抽出後の肺胞ソケットに対する多血小板フィブリンに播種された骨髄単核細胞層の影響

-研究課題: 抜歯を必要とする歯を有する患者において、多血小板フィブリン (PRF) に播種された上顎結節からの骨髄単核細胞層 (BMMNC) は、多血小板フィブリン単独と比較して、ソケット保存中に頬口蓋/舌骨の寸法を維持しますか?

-研究を行う理由: 骨髄は、組織の治癒を促進する前駆細胞と細胞マーカーでいっぱいです。 従来、骨髄吸引は口腔外から行われてきました。 口腔外吸引の障害は、部位の罹患率と、患者を全身麻酔下に置く必要があることです。

上顎結節などの口腔内部位は、骨髄細胞の採取を容易にし、採取プロセスの外傷を軽減できる骨髄スペースで満たされています。

骨髄単核細胞 (BMMNC) 移植により、抽出ソケットでの骨髄再生率が高くなり、骨の成熟が大幅に加速される可能性があります。 骨髄単核細胞 (BMMNC) は、抽出ソケット内の骨の恒常性に重要な役割を果たしていることも示唆されています。ただし、骨髄単核細胞 (BMMNC) には、収穫時の潜在的な痛みや可変幹など、考慮すべきいくつかの欠点があります。年齢に応じた細胞の量と質は、老年期の骨髄単核細胞 (BMMNC) の使用を妨げる可能性があります。

その細胞集団の骨再生能力とそれらの獲得の容易さは、それらをソケット保存の良い候補にします. したがって、現在の研究は、抽出後の歯槽骨形成の促進における上顎結節から得られた骨髄単核細胞 (BMMNC) の使用を評価することを目的としています。

-コンパレータの選択の説明: 修復不可能な歯を持つ 12 人の患者の並行グループが、抜歯とソケット保存を受けます。

• グループ 1: ソケットの保存は PRF によって行われます 抜歯ソケットで使用される PRF メンブレンは、歯茎の局所的な軟部組織の治癒を促進し、術後の疼痛反応を軽減することが実証されました。 歯槽骨吸収を減少させるPRFの効果は有意ではありませんでしたが、PRFは新しい骨の質を高め、成長因子の濃縮により骨形成速度を高めることができました.
• グループ 2: 靴下の保存は、PRF 上顎結節からの骨髄単核細胞 (BMMNC) によって行われます。

現在の研究では、密度勾配分離法技術を使用して BMMNC を収穫します。 この方法は、単離された単核細胞画分を濃縮するために使用されており、いくつかの臨床処置の重要な部分となっています。 密度勾配分離/即時移植法は、細胞の操作が最小限であるため、in vitro 拡張法よりも優れています。侵襲的な酵素処理は使用されていません。 この方法により、BMAC の即時自家移植が可能になり、細胞培養における細胞の取り扱い時間を短縮することで汚染のリスクを最小限に抑えることができます。

-目的: 研究の目的は、遅延インプラント埋入のためのソケット保存におけるPRF単独と比較して、上顎結節からのBMMNCの骨形成の可能性を見つけることです。

-試用デザイン:

現在の研究は、次のように設計されます。

• パラレル2アーム
• 無作為化対照臨床試験、
• 配分比率 1:1

• 優越性試験

  • メソッド

    .介入

  • 術前評価:
  • 臨床検査とインフォームドコンセント：

患者の口腔の一般的な状態の評価。口腔衛生、病理学的状態の観点から、研究に登録するために必要な基準に準拠していることを確認します

-レントゲン検査：

抜歯前に歯の修復可能性を確認するために、処置を進める前にコーンビームCTを撮影し、抜歯前に骨幅を測定するために除去するX線透過性をチェックします。

• 外科処置：
• 局所麻酔は、浸潤または神経ブロックによって投与され、必要な麻酔を達成して、指定された歯の抜歯を可能にします。
• 抽出は、骨形成を妨げる可能性のある病状を取り除き、可能な限り非外傷的に行われます
• 割り当ての隠蔽が解除され、ソケットの保存が行われます グループ 1 で
• 手術部位の閉鎖を可能にするために、抽出ソケットの上に台形のフラップが作成されます。
• PRF はソケットに配置されます
• フラップは、5-0 縫合糸を使用した結節縫合によって閉じられます。 グループ 2 (テスト グループ)
• 手術部位の閉鎖を可能にするために、抽出ソケットの上に台形のフラップが作成されます。
• BMMNC は、血小板が豊富なフィブリンに播種され、ソケットに挿入されます
• フラップは、5-0 縫合糸を使用した結節縫合によって閉じられます。

BMMNCs の吸引と遠心分離技術:

• 教授: Hani el Nahass と医師: Omnia k Tawfik の監督の下、20 ゲージの針を口蓋側面から上顎結節領域に挿入し、吸引が陽性になるまで待ちます。
• 吸引物は、15mlの骨髄吸引ごとに1mlの抗凝固剤クエン酸デキストロース溶液（ACD-A）を使用して、ヘパリン処理チューブ（2000：1）に収集されます。
• 吸引物を遠心分離して、密度勾配分離法を使用して BMMNC を分離します。
• Ficoll® Paque Plus (GE Healthcare、バッキンガムシャー、英国) のボトルを数回逆さにして完全に混合し、3 ml の培地を遠心管に加えます。
• 骨髄吸引液を生理食塩水で希釈 (1:1) し、慎重に Ficoll 勾配上に重ね、マルチスピード 4000 rpm 垂直ローターを使用して室温で 20 分間 2000 rpm で遠心分離します。
• 血漿と血小板を含む上層は、無菌ピペットを使用して収集され、単核細胞層は界面で乱されません。 単核細胞の層は、滅菌ピペットを使用して滅菌遠心管に移されます。
• 術後の処置（ソケット保存後3ヶ月）
• 局所麻酔は、必要な麻酔を達成するために浸潤または神経ブロックによって投与されます
• 抜歯した部位にフラップを上げます
• コア生検は、最初のドリルの代わりにコアドリルビットを導入することで採取されます
• インプラントを挿入するのに適切なサイズの骨切り術を準備するために、連続的な穴あけが行われます。
• インプラントは、プラットフォームが骨と同じ高さになるように骨切り術で配置されます
• フラップの閉鎖は、5-0 縫合を中断することによって達成されます

組織学的処理:

採取した骨生検は、エチレンジアミン四酢酸 (10%) で 2 週間脱灰します。 段階的な一連のエタノールで脱水した後、標本はパラフィンに埋め込まれ、高速回転ブレードのミクロトームで切断されます。セクションは、ヘマトキシリン ・ エオジン染色で染色されます。 これに続いて、Leica Qwin 500 (Leica microsystems Inc.、スイス) 画像解析コンピューター システム (イギリス) を使用した組織形態計測分析が行われます。 新しく形成された骨の面積率 (%) が計算されます

定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応 (qRT-PCR)

リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（RT-PCR）を使用して、アルカリホスファターゼのマッセンジャーリボ核酸（mRNA）レベルを分析します

• 術後の指示とフォローアップ:

以下の管理:

• 感染の可能性を防ぐための抗生物質（アモキシシリン1gを1日2回、5日間）。 (エウジェニオ・ロメオ他、2014年)。
• 抗炎症薬 (NSAIDS; イブプロフェン 600mg を 1 日 3 回、5 日間) を使用して、浮腫、痛み、腫れを避ける
• 防腐性洗口液（0.12％クロルヘキシジンの洗口液を1日2回60秒、14日間処方します。
• 患者は、インプラント埋入前の次の3か月間フォローアップするように指示されます

患者のセルフケアの指示:

• 最初の 24 時間は、治療部位にアイスバッグをあてます。
• 手術部位へのブラッシングや外傷を 1 週間避けてください。

• 喫煙を避ける

  • 結果:

PICO:(population-intervention-compatetor-outcome) P: 抜歯の適応となる修復不可能な歯を有する患者 I: ソケット保存のための結節からの BMMNC C: 多血小板フィブリン O: 頬口蓋/舌骨の寸法 結果の優先順位付け 結果の方法測定単位 主要な結果

副次的な目的 術後の痛み、患者の満足度、および新しく形成された骨の組織学的サンプルにおけるアルカリホスファターゼ測定値を計算するために、インプラント埋入の 3 か月後にかかった