해동된 난모세포 및 배아의 형태계측 및 형태동력학

잉여 배아의 냉동 보존은 보조 생식 기술(ART)의 필수 부분이며 현재 IVF 실험실의 표준 일상 절차입니다. 그것의 임상 적용은 (1) 주기당 누적 분만율 증가 가능성 및 (2) 신선 및 연속 냉동 해동 배아 이식 주기(FET) 모두에서 이식 가능한 배아 수의 감소로 구성되어 다태 임신의 위험을 감소시킵니다.

배아를 동결 보존하는 두 가지 다른 기술이 일반적으로 사용됩니다: 느린 동결 및 유리화. 천천히 동결하는 동안 배아는 낮은 농도의 동결 보호제를 사용하여 제어된 속도로 영하의 온도에 노출됩니다. 또는 유리화를 사용하여 배아는 고농도의 동결 보호제와 빠른 냉각 속도를 사용하여 유리와 같은 상태로 빠르게 들어갑니다. 유리화 또는 느린 동결에 의한 인간 배아의 동결 보존을 비교하는 여러 연구가 가능하며 메타 분석이 발표되었습니다. 유리화는 느린 동결보다 생존율이 훨씬 더 높은 것으로 밝혀졌지만 착상율, 임상 임신율 및 출생률에 대한 결과는 명확하지 않은데, 대부분 출생률을 평가하는 잘 설계되고 강력한 전향적 무작위 통제 연구가 부족하기 때문입니다.

이식 가능성이 가장 높은 배아를 선택하기 위한 배아 평가는 일반적으로 광학 현미경을 사용하여 배아 발달 및 형태학적 특성을 기반으로 합니다. 일반적으로 새로운 주기에서 배아의 착상 능력과 관련된 배아 매개변수는 할구의 수, 대칭 및 세포질 단편화 비율입니다. 냉동-해동 배아의 평가를 위해, 냉동-해동 과정에서 생존하는 할구의 비율과 하룻밤 배양 후 발달 능력이 이러한 요인에 추가되어야 합니다.

배아를 채점하고 착상하고 건강한 출산을 유도하는 능력에 따라 배아의 순위를 매기는 비침습적 방법 개발에 대한 현재 연구에는 형태측정학과 형태동력학이 모두 포함됩니다.

Morphometrics 다단계 컴퓨터 이미지를 통해 시간 제한 없이 평가할 수 있으며 배아를 자세히 평가할 수 있습니다. 인간의 신선한 난모세포와 배아 이식 및 발달이 있는 배아에 대한 여러 형태 측정 연구가 발표되었습니다. CASS(Computer Assisted Scoring System)와 결합된 다단계 이미지를 사용하는 형태 측정 연구는 표준 점수 시스템(SSS)에 비해 3일째 할구의 수와 크기를 기반으로 이식 및/또는 출생을 예측하는 데 우수할 수 있습니다. 형태학적 분석은 또한 총 배아 부피와 임상적 임신 사이의 상관관계를 밝혀냈습니다. 인간 배아 및/또는 난모세포의 절대 부피, 형태 계수 및 다양성 계수를 포함한 형태학적 특성을 평가하는 또 다른 연구에서는 성공적으로 착상되어 출생까지 진행된 배아의 자매 할구 사이에 더 높은 다양성 계수가 나타났습니다. 투명대의 외부 및 내부 직경, 투명대의 두께 및 배아 세포 질량 직경을 포함한 형태학적 특성이 기술되었습니다. 그들은 전송 전에 보다 효율적인 배아 평가에 필요한 기준을 예측하는 데 이미지 분석을 사용할 수 있다고 말했습니다. 평균 할구 크기는 232개 배아에 대한 컴퓨터 제어 다단계 분석을 사용한 연구에서 단편화 및 다핵화 정도와 상관관계가 있었습니다. 그러나 지금까지 인간 냉동 해동 배아에 대한 형태 측정 연구는 기술되지 않았습니다.

Morphokinetics 시간 경과 이미징을 통해 배양 환경을 방해하지 않고 초기 성장을 문서화할 수 있습니다. 현재 시간 경과 영상에서 선택된 배아가 기존의 형태학적 평가로 선택된 배아에 비해 착상률이 크게 향상되었음을 보여주는 전향적 무작위 시험 데이터는 없습니다.

그러나, 배아의 시간 경과 영상은 인간 배아의 첫 번째 분열 시간, 분열 사이의 시간, 할구 크기, 다핵 및 착상 가능성 사이의 상관관계를 밝혀냈습니다. 2-8 세포기 사이의 각 배아 절단 시간, 배반포가 되는 능력 및 착상 가능성 사이의 상관관계. 더욱이, 형태동력학 연구는 2세포에서 3세포로의 직접적인 절단이 낮은 착상 및 진행 중인 임신율과 상관관계가 있음을 입증했습니다. 38개의 난모세포에 대한 시간 경과 기록에 따르면, 배아의 질은 수정 사건 및 세포질 파동의 주기성과 관련이 있었습니다. 좋은 품질의 배아는 주입에서 전핵 인접부 및 더 긴 세포질 파동까지 더 균일한 타이밍을 가진 난모세포에서 발생했습니다. 또한, 인간 배아의 세포 조각은 체외 배양 중에 사라질 수 있습니다.

인간 냉동보존 배아의 형태동력학에 대한 연구는 거의 발표되지 않았습니다. 각각 50개 및 103개의 냉동-해동 배아에 대한 비디오 촬영법을 사용하여 매끄러운 막의 발생과 세포-세포 유착이 냉동-분열된 배아의 착상 능력을 예측할 수 있음을 보여주었습니다. Wong et al. 시간 경과 현미경과 유전자 발현 프로파일링을 결합한 연구에서 242개의 과잉 냉동 d1-오래된 배아의 개발을 따랐습니다. 배반포 단계로의 진행 성공은 배아 게놈 활성화 전 수정 후 2일까지 3개의 동적 비침습적 이미징 매개변수를 측정하여 예측할 수 있었습니다. : (1) 첫 번째 세포분열의 기간, (2) 첫 번째 유사분열의 끝과 두 번째 시작 사이의 시간 간격, (3) 두 번째와 세 번째 유사분열 사이의 시간 간격.

이 관찰 연구는 동결(느린 동결 또는 유리화) 후 해동된 인간 배아의 형태학적 및 형태동태학적 매개변수를 설명하는 것을 목표로 합니다. 이 연구는 할구 부피의 진화, 살아남은 할구 사이의 접촉 표면의 진화 및 타임 랩스 이미징을 사용한 배아의 발달에 초점을 맞출 것입니다. 클러스터 분석 기술을 사용하여 환자 특성 및 임상 매개변수와 함께 배아 형태학적 및 형태동력학 매개변수를 분석합니다. 냉동-해동 배아의 형태계측/형태동력학 및 착상 가능성 사이의 상관관계는 단일 배아 이식 주기와 이중 배아 이식 후 이중 이식 주기에서 연구될 것입니다.