Akutní zánětlivý a metabolický účinek vysokého příjmu fruktózy

Půjde o tříramennou zkříženou, randomizovanou, dvojitě zaslepenou klinickou studii provedenou v Alpha Institute of Gastroenterology Hospital das Clínicas (Belo Horizonte, MG, Brazílie). Všechny experimentální postupy budou prováděny podle pokynů stanovených v Helsinské deklaraci. Výzkumný protokol byl schválen Institucionálním revizním výborem Universidade Federal de Minas Gerais (CAAE: 21852314.7.0000.5149). Všichni dobrovolníci podepíší informovaný souhlas před zahájením studie.

Vzorek Velikost vzorku 17 subjektů byla vypočtena s ohledem na minimální počet účastníků pro detekci rozdílu alespoň 11 mg/dl v hladinách triglyceridů, 1,2 ng/ml v adiponektinu a 1,9 pg/ml v TNF (pilotní studie) před a po požití jednoho jídla obsahujícího přetížení fruktózou, 95% interval spolehlivosti a statistická síla 80%.

Návrh studie Každý účastník absolvuje tři návštěvy s vymývací dobou mezi 7 a 21 dny. Při každé návštěvě projde účastník jiným zásahem. Proběhnou tři intervence v náhodném pořadí: (i) standardizované jídlo plus přetížení sacharózou; (ii) standardizované jídlo plus přetížení glukózou; iii) standardizované jídlo plus přetížení fruktózou. Během vymývacího období budou subjekty instruovány, aby zachovaly své obvyklé stravovací návyky a fyzickou aktivitu. Účastníci budou instruováni, aby se vyvarovali konzumace kofeinu a alkoholických nápojů a vykonávali intenzivní fyzickou aktivitu do 24 hodin před každou návštěvou.

V den každého zásahu půjdou účastníci ráno po celonočním hladovění do ambulance. Budou shromažďovány antropometrické údaje (váha, výška a obvod pasu). Tělesné složení bude hodnoceno pomocí bioimpedance (přístroj Quantum®, RJM Systems, Michigan) a krevní tlak a srdeční frekvence (digitální monitor, model HEM705CP®, Omron) budou měřeny po 30 minutách odpočinku.

Do paže dobrovolníků bude zaveden katetr s třícestným kohoutem. Vzorky krve (5 ml) budou odebírány po celonočním hladovění (základní hodnota) a 30, 60, 120 a 240 minut po standardizovaném jídle obsahujícím sacharózu nebo přetížení glukózou nebo fruktózou. Účastníci zůstali sedět po celou dobu hodnocení.

Účastníci intervence obdrží standardizované jídlo z chleba, šunky a margarínu plus slazený nápoj (200 ml) s podobným množstvím různých sacharidů (sacharóza, glukóza nebo fruktóza) v každé intervenci. Pokrmy zajistí 25 % energetické potřeby, vypočtené z klidového energetického výdeje měřeného nepřímou kalorimetrií (KORR®, MetaCheck) vynásobeného faktorem aktivity plus 10 % vztahujícím se k tepelnému účinku potravy. Jídlo se bude skládat z 15 % bílkovin, 30 % tuku a 55 % sacharidů (30 % komplexních sacharidů a 25 % sacharózy nebo glukózy nebo fruktózy). Slazené nápoje budou mít umělou ovocnou příchuť, aby se výzkumníci a dobrovolníci vyhnuli identifikaci obsahu.

Množství rafinovaných sacharidů nabízených účastníkům (18 - 25 g v jednom jídle) bude považováno za přetížení, protože Světová zdravotnická organizace a Národní centrum pro prevenci chronických nemocí a podporu zdraví doporučují, aby spotřeba přidaných cukrů nepřesáhla 10 %. z celkových denních kalorií. Například při dietě s obsahem 2 000 kalorií by nemělo pocházet z přidaných cukrů více než 200 kalorií (asi 12 čajových lžiček). Kromě toho několik autorů, kteří zkoumali krátkodobou a dlouhodobou (≥ 3 týdny) spotřebu fruktózy v metabolických a zánětlivých biomarkerech, nabízelo 25 % celkového energetického výdeje (GET) ve formě sacharózy, glukózy, fruktózy nebo kukuřičného sirupu s vysokým obsahem fruktózy. den. Na druhou stranu množství těchto sacharidů nabízených v této studii je součástí stravovacího režimu mnoha jedinců (např. 200 ml běžné sody obsahuje 21 gramů sacharózy).

Analýza krve Sérové ​​hladiny glukózy, triglyceridů, celkového cholesterolu, alaninaminotransferázy (ALT) a aspartátaminotransferázy (AST) budou měřeny kolorimetrickým enzymatickým testem (Bioclin®, Belo Horizonte, MG, Brazílie). Sérové ​​hladiny adiponektinu, leptinu, resistinu a TNF budou měřeny pomocí testu ELISA (Enzyme Linked ImmuneSorbent Assay) podle pokynů výrobce (R&D Systems®). Sérové ​​hladiny IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-17, IFN-γ a eotaxinu budou získány metodou Cytometric Bead Array (CBA) (BD Bioscience, San Diego, CA, USA) v průtokové cytometrii. Odebraná krev se zředí Turkovým roztokem. Celkový počet bílých krvinek se získá pomocí Neubauerovy komůrky (objektiv × 40).

Statistické analýzy Všechny kvantitativní proměnné budou prezentovány jako průměr ± standardní chyba (SEM). Normalita kvantitativních proměnných bude testována Shapiro-Wilkovým testem. Student's t Simple a Mann-Whitney testy umožní srovnání mezi počátečními charakteristikami těch, kteří studii dokončili, a těch, kteří studii nedokončili, a mezi dobrovolníky, kteří se budou podílet na dílčím vzorku, a těmi, kteří ne. Pro srovnání antropometrických a klinických charakteristik mezi výchozí hodnotou a následnými hodnoceními použijeme test ANOVA pro opakovaná měření 1-faktor nebo Kruskal-Wallis podle normality následovaný Bonferroniho post-testem. Postprandiální metabolické a zánětlivé markery budou porovnány pomocí modelu Generalized Equation of Estimates (GEE), aby se vyhodnotil účinek skupinové alokace (typ sacharidů), času a přizpůsobení vlivu časové skupiny (interakce). Proměnné budou ošetřeny funkcí rozsahu připojení a korelační matice bude kovariancí nestrukturovaného a robustního odhadu. Bonferroniho post-test identifikuje přítomnost významných účinků. Významnost bude nastavena na P < 0,05. Data budou analyzována pomocí softwaru Statistical Package for the Social Sciences (SPSS) verze 20 a GraphPad Prism verze 5.0.