생리학적 고글루코곤혈증이 지방세포 대사에 미치는 영향 (Glucagon)

방문 1 스크리닝: 공복 열량측정을 얻기 위해 모든 다른 절차에 앞서 40분 동안 에너지 소비 및 포도당/지질 산화율을 결정하기 위해 모든 피험자가 간접 열량측정을 수행할 것입니다. 그런 다음 피험자는 정상적인 포도당 내성의 존재를 기록하기 위해 75g의 경구 포도당 내성 검사를 받게 됩니다. 혈장 포도당, 인슐린, C-펩티드, 글루카곤, FFA, 글리세롤, GLP-1 및 GIP 농도. OGTT 동안 채혈할 총 혈액량은 148ml 또는 약 10테이블스푼입니다. 참가자는 또한 총 체지방(DXA) 및 간 지방 함량(MRS)을 받게 됩니다. 피험자는 또한 일상적인 신체 검사, ECG, 체중, 키, 바이탈 및 이전 병력 수집을 받게 됩니다. 연구팀은 혈당(당)과 혈중 지질(지방) 수치도 확인할 예정이다. 선별 혈액 검사, HbA1c, 지질 및 기타 혈액 검사를 위해 우리가 취할 혈액의 총량은 34ml 또는 약 2 1/3 큰 술입니다.

방문 2 지방 조직 대사 측정: 피험자(n=12)는 연구 전날 오후 4시에 CRC에 입원하여 50% CHO: 30% 지방: 20% 단백질을 포함하는 표준화된 체중 유지 식이를 받았습니다. 오후 6시에 피험자는 지속적인 글루카곤(3 ng/kg.min, N=6) 또는 글루카곤(6ng/kg.min, N=6) 12시간 동안. 피험자는 오후 10시 이후에도 금식 상태를 유지합니다. 글루카곤, FFA, 인슐린 및 C-펩티드에 대한 샘플은 1700, 1730, 1800, 1900, 2100, 2300, 0100, 0300 및 0500시간에 수집됩니다.

다음 날 오전 6시에 피험자는 4시간 동안 다음의 주요 연속 추적자 주입을 받습니다(그림 1 참조).

(i) 14-C-글리세롤(프라임 = 30 μCi; 연속 주입 = 0.3 μCi/min) 전신 지방분해율 측정용.

(ii) 3-3H-포도당(프라임 = 40µCi, 연속 주입 = 0.4µCi/분)은 전신 포도당의 출현 및 소실 속도를 측정하기 위한 것입니다.

(iii) 새로운 지방 생성 속도를 결정하기 위한 D2O(오후 9시에 경구로 5g/kg 무지방 질량).

오전 6시에 호르몬 민감성(HSL) 리파제 활성, AMPK 활성 및 HSL(그림 2 참조), FGF-21, FAP, Beta-klotho의 세린 인산화를 측정하기 위해 피하 복부 지방 조직의 외과적 생검을 수행할 것입니다. 인슐린 신호(IR/IRS-1 티로신 인산화, PI-3 키나아제 활성, Akt) 분자, GLUT4, 염증 마커(IkB, NF-kB, T4R4TLR4, JNK, p38 MAPK, M2/M1 대식세포, IL-1, IL -6, TNF 알파, MCP-1)도 지방 생검에서 측정됩니다. 지방 조직 생검에서 지방의 양과 유형을 정량화하기 위한 지질 분석도 수행됩니다. 지방 조직의 외과적 생검 후 추적자 평형(6AM)을 시작하여 기질(포도당, FFA, 글리세롤, 트리글리세리드), 호르몬(글루카곤, 인슐린, C-펩티드, GLP-1, GIP, 아디포넥틴, 렙틴, FGF21[활성 및 총], FAP[분해 효소]), 방사성동위원소(14-C-글리세롤 및 3-3H 포도당) 비활성. 참가자는 50-60°C(122-140°F)로 가열된 투명한 플라스틱 온도 조절 상자에 손을 넣어 혈액이 손으로 잘 흐르도록 합니다. 방사성동위원소 활동(배경)에 대한 파스마 샘플은 오전 6시에 얻을 것입니다. 오전 9시에 연속 간접 열량 측정을 수행하여 40분 동안 에너지 소비 및 포도당/지질 산화 속도를 결정합니다.

글루카곤 주입은 4시간 추적자 주입(즉, 오전 6시-오전 10시). 글루카곤 주입이 끝나면(~10 AM) 간 지방 함량을 반복 측정합니다. 총 366ml의 혈액을 채취합니다.

오전 8시에 추적자 주입의 마지막 2시간 동안 인슐린 감수성 테스트가 수행됩니다. 2시간 동안의 인슐린 민감성 테스트 동안 전신 인슐린 민감도를 측정하기 위해 피험자의 팔 정맥에 있는 카테터를 통해 인슐린(60 mU/m2·분)과 포도당을 주입합니다. 두 주입 동안 피험자가 경험할 것으로 예상되는 부작용은 없습니다.