フルクトースの高摂取による急性炎症および代謝への影響

これは、ブラジル病院ダス・クリニカスのアルファ消化器病研究所（ベロオリゾンテ、MG、ブラジル）で実施される、3群クロスオーバー、無作為化二重盲検臨床試験となる。 すべての実験手順は、ヘルシンキ宣言に定められたガイドラインに従って実施されます。 研究プロトコルは、ミナスジェライス連邦大学の治験審査委員会 (CAAE: 21852314.7.0000.5149) によって承認されました。 すべてのボランティアは、研究の開始前にインフォームドコンセントに署名します。

サンプル 17 人の被験者のサンプル サイズは、事前にトリグリセリド レベルで少なくとも 11 mg/dL、アディポネクチンで 1.2 ng/mL、TNF で 1.9 pg/mL の差を検出するための参加者の最小数を考慮して計算されました（パイロット研究）。フルクトース過負荷を含む 1 回の食事を摂取した後では、95% の信頼区間と 80% の統計検出力が得られます。

研究デザイン 各参加者は 7 ～ 21 日間の休薬期間を設けて 3 回来院します。 訪問するたびに、参加者は異なる介入の前を通ります。 3 つの介入がランダムな順序で実行されます: (i) 標準化された食事とスクロース過負荷。 (ii) 標準化された食事とグルコース過剰負荷。 (iii) 標準化された食事とフルクトース過負荷。 休薬期間中、被験者は通常の食事行動と身体活動を維持するよう指示されます。 参加者にはカフェインやアルコール飲料の摂取を避け、毎回の訪問前24時間以内に激しい身体活動を行うよう指示される。

各介入当日、参加者は一晩絶食した後、午前中に外来診療所に行きます。 人体測定データ (体重、身長、腹囲) が収集されます。 体組成は生体インピーダンス (Quantum® 装置、RJM Systems、ミシガン州) を使用して評価され、血圧と心拍数 (デジタル モニター、モデル HEM705CP®、オムロン) は 30 分間の休息後に測定されます。

三方活栓を備えたカテーテルがボランティアの腕に挿入されます。 血液サンプル (5 mL) は、一晩の絶食後 (ベースライン)、およびスクロース、グルコース、またはフルクトースの過負荷を含む標準食事の 30、60、120、および 240 分後に採取されます。 参加者は評価期間中ずっと着席したままでした。

介入参加者は、各介入でパン、ハム、マーガリンの標準化された食事と、同量の異なる炭水化物（スクロース、グルコース、またはフルクトース）を含む甘い飲み物（200mL）を受け取ります。 食事は、間接熱量測定 (KORR®、MetaCheck) によって測定された安静時エネルギー消費量に活動係数を乗じて、食物の熱効果を参照して 10% を加えたものから計算される、エネルギー必要量の 25% を提供します。 食事は、タンパク質 15%、脂肪 30%、炭水化物 55% (複合炭水化物 30%、スクロースまたはグルコースまたはフルクトース 25%) で構成されます。 研究者やボランティアによる内容の特定を避けるために、甘味のある飲み物には人工のフルーツフレーバーが含まれています。

世界保健機関と国立慢性疾患予防健康増進センターは、添加糖の摂取量が10％を超えないよう推奨しているため、参加者に提供される精製炭水化物の量（1回の食事で18～25g）は過負荷とみなされます。 1日の総カロリーのうち。 たとえば、2,000 カロリーの食事では、追加の砂糖 (小さじ約 12 杯) から得られるカロリーは 200 カロリーを超えてはなりません。 さらに、代謝および炎症バイオマーカーにおける短期および長期（3週間以上）のフルクトース消費を調査した数人の著者は、総エネルギー消費量（GET）の25％をスクロース、グルコース、フルクトースまたは高フルクトースコーンシロップの形で提供しました。日。 一方、本研究で提供されるこれらの炭水化物の量は、多くの人の食事習慣の一部です（たとえば、200mLの通常の炭酸飲料には21グラムのスクロースが含まれています）。

血液分析 グルコース、トリグリセリド、総コレステロール、アラニンアミノトランスフェラーゼ (ALT) およびアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ (AST) の血清レベルは、比色酵素検査 (Bioclin®、ベロオリゾンテ、MG、ブラジル) によって測定されます。 アディポネクチン、レプチン、レジスチン、および TNF の血清レベルは、製造元 (R&D Systems®) の指示に従って酵素結合免疫吸着アッセイ (ELISA) によって測定されます。 IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-17、IFN-γ、およびエオタキシンの血清レベルは、Cytometric Bead Array (CBA) 法 (BD Bioscience、サンディエゴ、カリフォルニア州、米国）フローサイトメトリーにおける。 採取した血液はターク液で希釈されます。 総白血球数は、ノイバウアー チャンバー (×40 対物レンズ) を使用して取得されます。

統計分析 すべての量的変数は、平均 ± 標準誤差 (SEM) として表示されます。 量的変数の正規性は、Shapiro-Wilk テストを通じてテストされます。 Student's t Simple 検定と Mann-Whitney 検定を使用すると、研究を完了した人と完了しなかった人の初期特徴の比較、およびサブサンプルに参加するボランティアと参加しない人の初期特性を比較できます。 ベースラインとその後の評価の間の人体計測学的特徴と臨床的特徴を比較するために、反復測定の 1 因子または正規性に従ってクラスカル-ウォリスの ANOVA 検定を使用し、続いてボンフェローニ事後検定を使用します。 食後の代謝マーカーと炎症マーカーは、一般化推定方程式 (GEE) モデルによって比較され、グループ割り当て (炭水化物の種類)、時間、および時間グループ効果の調整 (相互作用) の効果が評価されます。 変数は接続範囲関数で処理され、相関行列は非構造化ロバスト推定量の共分散になります。 ボンフェローニ事後テストでは、重大な影響の存在が特定されます。 有意性は P < 0.05 で設定されます。 データは、社会科学統計パッケージ (SPSS) ソフトウェア バージョン 20 および GraphPad Prism バージョン 5.0 を使用して分析されます。