Undersøgelse af MAGE-3/Melan-A/gp 100/NA17 og rhIL-12 med/ud lavdosis IL-2 i metastatisk melanom

Baseret på ovenstående prækliniske og fase I resultater er der opstået en logisk strategi for en anden generation af melanomvaccine. Et randomiseret fase II studie i patienter med metastatisk melanom vil blive gennemført. Patienterne vil først blive HLA-type; HLA-A2-positive patienter vil være berettiget til screening. Når det er muligt, vil hver patient gennemgå en tumorbiopsi for at screene for ekspression af MAGE-3, Melan-A, gplOO og NAI 7 ved hjælp af RT-PCR og immunhistokemi for at bestemme, om T-celler er til stede i læsionen, for at måle cytokin-genet ekspression ved RT-PCR og til at udføre genarray-analyse. Derudover vil blodceller blive analyseret for visse parametre for T-cellefunktion.

Patienterne vil blive randomiseret til kohorter A (ingen IL-2) eller B (med lavdosis IL-2). Til behandling vil perifert blod blive opsamlet og fraktioneret ved densitetscentrifugering for at isolere PBMC som en kilde til APC. PBMC'en vil blive opdelt i fire puljer, som hver vil blive inkuberet med et af følgende peptider: MAGE-3, Melan-A, gp 100 eller Ni 7A. De peptidfyldte celler vil derefter blive vasket og rekombineret til en enkelt suspension i PBS og dødeligt bestrålet. Cirka 120 x 106 pulserede celler vil blive injiceret subkutant på et sted nær en lymfeknude, der ikke menes at være involveret med tumor. Den subkutane vej er valgt af hensyn til sikkerheden, effektiviteten i den prækliniske model og målet om at målrette vaccinen mod en drænende lymfeknude. rhIL-12 (4 .tg lige dosis) vil derefter blive givet subkutant ved siden af ​​vaccinestedet dag 1, 3 og 5 i hver cyklus. Denne dosis og tidsplan viste sig at være effektiv i vores fase I-studie. Hos halvdelen af ​​patienterne (kohorte B) vil IL-2 (I MU lige dosis) blive administreret subkutant dagligt, dag 7-18. Re-immunisering sammen med rhIL-12 efterfulgt af IL-2 (hvis tildelt) vil blive udført med 3 ugers intervaller som i cyklus I.

På dag 1 i hver cyklus vil der blive opsamlet perifert blod for at måle peptidspecifik IFN-y-produktion. Før behandling og efter hver 3 cyklus, vil PBMC blive indsamlet for at kvantificere peptidspecifikke CD8 T-celler ved flowcytometrisk analyse med peptid/HLA-A2 tetramerer, og beviser for en molekylær respons vil blive vurderet ved at udføre RT-PCR. for melanomantigener på perifere blodprøver. Derudover vil der forud for behandling, efter de første 3 cyklusser, og på tidspunktet for afslutning af undersøgelsen, blive udført en tumorbiopsi for at vurdere immunresponset i tumormikromiljøet, inklusive genarray-analyse. Det er håbet, at disse undersøgelser vil afdække årsagen til manglende klinisk respons hos patienter med resterende tumorer. Klinisk respons vil blive vurderet som et sekundært resultat.