전이성 흑색종에서 저용량 IL-2가 있거나 없는 MAGE-3/Melan-A/gp 100/NA17 및 rhIL-12에 대한 연구

위의 전임상 및 임상 1상 결과를 바탕으로 2세대 흑색종 백신에 대한 논리적인 전략이 등장했습니다. 전이성 흑색종 환자에 대한 무작위 2상 연구가 착수될 것이다. 환자는 먼저 HLA 유형이 됩니다. HLA-A2 양성 환자는 선별 검사를 받을 수 있습니다. 가능한 경우, 각 환자는 RT-PCR 및 면역조직화학을 사용하여 MAGE-3, Melan-A, gp100 및 NAI 7의 발현을 스크리닝하고, T 세포가 병변에 존재하는지 여부를 확인하고, 사이토카인 유전자를 측정하기 위해 종양 생검을 받게 됩니다. RT-PCR로 발현하고 유전자 배열 분석을 수행합니다. 또한, 혈액 세포는 T 세포 기능의 특정 매개변수에 대해 분석됩니다.

환자는 코호트 A(IL-2 없음) 또는 B(저용량 IL-2 포함)로 무작위 배정됩니다. 치료를 위해 말초 혈액을 수집하고 밀도 원심분리에 의해 분별하여 APC의 공급원으로서 PBMC를 분리합니다. PBMC는 4개의 풀로 나뉘며 각 풀은 MAGE-3, Melan-A, gp 100 또는 Ni 7A와 같은 펩티드 중 하나와 함께 배양됩니다. 그런 다음 펩타이드가 로드된 세포를 세척하고 PBS에서 단일 현탁액으로 재결합하고 치명적으로 조사합니다. 약 120 x 106 펄스 세포가 종양과 관련이 있다고 생각되지 않는 림프절 근처 부위에 피하 주사됩니다. 피하 경로는 안전성, 전임상 모델에서의 효능 및 배액 림프절에 대한 백신의 목표를 이유로 선택되었습니다. rhIL-12(4.tg 스트레이트 용량)은 각 주기의 1, 3, 5일에 백신 부위에 인접한 피하로 제공됩니다. 이 복용량과 일정은 우리의 1상 연구에서 효과적인 것으로 밝혀졌습니다. 환자의 절반(코호트 B)에서 IL-2(IMU 연속 용량)를 7일 내지 18일에 매일 피하로 투여할 것이다. rhIL-12에 이어 IL-2(할당된 경우)와 함께 재면역화는 주기 I에서와 같이 3주 간격으로 수행됩니다.

각 주기의 1일째에 말초 혈액을 수집하여 펩티드 특이적 IFN-γ 생산을 측정합니다. 치료 전과 3주기마다 PBMC를 수집하여 펩티드/HLA-A2 사량체를 사용한 유세포 분석으로 펩티드 특이적 CD8 T 세포를 정량화하고 분자 반응에 대한 증거를 RT-PCR을 수행하여 평가합니다. 말초 혈액 샘플의 흑색종 항원에 대해. 또한, 치료 전, 처음 3주기 후 및 연구 중단 시 유전자 배열 분석을 포함하여 종양 미세 환경에서의 면역 반응을 평가하기 위해 종양 생검을 수행할 것입니다. 이러한 연구를 통해 잔여 종양이 있는 환자에서 임상 반응이 부족한 이유를 밝힐 수 있기를 바랍니다. 임상 반응은 2차 결과로 평가됩니다.