Studie av MAGE-3/Melan-A/gp 100/NA17 och rhIL-12 med/ut låg dos IL-2 vid metastaserande melanom

Baserat på ovanstående prekliniska och fas I-resultat har en logisk strategi för ett andra generationens melanomvaccin framkommit. En randomiserad fas II-studie på patienter med metastaserande melanom kommer att genomföras. Patienterna kommer först att HLA-typas; HLA-A2-positiva patienter kommer att vara berättigade till screening. När det är möjligt kommer varje patient att genomgå en tumörbiopsi för att screena för uttryck av MAGE-3, Melan-A, gplOO och NAI 7 med RT-PCR och immunhistokemi, för att avgöra om T-celler finns i lesionen, för att mäta cytokin-genen uttryck genom RT-PCR och för att utföra genarrayanalys. Dessutom kommer blodkroppar att analyseras för vissa parametrar för T-cellsfunktion.

Patienterna kommer att randomiseras till kohorter A (ingen IL-2) eller B (med lågdos IL-2). För behandling kommer perifert blod att samlas in och fraktioneras genom densitetscentrifugering för att isolera PBMC som en källa för APC. PBMC kommer att delas upp i fyra pooler, som var och en kommer att inkuberas med en av följande peptider: MAGE-3, Melan-A, gp 100 eller Ni 7A. De peptidladdade cellerna kommer sedan att tvättas och rekombineras till en enda suspension i PBS och dödligt bestrålas. Cirka 120 x 106 pulsade celler kommer att injiceras subkutant på ett ställe nära en lymfkörtel som inte tros vara involverad i tumör. Den subkutana vägen har valts av säkerhetsskäl, effektivitet i den prekliniska modellen och målet att rikta vaccinet mot en dränerande lymfkörtel. rhIL-12 (4.tg rak dos) kommer sedan att ges subkutant i anslutning till vaccinstället dag 1, 3 och 5 i varje cykel. Denna dos och schema visade sig vara effektiva i vår fas I-studie. Hos hälften av patienterna (kohort B) kommer IL-2 (I MU rak dos) att administreras subkutant dagligen, dag 7-18. Återimmunisering tillsammans med rhIL-12 följt av IL-2 (om tilldelad) kommer att utföras med 3 veckors intervall som i cykel I.

På dag 1 av varje cykel kommer perifert blod att samlas in för att mäta peptidspecifik IFN-y-produktion. Före behandling och efter var tredje cykel kommer PBMC att samlas in för att kvantifiera peptidspecifika CD8 T-celler genom flödescytometrisk analys med peptid/HLA-A2-tetramerer, och bevis för ett molekylärt svar kommer att bedömas genom att utföra RT-PCR. för melanomantigener på perifera blodprover. Dessutom kommer en tumörbiopsi att utföras före behandling, efter de första 3 cyklerna och vid tidpunkten för att avsluta studien för att bedöma immunsvaret i tumörens mikromiljö, inklusive genarrayanalys. Förhoppningen är att dessa studier kommer att avslöja orsaken till bristande kliniskt svar hos patienter med kvarvarande tumörer. Klinisk respons kommer att bedömas som ett sekundärt resultat.