PAH の複雑な混合物への職業的曝露から生じる生物学的特徴 (PAH-ProMetGen)

PAH は、いくつかの疾患を誘発する遍在する汚染物質であり、その中でもがんが最も重要なエンドポイントであり、肺がん、皮膚がん、膀胱がんの発生率が増加しています。 PAH は遺伝毒性効果 (姉妹染色分体交換、小核、DNA 損傷) を誘発しますが、間接的に作用する発がん物質としてヒトの代謝活性化を必要とします。 したがって、PAH 曝露に続く代謝経路の知識は、がんのリスクを理解し、予防するために重要です。 さらに、PAH への曝露は、他の健康への悪影響 (糖尿病、炎症、不妊症、心血管疾患) を誘発すると考えられています。 残念ながら、初期の疾患関連のバイオマーカーはまだほとんど知られておらず、関与するメカニズムについての理解はまだ限られています. まれな既存の生物学的限界値は、発がん性のない PAH (ピレン) または解毒経路 (BaP の 3-OHBaP) のいずれかを指しますが、BaP の遺伝毒性経路 (TetraolBaP) を反映する新しいバイオマーカーが現在利用可能です。 したがって、暴露/影響のより関連性の高いバイオマーカーを特定し、PAH 暴露による生物学的影響と関連する代謝経路をよりよく理解する必要があります。

プロジェクトの目的は次のとおりです。

• PAH への暴露による分子、代謝、および遺伝毒性の影響をよりよく理解し、特徴付け、そのような影響をさまざまな PAH 代謝産物の生物学的レベルと関連付けるために、
• 新しい生物学的限界値を導出するための関連データを取得するために、代謝産物/タンパク質の示差的発現および遺伝毒性エンドポイントに対する BaP 代謝 (遺伝毒性対解毒経路) の影響を研究すること。
• PAH 曝露によるオミックスの規制緩和と活性化された代謝経路との関連を解明し、ヒトのバイオモニタリングの効果バイオマーカーの候補を定義する。

プロジェクトの独自性は次のとおりです。 第一に、これは代表的な PAH 混合物にさらされた労働者に対して実際の職業環境で実施されたヒト研究です。 これは、最新のバイオモニタリング、オミクス、細胞遺伝学分析を同時に組み合わせた学際的なアプローチであり、PAH 混合物への職業的暴露後の代謝反応とタンパク質発現の包括的な見解への洞察を与え、関与する生物学的プロセスの特定を可能にします。 BaP の 2 つの主要な代謝経路を比較するために、発がん性 BaP 代謝物 (Tetraol-BaP および 3-OHBaP) を同時に分析します。

プロジェクトの主な手順は次のとおりです。

• 2 つの期間にわたってサンプリングされた PAH 混合物に差別的に暴露された 100 人の労働者の募集 (数週間の暴露後、およびその後の 3 週間は職業暴露なし)、
• 関連データの記録（仕事の特徴、仕事/タスク、実務経験、曝露年数、喫煙習慣、栄養摂取量、併存症）、
• いくつかのガス状および粒子状 PAH (ナフタレン、フルオレン、フェナントレン、ピレン、BaP、BeP、クリセン、ベンゾ(b)フルオランテン、ベンゾ(k)フルオランテン、ベンゾ) の尿中代謝物の毒性分析 (LC-蛍光および GC-MS-MS) (a)アントラセン)、
• LC-HR-MS に基づくボトムアップ ラベル フリーの定量的プロテオミクス分析の濃縮アプローチによる血液サンプルのプロテオミクス分析。 規制緩和されたタンパク質 (DEP) が識別され、関連するタンパク質シグネチャが識別されます。 遺伝子オントロジー (GO) 分析は、関与する生物学的プロセスのグループを定義します。
• 教師なし統計分析 (主成分分析、ロジスティック回帰)、ヒト メタボローム データベースとの比較による関連代謝物の同定、LC の高度な分子ネットワーキング/スペクトル ライブラリ検索を使用した、UHPLC-HR-MS での血液サンプルの非ターゲット メタボロミクス分析MSMSデータ、
• サイトブラシを使用した頬細胞の採取による頬細胞の小核 (MN)、バッファー内のラボへの転送、固定および染色、蛍光灯下での自動カウント。