Острый воспалительный и метаболический эффект высокого потребления фруктозы

Это будет перекрестное, рандомизированное, двойное слепое клиническое исследование с тремя группами, проводимое в Альфа-институте гастроэнтерологии больницы das Clínicas (Белу-Оризонти, штат Массачусетс, Бразилия). Все экспериментальные процедуры будут проводиться в соответствии с рекомендациями, изложенными в Хельсинкской декларации. Протокол исследования был одобрен Институциональным наблюдательным советом Федерального университета штата Минас-Жерайс (CAAE: 21852314.7.0000.5149). Все добровольцы подписывают информированное согласие до начала исследования.

Образец Размер выборки из 17 субъектов был рассчитан с учетом минимального количества участников, чтобы обнаружить разницу не менее 11 мг/дл в уровнях триглицеридов, 1,2 нг/мл в адипонектине и 1,9 пг/мл в ФНО (пилотное исследование) до и после приема одной пищи, содержащей перегрузку фруктозой, 95% доверительный интервал и статистическая мощность 80%.

Дизайн исследования Каждый участник примет участие в трех визитах с периодом вымывания от 7 до 21 дня. При каждом посещении участник проходит мимо другого вмешательства. В случайном порядке будут применяться три вмешательства: (i) стандартизированное питание плюс перегрузка сахарозой; (ii) стандартизированное питание плюс перегрузка глюкозой; (iii) стандартизированное питание плюс перегрузка фруктозой. В течение периода вымывания испытуемых проинструктируют поддерживать их обычное пищевое поведение и физическую активность. Участников проинструктируют избегать употребления кофеина и алкогольных напитков и выполнять интенсивные физические нагрузки в течение 24 часов перед каждым визитом.

В день каждого вмешательства участники отправятся в поликлинику утром после ночного голодания. Будут собраны антропометрические данные (вес, рост и окружность талии). Состав тела оценивают с помощью биоимпеданса (аппарат Quantum®, RJM Systems, Мичиган), а артериальное давление и частоту сердечных сокращений (цифровой монитор, модель HEM705CP®, Omron) измеряют после 30 минут отдыха.

Катетер с трехходовым краном будет вставлен в руку добровольцев. Образцы крови (5 мл) будут собираться после ночного голодания (базовый уровень) и через 30, 60, 120 и 240 минут после стандартизированного приема пищи, содержащей сахарозу, глюкозу или фруктозу. Участники оставались сидеть в течение всего периода оценки.

Вмешательство Участники будут получать стандартную еду из хлеба, ветчины и маргарина, а также подслащенный напиток (200 мл) с одинаковым количеством различных углеводов (сахароза, глюкоза или фруктоза) в каждом вмешательстве. Прием пищи обеспечивает 25% потребности в энергии, рассчитанной на основе расхода энергии в состоянии покоя, измеренного с помощью непрямой калориметрии (KORR®, MetaCheck), умноженного на коэффициент активности плюс 10%, относящийся к тепловому эффекту пищи. Пища будет состоять из 15 % белков, 30 % жиров и 55 % углеводов (30 % сложных углеводов и 25 % сахарозы, глюкозы или фруктозы). Подслащенные напитки будут иметь искусственный фруктовый вкус, чтобы исследователи и добровольцы не могли идентифицировать их содержимое.

Количество рафинированных углеводов, предлагаемых участникам (18–25 г за один прием пищи), будет считаться перегрузкой, поскольку Всемирная организация здравоохранения и Национальный центр профилактики хронических заболеваний и укрепления здоровья рекомендуют, чтобы потребление добавленных сахаров не превышало 10%. от общей суточной калорийности. Например, в диете на 2000 калорий не более 200 калорий должно поступать из добавленных сахаров (около 12 чайных ложек). Кроме того, несколько авторов, которые исследовали краткосрочное и долгосрочное (≥ 3 недель) потребление фруктозы в метаболических и воспалительных биомаркерах, предложили 25% от общего расхода энергии (GET) в форме сахарозы, глюкозы, фруктозы или кукурузного сиропа с высоким содержанием фруктозы на каждый день. день. С другой стороны, количество этих углеводов, предложенное в настоящем исследовании, является частью режима питания многих людей (например, 200 мл обычной газировки содержат 21 грамм сахарозы).

Анализ крови Уровни сыворотки глюкозы, триглицеридов, общего холестерина, аланинаминотрансферазы (АЛТ) и аспартатаминотрансферазы (АСТ) измеряют с помощью колориметрического ферментативного теста (Bioclin®, Belo Horizonte, MG, Бразилия). Уровни адипонектина, лептина, резистина и TNF в сыворотке измеряют с помощью твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA) в соответствии с инструкциями производителя (R&D Systems®). Уровни IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-17, IFN-γ и эотаксин в сыворотке будут получены с помощью метода цитометрического массива шариков (CBA) (BD Bioscience, Сан-Диего, США). Калифорния, США) в проточной цитометрии. Собранную кровь разводят в растворе Турка. Общее количество лейкоцитов будет получено с использованием камеры Нейбауэра (объектив ×40).

Статистический анализ Все количественные переменные будут представлены как среднее значение ± стандартная ошибка (SEM). Нормальность количественных переменных будет проверена с помощью теста Шапиро-Уилка. Простые тесты Стьюдента и Манна-Уитни позволят сравнить исходные характеристики тех, кто завершил исследование, и тех, кто не участвовал в нем, а также между добровольцами, которые будут участвовать в подвыборке, и теми, кто не участвовал. Чтобы сравнить антропометрические и клинические характеристики между исходным уровнем и последующими оценками, мы будем использовать тест ANOVA для повторных измерений 1-фактор или Крускала-Уоллиса в соответствии с нормой, за которой следует пост-тест Бонферрони. Постпрандиальные метаболические и воспалительные маркеры будут сравниваться с помощью модели обобщенного уравнения оценок (GEE) для оценки эффекта распределения по группам (тип углеводов), времени и поправки на эффект временной группы (взаимодействие). Переменные будут обрабатываться функцией диапазона соединения, а корреляционная матрица будет ковариацией неструктурированной и надежной оценки. Последующий тест Бонферрони выявит наличие значительных эффектов. Значимость будет установлена ​​на уровне P <0,05. Данные будут проанализированы с использованием программного пакета Statistical Package for the Social Sciences (SPSS) версии 20 и GraphPad Prism версии 5.0.