A vérlemezkében gazdag fibrinre oltott csontvelő mononukleáris sejtréteg hatása egy alveoláris foglalatban az extrakció után

- Kutatási kérdés: Kihúzásra szoruló fogakkal rendelkező betegeknél a maxilláris tuberositásból származó csontvelő mononukleáris sejtréteg (BMMNC) thrombocyta-gazdag fibrinre (PRF) megőrzi a bucco-palatális/linguális csont dimenziót a foglalat megőrzése során, összehasonlítva a vérlemezkében gazdag fibrinnel önmagában?

- A kutatás lefolytatásának indoklása: A csontvelő tele van progenitorokkal és sejtmarkerekkel, amelyek elősegítik a szövetek gyógyulását. Hagyományosan a csontvelő-szívást extraorális helyekről végzik. Az extraorális aspiráció akadálya a hely morbiditása és a beteg általános érzéstelenítésének szükségessége.

Az intraorális helyek, mint például a maxilláris gumó, tele vannak velőrésekkel, amelyek megkönnyíthetik a csontvelői sejtek begyűjtését és csökkenthetik a betakarítási folyamat traumáját.

A csontvelő mononukleáris sejt (BMMNC) transzplantációja nagyobb arányú csontvelő-regenerációt eredményezhet az extrakciós aljzatban, és jelentősen felgyorsíthatja a csontok érését. Azt is javasolják, hogy a csontvelő mononukleáris sejt (BMMNC) fontos szerepet játszik a csont homeosztázisában az extrakciós aljzaton belül. A csontvelő mononukleáris sejtnek (BMMNC) azonban számos hátránya van, amelyeket figyelembe kell venni, mint például a betakarítás során jelentkező lehetséges fájdalom és a változó szár. sejtek mennyisége és minősége életkortól függően, ami akadályozhatja a csontvelő mononukleáris sejt (BMMNC) időskori felhasználását.

Ennek a sejtpopulációnak a csontregeneráló képessége és beszerzésük egyszerűsége jó jelöltté teszi őket a foglalat megőrzésére. Ezért a jelenlegi tanulmány célja, hogy értékelje a maxilláris tuberositásból nyert csontvelő mononukleáris sejtek (BMMNC) alkalmazását az alveoláris foglalatban az extrakció utáni csontképződés elősegítésére.

- A komparátorok kiválasztásának magyarázata: 12 főből álló, nem helyrehozható fogú páciensből álló párhuzamos csoport lesz kihúzáson és üregkonzerváláson.

• Az 1. csoportban: az üregek konzerválása PRF-fel történik, az extrakciós üregekben használt PRF membránról kimutatták, hogy elősegíti az íny helyi lágyszöveti gyógyulását és csökkenti a posztoperatív fájdalomválaszt. Míg a PRF alveoláris csontreszorpciót csökkentő hatása nem volt szignifikáns, a PRF képes volt javítani az új csont minőségét és fokozni a csontképződés sebességét a növekedési faktorok koncentrációja miatt.
• A 2. csoportban: a zoknikonzerválást a csontvelő mononukleáris sejtje (BMMNC) fogja végezni a PRF-en lévő maxilláris gumóból.

A jelenlegi tanulmányban a sűrűségi gradiens elválasztási módszert használják a BMMNC begyűjtésére. Ezt a módszert az izolált mononukleáris sejtfrakció dúsítására használták, és számos klinikai eljárás lényeges részét képezte. A sűrűséggradiens elválasztás/azonnali transzplantációs módszer jobb, mint az in vitro expanziós módszer, mivel a sejteket minimálisan manipulálják; nem alkalmaznak invazív enzimes kezelést. Ez a módszer lehetővé teszi a BMAC azonnali autológ transzplantációját, amely minimalizálja a fertőzés kockázatát azáltal, hogy csökkenti a sejttenyészetben a sejtkezelés idejét

-Célkitűzések: A vizsgálat célja a BMMNC osteogén potenciáljának feltárása a maxilláris tuberositásból, összehasonlítva a PRF önmagában történő kezelésével a késleltetett implantátum beültetéshez szükséges foglalat megőrzésében.

- Próbatervezés:

A jelenlegi tanulmány a következőképpen készül:

• Párhuzamos 2 kar
• Véletlenszerű, kontrollált klinikai vizsgálat,
• Kiosztási arány 1:1

• Felsőbbségi tárgyalás

  • Mód

    . Beavatkozások

  • Preoperatív értékelés:
  • Klinikai vizsgálat és beleegyezés:

A páciens szájüregi általános állapotának értékelése, hogy megbizonyosodjon arról, hogy az megfelel a vizsgálatba való felvételhez szükséges kritériumoknak a szájhigiénia, a kóros állapotok tekintetében

- Radiográfiai vizsgálat:

Kúpsugár CT-t készítenek, mielőtt bármilyen eljárást folytatnának, hogy megbizonyosodjanak a fog kihúzás előtti helyreállíthatóságáról, és ellenőrizni kell, hogy nem kell-e eltávolítani a radiolucenciát, és megmérni a csontszélességet a kihúzás előtt.

• Műtéti beavatkozások:
• Helyi érzéstelenítést infiltráció vagy idegblokk segítségével adnak be, hogy elérjék a szükséges érzéstelenítést a jelzett fog eltávolításához
• Az extrakciót a lehető legatraumatikusabban kell elvégezni, eltávolítva a talált patózisokat, amelyek zavarhatják a csontképződést
• Az 1. csoportban az allokációs elrejtés megtörik és a konnektorok megőrzése megtörténik
• Az elszívócsonk felett egy trapéz alakú szárny kerül kialakításra, amely lehetővé teszi a műtéti hely lezárását.
• A PRF az aljzatba kerül
• A szárnyat megszakított varratok zárják le 5-0 varrat segítségével. A 2. csoportban (tesztcsoport)
• Az elszívócsonk felett egy trapéz alakú szárny kerül kialakításra, amely lehetővé teszi a műtéti hely lezárását.
• A BMMNC-t vérlemezkékben gazdag fibrinre oltják, és behelyezik a foglalatba
• A szárnyat megszakított varratok zárják le 5-0 varrat segítségével.

BMMNCs aspirációs és centrifugálási technika:

• Professzor: Hani el Nahass és orvos: Omnia k Tawfik felügyelete mellett 20 gauge tűt szúrnak be a maxilláris tuberositás területére a palatális oldalon, amíg az aspiráció pozitív lesz.
• Az aspirátumot egy heparinnal kezelt csőben (2000:1) kell összegyűjteni, 1 ml antikoaguláns citrát-dextróz oldatot (ACD-A) használva minden 15 ml csontvelő-szíváshoz.
• A leszívott anyagot centrifugálják a BMMNC-k szétválasztására a sűrűséggradiens elválasztási módszerrel.
• A Ficoll® Paque Plus (GE Healthcare, Buckinghamshire, Egyesült Királyság) palackot többször megfordítják az alapos keveredés biztosítása érdekében, és 3 ml táptalajt adnak egy centrifugacsőbe.
• A csontvelő aspirátumot sóoldattal (1:1) hígítjuk, majd óvatosan a Ficoll gradiensre rétegezzük, majd 2000 fordulat/perc sebességgel centrifugáljuk 20 percig szobahőmérsékleten egy többsebességes, 4000 fordulat/perc függőleges rotor segítségével.
• A plazmát és a vérlemezkéket tartalmazó felső réteget steril pipettával gyűjtik össze, így a mononukleáris sejtréteg zavartalan marad a határfelületen. A mononukleáris sejtréteget steril centrifugacsőbe visszük át steril pipettával.
• Műtét utáni eljárás (három hónappal az aljzat megőrzése után)
• Helyi érzéstelenítést infiltrációval vagy idegblokkolással adnak be a szükséges érzéstelenítés elérése érdekében
• A kihúzott fog helyén egy lebeny megemelkedik
• A magbiopsziát úgy gyűjtik be, hogy a kezdeti fúró helyett magfúrót helyeznek be
• Sorozatos fúrásra kerül sor, hogy az osteotómiát a megfelelő méretűre előkészítsék az implantátum befogadásához
• Az implantátumot úgy helyezik be az osteotómiába, hogy a platform egy szintben legyen a csonttal
• A lebeny zárása megszakított 5-0 varratokkal történik

Szövettani feldolgozás:

A begyűjtött csontbiopsziákat etilén-diamin-tetraecetsavban (10%) két hétig vízkőtelenítjük. Az etanol fokozatos sorozatában végzett dehidratálást követően a mintákat paraffinba ágyazzák, és nagy sebességű forgó pengéjű mikrotommal metszik fel; a metszeteket hematoxilin-eozin festéssel festjük meg. Ezt követi a hisztomorfometrikus elemzés a Leica Qwin 500 (Leica microsystems Inc., Svájc) képelemző számítógépes rendszerrel (Anglia). Ki kell számítani az újonnan képződött csont területi százalékát (%)

Kvantitatív valós idejű polimeráz láncreakció (qRT-PCR)

valós idejű polimeráz láncreakciót (RT-PCR) használnak az alkalikus foszfatáz masszírozó ribonukleinsav (mRNS) szintjének elemzésére.

• Posztoperatív utasítások és nyomon követés:

Adminisztráció:

• Antibiotikumok (1 g amoxicillin naponta kétszer 5 napon keresztül), hogy megakadályozzák a fertőzés lehetőségét. (Eugenio Romeo et al, 2014).
• Gyulladáscsökkentő szerek (NSAID-ok; Ibuprofen 600 mg naponta háromszor 5 napon keresztül) az ödéma, fájdalom vagy duzzanat elkerülése érdekében
• Antiszeptikus szájöblítő (0,12%-os klórhexidin szájöblítőt írnak elő 60 másodpercre, naponta kétszer 14 napig).
• A pácienst arra utasítják, hogy az implantátum beültetése előtt a következő 3 hónapban kövesse nyomon

A páciens önellátására vonatkozó utasítások:

• Jégzsák alkalmazása a kezelt területre az első 24 órában.
• Egy hétig kerülje a műtéti terület fogmosását és sérülését.

• Kerülje a dohányzást

  • Eredmények:

PICO:(populációs-beavatkozás-kompatitor-eredmény) P: Kihúzásra javallt, nem helyreállítható fogakkal rendelkező betegek of Measurement Unit of Measurement Elsődleges eredmény

Másodlagos célok A posztoperatív fájdalom, a betegelégedettség és az alkalikus foszfatáz mérése az újonnan képződött csont szövettani mintájában 3 hónappal később az implantátum beültetése előtt