Korkean fruktoosin saannin akuutti tulehduksellinen ja metabolinen vaikutus

Tämä on kolmihaarainen, satunnaistettu, kaksoissokkoutettu kliininen tutkimus, joka suoritetaan Hospital das Clínicasin gastroenterologian Alpha Institutessa (Belo Horizonte, MG, Brasilia). Kaikki kokeelliset toimenpiteet suoritetaan Helsingin julistuksen ohjeiden mukaisesti. Tutkimusprotokollan on hyväksynyt Universidade Federal de Minas Geraisin Institutional Review Board (CAAE: 21852314.7.0000.5149). Kaikki vapaaehtoiset allekirjoittavat tietoisen suostumuksen ennen tutkimuksen aloittamista.

Näyte 17 koehenkilön otoskoko laskettiin ottaen huomioon osallistujien vähimmäismäärä, jotta havaittiin ero, joka on vähintään 11 ​​mg/dl triglyseriditasoissa, 1,2 ng/ml adiponektiinissa ja 1,9 pg/ml TNF:ssä (pilottitutkimus). ja yhden fruktoosiylimäärän sisältävän aterian nauttimisen jälkeen 95 %:n luottamusväli ja 80 %:n tilastollinen teho.

Tutkimussuunnitelma Jokainen osallistuja tekee kolme käyntiä, joiden pesujakso on 7–21 päivää. Jokaisella käynnillä osallistuja käy läpi erilaisen intervention. Kolme toimenpidettä tapahtuu satunnaisessa järjestyksessä: (i) standardoitu ateria plus sakkaroosin ylikuormitus; (ii) standardoitu ateria plus glukoosin ylikuormitus; (iii) standardoitu ateria plus fruktoosiylimäärä. Huuhtoutumisjakson aikana koehenkilöitä opastetaan säilyttämään tavanomaista syömiskäyttäytymistään ja fyysistä aktiivisuuttaan. Osallistujia neuvotaan välttämään kofeiinin ja alkoholijuomien nauttimista ja harjoittamaan intensiivistä fyysistä aktiivisuutta 24 tuntia ennen jokaista käyntiä.

Jokaisen interventiopäivänä osallistujat menevät poliklinikalle aamulla yön yli paaston jälkeen. Antropometriset tiedot (paino, pituus ja vyötärön ympärysmitta) kerätään. Kehon koostumus arvioidaan käyttämällä bioimpedanssia (Quantum®-laite, RJM Systems, Michigan) ja verenpaine ja syke (digitaalinen monitori, malli HEM705CP®, Omron) mitataan 30 minuutin levon jälkeen.

Kolmisuuntaisella sulkuhanalla varustettu katetri työnnetään vapaaehtoisten käsivarteen. Verinäytteet (5 ml) kerätään yön yli paaston jälkeen (perustaso) ja 30, 60, 120 ja 240 minuuttia sakkaroosia tai glukoosia tai fruktoosia sisältävän standardoidun aterian jälkeen. Osallistujat pysyivät paikallaan koko arviointijakson ajan.

Interventio Osallistujat saavat standardoidun aterian leipää, kinkkua ja margariinia sekä makeutettua juomaa (200 ml), joka sisältää samanlaisia ​​määriä erilaisia ​​hiilihydraatteja (sakkaroosia, glukoosia tai fruktoosia) jokaisessa interventiossa. Aterioista tulee 25 % energiantarpeesta, joka lasketaan epäsuoralla kalorimetrialla (KORR®, MetaCheck) mitatusta lepoenergiankulutuksesta kerrottuna aktiivisuuskertoimella plus 10 % ruoan lämpövaikutukseen viittaamalla. Ateria sisältää 15 % proteiinia, 30 % rasvaa ja 55 % hiilihydraatteja (30 % monimutkaisia ​​hiilihydraatteja ja 25 % sakkaroosia tai glukoosia tai fruktoosia). Makeutetuissa juomissa on keinotekoinen hedelmäinen maku, jotta tutkijat ja vapaaehtoiset eivät tunnista sisältöä.

Osallistujille tarjottujen jalostettujen hiilihydraattien määrää (18 - 25 g yhdellä aterialla) pidetään ylikuormituksena, sillä Maailman terveysjärjestö ja Kansallinen kroonisten sairauksien ehkäisy- ja terveyden edistämiskeskus suosittelevat, että lisättyjen sokerien kulutus ei saisi ylittää 10 %. päivittäisistä kokonaiskaloreista. Esimerkiksi 2 000 kalorin ruokavaliossa ei saa olla enempää kuin 200 kaloria lisätyistä sokereista (noin 12 teelusikallista). Lisäksi useat kirjoittajat, jotka tutkivat lyhyt- ja pitkäkestoista (≥ 3 viikkoa) fruktoosin kulutusta metabolisissa ja tulehdusbiomarkkereissa, tarjosivat 25 % kokonaisenergiankulutuksesta (GET) sakkaroosin, glukoosin, fruktoosin tai korkeafruktoosipitoisen maissisiirapin muodossa. päivä. Toisaalta tässä tutkimuksessa tarjottu näiden hiilihydraattien määrä on osa monien yksilöiden ruokailutottumuksia (esim. 200 ml tavallista soodaa sisältää 21 grammaa sakkaroosia).

Verianalyysi Seerumin glukoosin, triglyseridien, kokonaiskolesterolin, alaniiniaminotransferaasin (ALT) ja aspartaattiaminotransferaasin (AST) tasot mitataan kolorimetrisellä entsymaattisella testillä (Bioclin®, Belo Horizonte, MG, Brasilia). Seerumin adiponektiinin, leptiinin, resistiinin ja TNF:n tasot mitataan Enzyme Linked ImmuneSorbent Assaylla (ELISA) valmistajan ohjeiden mukaisesti (R&D Systems®). IL-2:n, IL-4:n, IL-5:n, IL-6:n, IL-10:n, IL-17:n, IFN-y:n ja eotaksiinin seerumitasot saadaan Cytometric Bead Array (CBA) -menetelmällä (BD Bioscience, San Diego, CA, USA) virtaussytometriassa. Kerätty veri laimennetaan Turkin liuokseen. Valkosolujen kokonaismäärä saadaan käyttämällä Neubauer-kammiota (×40 objektiivi).

Tilastolliset analyysit Kaikki kvantitatiiviset muuttujat esitetään keskiarvona ± keskivirhe (SEM). Kvantitatiivisten muuttujien normaalius testataan Shapiro-Wilk-testillä. Studentin t Simple- ja Mann-Whitney-testit mahdollistavat vertailun tutkimuksen suorittaneiden ja sen suorittamattomien alkuperäisten ominaisuuksien välillä sekä alaotokseen osallistuvien ja osallistumattomien vapaaehtoisten välillä. Antropometristen ja kliinisten ominaisuuksien vertaamiseksi lähtötilanteen ja myöhempien arvioiden välillä käytämme ANOVA-testiä toistetuille mittauksille 1-tekijä tai Kruskal-Wallis normaaliuden mukaan, jota seuraa Bonferronin jälkitesti. Aterian jälkeisiä metabolisia ja tulehdusmarkkereita verrataan GEE (Generalized Equation of Estimates) -mallilla, jotta voidaan arvioida ryhmän allokoinnin (hiilihydraattityyppi), ajan ja aikaryhmävaikutuksen (vuorovaikutus) mukautumisen vaikutus. Muuttujat käsitellään yhteysaluefunktiolla ja korrelaatiomatriisi rakenteettoman ja robustin estimaattorin kovarianssilla. Bonferronin jälkitesti tunnistaa merkittävien vaikutusten olemassaolon. Merkitys asetetaan arvoon P < 0,05. Tiedot analysoidaan Statistical Package for the Social Sciences (SPSS) -ohjelmiston versiolla 20 ja GraphPad Prism -versiolla 5.0.