生理性高糖原血症对脂肪细胞代谢的影响 (Glucagon)

访视 1 筛选：所有受试者将进行间接量热法以确定能量消耗率和葡萄糖/脂质氧化率 40 分钟，然后再进行所有其他程序以获得空腹量热法。 然后受试者将进行 75 克口服葡萄糖耐量试验，以证明是否存在正常葡萄糖耐量。 将在 -30、-15、0 和之后的 15、30、45、60、90 和 120 分钟抽血，用于测定血浆葡萄糖、胰岛素、C 肽、胰高血糖素、FFA、甘油、GLP-1 和GIP 浓度。 在 OGTT 期间采集的血液总量为 148 毫升或约 10 汤匙。 参与者还将接受全身脂肪 (DXA) 和肝脂肪含量 (MRS)。 受试者还将进行常规体检、心电图、体重、身高、生命体征和收集既往病史。 研究小组还将检查血糖（糖）和血脂（脂肪）水平。 我们将用于筛查血液测试、HbA1c、脂质和其他血液测试的血液总量为 34 毫升或约 2 1/3 汤匙。

访问 2 脂肪组织代谢测量：受试者 (n=12) 将在研究前一天下午 4 点入住 CRC，并接受包含 50% CHO：30% 脂肪：20% 蛋白质的标准化体重维持饮食。 在下午 6 点，受试者将接受持续的胰高血糖素（3 ng/kg.min， N=6) 或胰高血糖素 (6 ng/kg.min, N=6) 12 小时。 受试者将在晚上 10 点后保持禁食。 胰高血糖素、FFA、胰岛素和 C 肽的样本将在 1700、1730、1800、1900、2100、2300、0100、0300 和 0500 时收集。

次日早上 6 点，受试者将接受以下物质连续示踪剂输注 4 小时（见图 1）：

(i) 14-C-甘油（初始 = 30 µCi；连续输注 = 0.3 µCi/分钟），用于测定全身脂肪分解率。

(ii) 3-3H-葡萄糖（初始 = 40 µCi；连续输注 = 0.4 µCi/分钟），用于测定全身葡萄糖出现和消失的速率。

(iii) D2O（晚上 9 点口服 5 g/kg 无脂肪质量）以确定从头脂肪生成的速率。

早上 6 点，将对皮下腹部脂肪组织进行手术活检，以测量激素敏感性 (HSL) 脂肪酶活性、AMPK 活性和 HSL（见图 2）、FGF-21、FAP、Beta-klotho 的丝氨酸磷酸化。 胰岛素信号（IR/IRS-1 酪氨酸磷酸化、PI-3 激酶活性、Akt）分子、GLUT4、炎症标志物（IkB、NF-kB、T4R4TLR4、JNK、p38 MAPK、M2/M1 巨噬细胞、IL-1、IL -6, TNF alpha, MCP-1) 也将在脂肪活检上进行测量。 还将进行脂质组学分析，以定量脂肪组织活检中脂肪的数量和类型。 脂肪组织手术活检后，开始示踪剂平衡（早上 6 点）血液将每 15-30 分钟抽取一次，持续 4 小时（早上 6-10 点），用于底物（葡萄糖、游离脂肪酸、甘油、甘油三酯）、激素（胰高血糖素、胰岛素、 C 肽、GLP-1、GIP、脂联素、瘦素、FGF21 [活性和总]、FAP [降解酶]）、放射性同位素（14-C-甘油和 3-3H 葡萄糖）比活性。 参与者将把他们的手放在加热到 50-60°C（122-140°F）的透明塑料恒温箱中，以确保良好的血液流向手部。 将在早上 6 点获取用于放射性同位素活性（背景）的血浆样本。 上午 9 点将进行连续间接量热法，以确定 40 分钟的能量消耗率和葡萄糖/脂质氧化率。

胰高血糖素输注将通过 4 小时示踪剂输注（即 上午 6 点至上午 10 点）。 在胰高血糖素输注结束时（上午 10 点左右），将获得肝脏脂肪含量的重复测量值。 总共将抽取 366 毫升血液。

上午 8 点，将在示踪剂输注的最后两个小时内进行胰岛素敏感性测试。 在胰岛素敏感性测试的 2 小时内，胰岛素 (60 mU/m2 ⋅ 分钟) 和葡萄糖将通过受试者手臂静脉中的导管给药，以确定全身胰岛素敏感性率。 预计在两次输注期间受试者不会经历不良反应。