生理的高グルコゴン血症が脂肪細胞代謝に及ぼす影響 (Glucagon)

訪問１ スクリーニング：すべての被験者は、エネルギー消費率およびグルコース／脂質酸化の速度を決定するために間接熱量測定を行い、その後４０分間、空腹時熱量測定を得るために他のすべての処置を行う。 次に、被験者は75グラムの経口耐糖能試験を受け、正常な耐糖能の存在を記録します。 血漿グルコース、インスリン、C-ペプチド、グルカゴン、FFA、グリセロール、GLP-1およびGIP濃度。 OGTT 中に採取する血液の総量は 148 ml または大さじ 10 杯程度です。 参加者は、総体脂肪 (DXA) と肝脂肪量 (MRS) も受けます。 被験者は、定期的な身体検査、ECG、体重、身長、バイタル、および以前の病歴の収集も受けます。 研究チームは、血糖値（糖）と血中脂質（脂肪）のレベルもチェックします。 スクリーニング血液検査、HbA1c、脂質、およびその他の血液検査のために採取する血液の総量は、34mlまたは大さじ約2 1/3です。

来院２ 脂肪組織代謝測定：被験者（ｎ＝１２）は、研究の前日の午後４時にＣＲＣに入院し、５０％のＣＨＯ：３０％の脂肪：２０％のタンパク質を含む標準化された体重維持食を与えられる。 午後6時に、被験者は継続的なグルカゴンを受け取ります（3 ng / kg.min、 N=6) またはグルカゴン (6 ng/kg.分、 N=6) 12 時間。 被験者は午後 10 時以降も断食を続けます。 グルカゴン、FFA、インスリン、および C-ペプチドのサンプルは、1700、1730、1800、1900、2100、2300、0100、0300、および 0500 時間に収集されます。

翌朝の午前 6 時に、被験者は次のトレーサーのプライム連続注入を 4 時間受けます（図 1 を参照）。

(i) 14-C-グリセロール (プライム = 30 µCi; 持続注入 = 0.3 µCi/分) による全身の脂肪分解率の測定。

(ii) 3-3H-グルコース (プライム = 40 μCi; 連続注入 = 0.4 μCi/分) による、総体グルコースの出現率および消失率の決定。

(iii) de novo lipogenesis の速度を決定するための D2O (経口で午後 9 時に無脂肪質量 5 g/kg)。

午前 6 時に、ホルモン感受性 (HSL) リパーゼ活性、AMPK 活性、および HSL のセリンリン酸化 (図 2 を参照)、FGF-21、FAP、ベータクロトーの測定のために、皮下腹部脂肪組織の外科的生検が行われます。 インスリンシグナル伝達 (IR/IRS-1 チロシンリン酸化、PI-3 キナーゼ活性、Akt) 分子、GLUT4、炎症マーカー (IkB、NF-kB、T4R4TLR4、JNK、p38 MAPK、M2/M1 マクロファージ、IL-1、IL -6、TNF α、MCP-1) も脂肪生検で測定されます。 脂肪組織生検における脂肪の量と種類を定量化するためのリピドミクス分析も実施されます。 脂肪組織の外科的生検後、トレーサー平衡化（午前 6 時）を開始し、基質（グルコース、FFA、グリセロール、トリグリセリド）、ホルモン（グルカゴン、インスリン、 C-ペプチド、GLP-1、GIP、アディポネクチン、レプチン、FGF21 [活性および総]、FAP [分解酵素])、放射性同位体 (14-C-グリセロールおよび 3-3H グルコース) 比活性。 参加者は、50～60°C (122～140°F) に加熱された透明なプラスチック製の温度調節ボックスに手を入れて、手への良好な血流を確保します。 放射性同位体活性 (バックグラウンド) の Pasma サンプルは、午前 6 時に取得されます。 午前 9 時に連続間接熱量測定を実施し、40 分間のエネルギー消費とグルコース/脂質酸化の速度を測定します。

グルカゴン注入は、4 時間のトレーサー注入 (すなわち、 午前 6 時～午前 10 時）。 グルカゴン注入の最後 (午前 10 時まで) に、肝臓脂肪含有量の繰り返し測定値が取得されます。 合計 366 ml の採血が行われます。

午前 8 時に、トレーサー注入の最後の 2 時間の間にインスリン感受性試験が行われます。 2 時間のインスリン感受性試験では、インスリン (60 mU/m2 · 分) とブドウ糖を、カテーテルを介して対象の腕の静脈に投与し、全身のインスリン感受性の割合を測定します。 両方の注入中に被験者が経験する副作用は予想されません。