侵害受容、侵害受容、固有受容の精密医療。

プレシジョン・メディシンは、プレシジョン・メディシン・イニシアチブによって「遺伝子、環境、ライフスタイルの個人差を考慮した病気の治療と予防のための新たなアプローチ」と定義されています。

痛みは、国際疼痛学会 (IASP) によって「実際のまたは潜在的な組織損傷に関連する、またはそのような損傷の観点から説明される不快な感覚的および感情的経験」と定義されています。伝統的に、痛みまたは sng も次のようなものとして含まれています。痛覚の一つ。 最近、我々は、知覚を体性感覚系における酸性および/または痛みの感覚として定義し、筋肉の鎮痛がサブスタンス P および Tac1 を介していることを明らかにしました。

臨床結果によると、一部の患者は物理的薬剤によく反応し、一部の患者は注射を好んだ。 上記の遺伝子の遺伝的変異は、異なる治療効果の決定要因である可能性があります。 ただし、患者がある治療オプションから別の治療オプションに切り替えるには約 4 ～ 8 週間かかりました。 遺伝子バイオマーカーによって最適な治療法を決定できれば、治療期間と全体の期間は大幅に短縮されます。

提案された遺伝子（TRPV1、ASIC1a、ASIC3、Tac1、COMT、TCL1A、POMC、RGS4、ASIC2、ASIC4、TRPA1、NK1R、G2A、GPR4、OGR1、TDAG8、TASK1、TASK2、TASK3、TREK1）の遺伝的変異は、 、P2X2、P2X3、P2X5、TRPV4、KCNK1、NTSR1、NTSR2、CaV3.2、Nav1.1、Piezo1、および Piezo2、Runx3 または Egr3、エンドセリン変換酵素様 1 (ECEL1)、ミオシン重鎖遺伝子 MYH3 および MYH8、ミオシン結合プロテイン C 遺伝子、MYBPC1、ならびに筋調節タンパク質であるトロポニン I、トロポニン T、β トロポミオシンをコードする TNNI2、TNNT3、TPM2 は、sng/疼痛治療または固有受容機能の予後バイオマーカーとなる可能性があります。

1.具体的な目的

1. 次世代シーケンス (NGS) ベースのアプローチを確立し、sng/疼痛治療法の反応と特発性側弯症の表現型を決定できる遺伝子変異を発見します。
2. sng/痛みの可能性のあるメタボロミクスおよびプロテオミクスマーカーを見つけること。
3. 遺伝子マーカーを介した痛み/痛み制御のための精密医療のアルゴリズムを決定する。

2.過去数年間で、私たちのチームは、新しい痛み/痛みの治療アルゴリズムの開発のための遺伝子変異の探索を正当化するいくつかの成果を上げました。

1. LLLT の鎮痛は TRPV1 を介して行われます。
2. 超音波治療による鎮痛は ASIC3 を介して行われます。
3. ブドウ糖注射は、ASIC1a を通じて慢性筋肉痛を軽減しました。
4. 線維筋痛症における sng/痛みのバイオマーカー。

3.研究デザイン

(1) コホート A 筋筋膜性疼痛症候群からの参加者: 国立台湾大学病院とその分院から 80 名の患者を募集します。

A. 患者の適格性:

1. 参加基準: (1) 18 歳から 100 歳までの年齢。 （２）ＶＡＳ≧３０、または４ｋｇ圧力でＶＡＳ≧３０。 （３）筋筋膜性疼痛症候群患者と診断され、治療（ＬＬＬＴ、治療用超音波、および局所ブドウ糖注入療法を含む）を受ける意欲がある。 MPS の診断は、張ったバンド、トリガーポイント、放散痛の基準を使用して主任研究者によって確認されました。
2. 除外基準：活動性感染症、悪性腫瘍、血液疾患を有する者は除外した。 ６か月以内に僧帽筋上部に局所注射を受けた患者も除外される。

B. 研究デザイン:

1. インフォームドコンセントを得た後、対象となる患者の年齢、性別、職業、教育レベル、過去の病歴などの基本的な人口統計データが収集されます。
2. 適格な患者はまず、僧帽筋上部のトリガーポイントで、エネルギー密度8 J/cm2で、波長685 nm、出力30 mWのLLLT（BTL-5000 Laser、BTL、スティーブニッジ、英国）を受けました。 治療前および治療後のVAS-痛みおよびVAS-sngは、LLLT表現型決定のためにそれぞれ収集されます。
3. 次に、彼らは都合よく 2 つのグループ (各グループに 40 人の被験者) に割り当てられます: A. 超音波治療グループ; A. B. プロロセラピーグループ。 グループ A は、痛みを伴う僧帽筋上部に 1 MHz の治療用超音波を 1 週間に 2 ～ 3 回の頻度で 5 分間受けます。 グループ B は僧帽筋上部の筋周囲で高張性プロロセラピーを受けます。 注射剤は5mlの5％ブドウ糖溶液です。 針が血管内にないことを確認するために、注射前に針を吸引した。 医師間のばらつきを避けるために、同じ医師 (主任研究者) がすべての患者に注射を行います。 両グループにおいて、有効性の干渉を避けるために他の投薬や身体療法は行われませんでした。
4. 採用された患者は、注射の前後および注射の 2 週間後に評価を受けます。 主要評価項目は、VAS-痛みおよびVAS-sng（視覚的アナログスケール）で、スコアは0〜100であり、100は最も高い痛みの程度を表す値です。 二次アウトカムは疼痛閾値、筋緊張、SF-36 です。アンケートは 36 の項目と 8 つの領域で構成され、QoL (生活の質) に対する患者の認識に対処します。 静脈血および尿サンプルは、それぞれ最初の訪問時と 2 週間目の訪問時に収集されました。 血液サンプルは匿名化された ID 番号でラベル付けされ、遠心分離され、今後の処理時まで施錠された冷凍庫で -80 °C で保管されました。 バフィーコートは遠心分離後に分離され、同様に保管されます。 尿サンプルは等分され、将来の分析に備えてロック付き冷凍庫で -80 °C で保管されました。
5. レスキュー療法（クロスオーバー治療）：参加者が最初のラウンドの治療に満足せず、VASの改善が10未満である場合、参加者はレスキュー療法（他のグループの治療）を受ける資格があります。 そして、彼らはさらに2週間クリニックに戻ります。 結果変数は 3 回目の訪問でも収集されます。

(2) コホート B 特発性側弯症からの参加者: 国立台湾大学病院とその分院、台中退役軍人病院から 80 名の患者を募集します。

A. 患者の適格性:

1. 参加基準: (1) 10 歳から 65 歳までの年齢。 (2) 特発性側弯症と診断された場合 側弯症の診断は、コブス角が 10 度を超える前後単純 X 線検査によって確認されました。
2. 除外基準：（１）活動性感染症、悪性腫瘍、血液疾患を有する者は除外した。 (2) 椎骨の形成異常や分節不全による先天性側弯症、筋肉の不均衡による神経筋性側弯症、症候群性側弯症または変性性側弯症など、特定の側弯症の病因を有する者。

B. 研究デザイン:

1. インフォームドコンセントを得た後、対象となる患者の年齢、性別、職業、教育レベル、身体活動レベル、過去の病歴などの基本的な人口統計データが収集されます。
2. 採用された患者は 1 回限りの評価を受けます。 収集されたパラメータには、コブ角、脊椎回転角度、VAS-痛み、および 0 ～ 100 のスコアを持つ VAS-sng (視覚的アナログ スケール) が含まれます。ここで、100 は最高の痛みの程度、痛みの閾値を表す値です (Park、Kim et) al. 2011)、傍脊柱筋の強さと緊張、SF-36-a アンケートは、QoL (生活の質) に対する患者の認識に対処する 36 項目と 8 つの領域で構成されています (Li, Wang et al. 2003)。 静脈血と尿のサンプルも収集されました。 血液サンプルは匿名化された ID 番号でラベル付けされ、遠心分離され、今後の処理時まで施錠された冷凍庫で -80 °C で保管されました。 バフィーコートは遠心分離後に分離され、同様に保管されます。 尿サンプルは等分され、将来の分析に備えてロック付き冷凍庫で -80 °C で保管されました。

(3) DNA 抽出および NGS ベースのシークエンシングおよびジェノタイピング メーカー (Qiagen、ヒルデン、メットマン、ドイツ) のプロトコールに従い、Gentra Puregene キットを使用して参加者の末梢血単核細胞からゲノム DNA を抽出し、アガロースに供します。ゲルと外径比率テストで純度と濃度を確認します。 DNA は、800 bp のピーク長を目指して、Covaris (Covaris、米国マサチューセッツ州ウォーバーン) を使用して断片化されます。 Illumina ライブラリーは、TruSeq Library Preparation Kit (Illumina、サンディエゴ、カリフォルニア州、米国) を使用して gDNA から生成されます。

DNA 捕捉プローブは、TRPV1、ASIC1a、ASIC3、Tac1、COMT、TCL1A、POMC、および RGS4 をターゲットにするようにカスタム設計され、Roche KAPA HyperChoice プロトコル (Roche、米国ウィスコンシン州マディソン) を使用して合成されます。 これら 8 つの遺伝子のすべてのコード領域と非コード領域 (プロモーター、イントロン、5' および 3' 非翻訳領域) が含まれます。

NGS ターゲット領域の濃縮は、ターゲット領域 (~148 Kb) を濃縮/キャプチャするために適用されます。 濃縮されたライブラリーは、Illumina MiSeq を使用して配列決定され、300 bp のペアエンド リードが生成されます。 ターゲット領域の予想深さは平均 200 倍になります。

データ分析は前述のように実行されます。 簡単に言うと、生の配列決定データは参照ヒトゲノムに合わせて調整されます (2 月 1 日)。 2009、GRCh37/hg19)、BWA-MEM を使用。 Picard を使用して、必要なデータ変換、並べ替え、インデックス付けを実行します。 主要なバリアント呼び出しプロセスは、一塩基バリアントとインデルの両方について、GATK ソフトウェア パッケージで操作されます。 構造変異体も特定されます。 ANNOVAR を適用して、遺伝的変異に適切に注釈を付けます。これには、少なくとも遺伝子アノテーション、アミノ酸変化アノテーション、SIFT スコア、PolyPhen2 スコア、dbSNP 識別子、1000 Genome Project 対立遺伝子頻度、gnomAD 対立遺伝子頻度、およびバリアントの臨床的重要性を持つ ClinVar データベースが含まれます。 次に、IGV を使用して、グラフィック インターフェイス上でシーケンスのマッピングと注釈を表示します。

対象となる変異体の対立遺伝子頻度が、異なる参加者グループ間で比較されます。 非常に強い効果を持つ可能性のある稀な変異体 (単一遺伝子モデル) と、中程度から強い効果を持つ比較的一般的な変異体 (複雑な表現型モデル) を探します。