間、96時間後
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遅発性筋肉痛、DOMS の変化 (スケール 1 ~ 10)
時間枠:鉄補給開始前(ベースライン)、最初の補給期間(3週間:エキセントリック運動前)終了時、エキセントリック運動直後、エキセントリック運動後24時間、48時間、72時間、96時間後
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各参加者は、ウォーキングおよびスクワット動作(90°膝屈曲)中の遅発性筋肉痛(DOMS)の変化と、ベースラインと3週間のサプリメント摂取後(偏心前運動)の間、および偏心前運動とサプリメント摂取後との間の知覚される痛みの変化を評価します。エキセントリックな運動から24時間後、48時間後、72時間後、96時間後。
DOMS と知覚される痛みは、1 (正常) から 10 (非常に痛い) までのスケールで評価されます。
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鉄補給開始前(ベースライン)、最初の補給期間(3週間:エキセントリック運動前)終了時、エキセントリック運動直後、エキセントリック運動後24時間、48時間、72時間、96時間後
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クレアチンキナーゼ、CK(活性IU)の変化
時間枠:鉄分補給の開始前(ベースライン)、最初の鉄分補給期間の終了時(3週間:運動前)、およびエキセントリック運動の72時間後
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CK 活性は、筋肉損傷の一般的な指標として測定されます。
ベースラインとサプリメントの3週間後(偏心運動前)の間、また偏心運動前と偏心運動後24時間、48時間、72時間、96時間の間のCK活性の変化が臨床化学分析装置で推定されます。 Z1145 (Zafiropoulos Diagnostica、アテネ、ギリシャ) と市販のキット (Zafiropoulos、アテネ、ギリシャ)。
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鉄分補給の開始前(ベースライン)、最初の鉄分補給期間の終了時(3週間:運動前)、およびエキセントリック運動の72時間後
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二次結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
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還元型グルタチオン、GSH の変化 (μmol/g Hb)
時間枠:成人: ベースライン時、エキセントリック運動前、エキセントリック運動後 24、48、72、および 96 時間後。子供: ベースライン、偏心運動前、および偏心運動の 72 時間後
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GSHは酸化ストレスの一般的な指標として測定されます。
ベースラインと3週間のサプリメント摂取後(偏心運動前)の間、また偏心運動前と偏心運動後24時間、48時間、72時間、96時間の間のGSHの変化が評価されます。
GSHの場合、20μLの赤血球溶解物を、660μLの67mMリン酸ナトリウムカリウム(pH8.0)および330μLの1mM 5,5-ジチオビス-2ニトロ安息香酸と混合した5%TCAで処理する。
サンプルを暗所、室温で 45 分間インキュベートし、吸光度を 412 nm で読み取ります。
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成人: ベースライン時、エキセントリック運動前、エキセントリック運動後 24、48、72、および 96 時間後。子供: ベースライン、偏心運動前、および偏心運動の 72 時間後
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酸化型グルタチオン、GSSG の変化 (μmol/g Hb)
時間枠:成人: ベースライン時、エキセントリック運動前、エキセントリック運動後 24、48、72、および 96 時間後。子供: ベースライン、偏心運動前、および偏心運動の 72 時間後
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GSSGは酸化ストレスの一般的な指標として測定されます。
ベースラインと3週間の補給後(エキセントリック運動前)との間、またエキセントリック運動前とエキセントリック運動後24時間、48時間、72時間、96時間との間のGSSGの変化が調査される。
GSSGは、50μLの赤血球溶解物を5%TCAで処理し、pH7.0〜7.5まで中和することによってアッセイされる。
1 マイクロリットルの 2-ビニルピリジンを加え、サンプルを 2 時間インキュベートします。
サンプルはTCAで処理され、600μLの143mMリン酸ナトリウム、100μLの3mM NADPH、100μLの10mM 5,5-ジチオビス-2-ニトロ安息香酸、および194μLの蒸留水と混合される。
1 μL のグルタチオン レダクターゼを添加した後、412 nm での吸光度の変化を 3 分間読み取ります。
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成人: ベースライン時、エキセントリック運動前、エキセントリック運動後 24、48、72、および 96 時間後。子供: ベースライン、偏心運動前、および偏心運動の 72 時間後
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チオバルビツール酸反応性物質 TBARS (μM) の変化
時間枠:成人: ベースライン時、エキセントリック運動前、エキセントリック運動後 24、48、72、および 96 時間後。子供: ベースライン、偏心運動前、および偏心運動の 72 時間後
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TBARS は脂質過酸化の指標として測定されます。
ベースラインとサプリメントの3週間後(エキセントリック運動前)の間、およびエキセントリック運動前とエキセントリック運動後24時間、48時間、72時間、96時間の間のTBARSの変化が調査されます。
TBARS測定のために、100μLの血漿を500μLの35%TCAおよび500μLのTris-HCl(200mM、pH7.4)と混合し、室温で10分間インキュベートする。
1ミリリットルの2M Na2SO4および55mMチオバルビツール酸溶液を添加し、サンプルを95℃で45分間インキュベートする。
サンプルを氷上で 5 分間冷却し、1 mL の 70% TCA を加えた後ボルテックスします。
サンプルを 15,000g で 3 分間遠心分離し、上清の吸光度を 530 nm で読み取ります。
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成人: ベースライン時、エキセントリック運動前、エキセントリック運動後 24、48、72、および 96 時間後。子供: ベースライン、偏心運動前、および偏心運動の 72 時間後
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タンパク質カルボニル、PC の変化 (nmol/mg pr)
時間枠:成人: ベースライン時、エキセントリック運動前、エキセントリック運動後 24、48、72、および 96 時間後。子供: ベースライン、偏心運動前、および偏心運動の 72 時間後
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カルボニルはタンパク質の酸化の指標として測定されます。
ベースラインとサプリメントの3週間後(偏心運動前)の間、また偏心運動前と偏心運動後24時間、48時間、72時間、96時間の間のPCの変化が調査されます。
タンパク質カルボニルは、50 μL の 20% TCA を 50 μL の血漿に加えて測定されます。
サンプルは暗所、室温で 1 時間インキュベートされます。
上清を捨て、10% TCA 1 mL を加えます。
上清を捨て、エタノール-酢酸エチル 1 mL を加えて遠心分離します。
上清を捨て、1 mL の 5 M 尿素を加え、ボルテックスし、37℃で 15 分間インキュベートします。
サンプルを4℃、15,000gで3分間遠心分離し、吸光度を375 nmで読み取ります。
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成人: ベースライン時、エキセントリック運動前、エキセントリック運動後 24、48、72、および 96 時間後。子供: ベースライン、偏心運動前、および偏心運動の 72 時間後
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カタラーゼの変化 (μmol/min/mg Hb)
時間枠:成人: ベースライン時、エキセントリック運動前、エキセントリック運動後 24、48、72、および 96 時間後。子供: ベースライン、偏心運動前、および偏心運動の 72 時間後
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カタラーゼは、赤血球の主要な抗酸化酵素の 1 つとして測定されます。
ベースラインと3週間のサプリメント摂取後(偏心運動前)の間、また偏心運動前と偏心運動後24時間、48時間、72時間、96時間の間のカタラーゼの変化が調査されます。
カタラーゼ活性は、赤血球溶解物4μL、67mMリン酸ナトリウムカリウム(pH7.4)2955μLを加えて測定し、サンプルを37℃で10分間インキュベートする。
5 マイクロリットルの 30% 過酸化水素をサンプルに添加すると、吸光度の変化が 240 nm で 1.5 分間即座に読み取られます。
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成人: ベースライン時、エキセントリック運動前、エキセントリック運動後 24、48、72、および 96 時間後。子供: ベースライン、偏心運動前、および偏心運動の 72 時間後
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総抗酸化力、TAC (mm DPPH) の変化
時間枠:成人: ベースライン時、エキセントリック運動前、エキセントリック運動後 24、48、72、および 96 時間後。子供: ベースライン、偏心運動前、および偏心運動の 72 時間後
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ベースラインとサプリメントの3週間後(偏心運動前)の間、また偏心運動前と偏心運動の24時間後、48時間後、72時間後、96時間後との間のTACの変化が調査されます。
TACは、20μLの血漿を480μLの10mMリン酸ナトリウムカリウム(pH7.4)および500μLの0.1mM 2,2-ジフェニル-1-ピクリルヒドラジル(DPPH)フリーラジカルに加えて測定され、サンプルは室温でインキュベートされます。室温で30分間暗所に置きます。
サンプルを 20,000g で 3 分間遠心分離し、吸光度を 520 nm で読み取ります。
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成人: ベースライン時、エキセントリック運動前、エキセントリック運動後 24、48、72、および 96 時間後。子供: ベースライン、偏心運動前、および偏心運動の 72 時間後
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尿酸値の変化(μm)
時間枠:成人: ベースライン時、エキセントリック運動前、エキセントリック運動後 24、48、72、および 96 時間後。子供: ベースライン、偏心運動前、および偏心運動の 72 時間後
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尿酸は、血漿の主な抗酸化成分として測定されます。
ベースラインとサプリメントの3週間後(偏心運動前)の間、また偏心運動前と偏心運動後24時間、48時間、72時間、96時間の間の尿酸の変化が調査されます。
それは、市販のキット(ザフィロプロス、アテネ、ギリシャ)を備えた臨床化学分析装置 Z1145(ザフィロプロス ディアグノスティカ、アテネ、ギリシャ)で測定されます。
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成人: ベースライン時、エキセントリック運動前、エキセントリック運動後 24、48、72、および 96 時間後。子供: ベースライン、偏心運動前、および偏心運動の 72 時間後
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ビリルビンの変化 (μM)
時間枠:成人: ベースライン時、エキセントリック運動前、エキセントリック運動後 24、48、72、および 96 時間後。子供: ベースライン、偏心運動前、および偏心運動の 72 時間後
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ベースラインとサプリメントの3週間後(偏心運動前)の間、また偏心運動前と偏心運動後24時間、48時間、72時間、96時間の間のビリルビンの変化が調査されます。
ビリルビンは、市販のキット (Zafiropoulos、アテネ、ギリシャ) を備えた臨床化学分析装置 Z1145 (Zafiropoulos Diagnostica、アテネ、ギリシャ) で測定されます。
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成人: ベースライン時、エキセントリック運動前、エキセントリック運動後 24、48、72、および 96 時間後。子供: ベースライン、偏心運動前、および偏心運動の 72 時間後
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鉄濃度の変化(mg/dL)
時間枠:成人: ベースライン時、エキセントリック運動前、エキセントリック運動後 24、48、72、および 96 時間後。子供: ベースライン、偏心運動前、および偏心運動の 72 時間後
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ベースラインと3週間のサプリメント摂取後(エキセントリック運動前)、およびエキセントリック運動前とエキセントリック運動後24時間、48時間、72時間、96時間後との間の鉄濃度の変化が調査されます。
鉄濃度は、臨床化学分析装置 Z1145 (Zafiropoulos Diagnostica、アテネ、ギリシャ) と市販のキット (Zafiropoulos、ギリシャ、アテネ) で測定します。
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成人: ベースライン時、エキセントリック運動前、エキセントリック運動後 24、48、72、および 96 時間後。子供: ベースライン、偏心運動前、および偏心運動の 72 時間後
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総鉄結合能(TIBC)の変化(μmol/L)
時間枠:成人: ベースライン時、エキセントリック運動前、エキセントリック運動後 24、48、72、および 96 時間後。子供: ベースライン、偏心運動前、および偏心運動の 72 時間後
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ベースラインとサプリメントの3週間後(偏心運動前)の間、また偏心運動前と偏心運動後24時間、48時間、72時間、96時間の間のTIBCの変化が調査されます。
TIBCは、市販のキット(ザフィロプロス、アテネ、ギリシャ)を備えた臨床化学分析装置Z1145(ザフィロプロス・ディアグノスティカ、アテネ、ギリシャ)で測定される。
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成人: ベースライン時、エキセントリック運動前、エキセントリック運動後 24、48、72、および 96 時間後。子供: ベースライン、偏心運動前、および偏心運動の 72 時間後
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トランスフェリン飽和度 (TS) の変化 (%)
時間枠:成人: ベースライン時、エキセントリック運動前、エキセントリック運動後 24、48、72、および 96 時間後。子供: ベースライン、偏心運動前、および偏心運動の 72 時間後
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ベースラインとサプリメントの3週間後(偏心運動前)の間、また偏心運動前と偏心運動後24時間、48時間、72時間、96時間の間のTSの変化が調査されます。
トランスフェリン飽和度は、鉄および TIBC 値から計算されます。
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成人: ベースライン時、エキセントリック運動前、エキセントリック運動後 24、48、72、および 96 時間後。子供: ベースライン、偏心運動前、および偏心運動の 72 時間後
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フェリチンの変化量(ng/mL)
時間枠:成人: ベースライン時、エキセントリック運動前、エキセントリック運動後 24、48、72、および 96 時間後。子供: ベースライン、偏心運動前、および偏心運動の 72 時間後
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ベースラインと3週間のサプリメント摂取後(偏心運動前)の間、また偏心運動前と偏心運動後24時間、48時間、72時間、96時間の間のフェリチン濃度の変化が調査されます。
血清フェリチンの測定には、必要な試薬をすべて含むサンドイッチ ELISA に基づく免疫酵素測定法 (EIA) キット (Accubind、Monobind Inc.、USA®) が使用されます。
各ウェルの吸光度は、マイクロプレートリーダー(Biochrom Asys Expert 96、英国)を使用して450nmで読み取られます。
フェリチン濃度の計算には、アッセイの指示に従って用量反応曲線を使用しました。
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成人: ベースライン時、エキセントリック運動前、エキセントリック運動後 24、48、72、および 96 時間後。子供: ベースライン、偏心運動前、および偏心運動の 72 時間後
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協力者と研究者
スポンサー
捜査官
- スタディチェア:Athanasios Z Jamurtas, Dr、University of Thessaly
出版物と役立つリンク
一般刊行物
- Theodorou AA, Nikolaidis MG, Paschalis V, Koutsias S, Panayiotou G, Fatouros IG, Koutedakis Y, Jamurtas AZ. No effect of antioxidant supplementation on muscle performance and blood redox status adaptations to eccentric training. Am J Clin Nutr. 2011 Jun;93(6):1373-83. doi: 10.3945/ajcn.110.009266. Epub 2011 Apr 20.
- Gomez-Cabrera MC, Martinez A, Santangelo G, Pallardo FV, Sastre J, Vina J. Oxidative stress in marathon runners: interest of antioxidant supplementation. Br J Nutr. 2006 Aug;96 Suppl 1:S31-3. doi: 10.1079/bjn20061696.
- Deli CK, Fatouros IG, Paschalis V, Tsiokanos A, Georgakouli K, Zalavras A, Avloniti A, Koutedakis Y, Jamurtas AZ. Iron Supplementation Effects on Redox Status following Aseptic Skeletal Muscle Trauma in Adults and Children. Oxid Med Cell Longev. 2017;2017:4120421. doi: 10.1155/2017/4120421. Epub 2017 Jan 22.
研究記録日
主要日程の研究
研究開始
一次修了 (実際)
研究の完了 (実際)
試験登録日
最初に提出
QC基準を満たした最初の提出物
最初の投稿 (見積もり)
学習記録の更新
投稿された最後の更新 (見積もり)
QC基準を満たした最後の更新が送信されました
最終確認日
詳しくは
本研究に関する用語
キーワード
その他の研究ID番号
- UTH2010
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