합성 모델 면역원과 유도된 B 및 T 세포 레퍼토리 간의 상호작용 모델링. (MOSAIC)

인간 면역 체계의 가장 효과적인 무기 중 하나는 매우 낮은 농도의 항체 단백질이 바이러스, 박테리아 및 독소에 결합하여 이들의 활동 또는 감염 능력을 "중화"하는 능력입니다. 조직 파괴 및 병리를 유발할 수 있는 세포 면역과 달리 항체 매개 면역은 감염을 완전히 방지하면서 매우 수동적일 수 있습니다. 항체가 목표물에 결합하는 방법은 도움이 되지 않는 "차단" 항체 또는 좁게 집중된 중화 항체에서 동일한 병원체의 광범위한 변종을 중화할 수 있는 고도로 보호적인 "광범위한 중화" 항체(bNAbs)에 이르기까지 엄청나게 다양합니다. 이러한 bNAb는 특히 HIV, 인플루엔자 및 너무 좁거나 집중된 면역 반응을 회피하기 위해 바이러스가 변이되는 다른 바이러스 감염에서 추구됩니다. 항체는 "면역원"(면역원은 면역 반응을 유도하는 모든 것, 일반적으로 외래 단백질)이 면역 체계에 의해 흡수되고 특화된 면역 세포에 의해 백혈구(T 및 B 세포)에 나타날 때 발생합니다. 어떤 경우에는 T 세포와 B 세포가 표면의 수용체에 면역원을 결합하여 T 세포가 B 세포가 특정 항체를 생산하도록 "도움"하는 면역 반응을 유발합니다. 단백질이 처리 가능한 조각으로 처리되어 T 및 B 세포에 표시되는 과정과 면역 세포가 생성하는 화학적 신호 패턴은 매우 복잡하지만 결국 항체 반응의 폭(폭)을 결정합니다. HIV 및 인플루엔자와 같은 감염의 경우 수십 년간의 연구 및 임상 백신 시험이 제한적이거나 성공하지 못했습니다. HIV를 예로 들자면, 우리는 면역원이 순진한 인간 B 세포 수용체(BCR) 레퍼토리와 어떻게 상호작용하는지, 그리고 감염 동안이나 예방접종 후에 bNAbs를 유도하는 데 필요한 경로에 대해 거의 완전히 이해하지 못하고 있습니다. 동물 모델은 비인간 종의 순진하고 생식계열 암호화된 B 세포 항체 수용체 레퍼토리가 인간의 그것과 충분히 다르기 때문에 비인간 종에 기초한 백신의 설계 및 선택 문제를 일으키기 때문에 실패했습니다. 또한, HIV-1에 감염된 개인으로부터 분리된 bNAbs는 다른 포유류에서는 거의 발생하지 않거나 전혀 발생하지 않는 구조적 특징을 가지고 있습니다. 실드 키 중화 에피토프(Mascola JR 2013). 따라서 면역 챌린지의 인간 실험 의학 모델에서 보호 bNAb 항바이러스 반응의 발달에서 면역원과 B/T 세포가 상호 작용하는 방식을 더 잘 이해하는 것이 매우 중요합니다.

이 교착 상태를 해결하기 위한 우리의 접근 방식은 인간 B 세포 항체 반응을 중화 범위로 유도하는 데 필요한 구조 및 기타 특성을 결정하기 위해 합리적으로 설계된 모델 면역원으로 인간 면역 체계에 도전하는 것입니다. 우리는 항 HIV bNAb의 특이성과 기능에 대한 합리적인 이해가 있을 뿐만 아니라 수십 년 동안 실패했거나 성공적이지 못한 시험 후 새로운 예방 접종 접근법을 식별해야 할 긴급한 필요성이 있기 때문에 HIV를 실험 모델로 선택했습니다. 또한 HIV 단백질을 면역원으로 사용하는 안전성에 대한 방대한 데이터베이스와 HIV 바이러스 단백질을 설계하고 제조하는 전문 기술이 있습니다. HIV 중화 활동에 대한 분석도 우리 실험실에서 잘 확립되어 있습니다. HIV에 초점을 맞추었지만 우리의 발견은 다른 바이러스 감염에도 적용될 수 있습니다.

이러한 실험적 의학 연구에서 사용하도록 제안하는 모델 면역원은 백신으로 적합하지 않을 가능성이 높으며 모든 임상 개발에는 이러한 실험적 조사에서 수집한 면역학적 통찰력을 기반으로 디자인 개선 및 개발의 반복적인 주기가 필요합니다. 따라서 실제 백신의 설계 과정에 정보를 제공할 수 있는 합리적으로 설계된 모델 면역원에 대한 도출된 면역 반응의 심층적 특성화에 초점이 맞춰져 있습니다. 이 실험 의학 접근법은 인간 면역 체계를 연구하고 백신 접종에 대한 면역 반응에 대한 완전한 정보를 얻는 능력의 전례 없는 발전으로 인해 가능해졌습니다. 생쥐. 이 연구의 주요 초점은 어떤 설계 전략이 인간 생식계열(나이브) B 세포를 프라이밍할 수 있고 항체 반응을 중화 항체 폭의 유도로 유도할 수 있는지 결정하는 것입니다.

우리의 모델 면역원 범위는 중화 항체의 유일한 표적인 HIV-1의 외피(Env) 당단백질을 기반으로 하며, 따라서 면역화에 의한 그러한 항체의 유도와 관련된 유일한 바이러스 암호화 면역원입니다. 결과의 재현성과 최고 수준의 지원자 안전을 보장하기 위해 모든 면역원은 백신 면역원에 적용된 기술을 사용하여 cGMP 하에서 제조됩니다.

Env는 광범위한 아미노산 변이, 구조적 및 구조적 불안정성, 초가변 영역의 면역우세를 가지고 있습니다(Kwong PD, 2011; Sattenau QJ, 2013). 우리는 원위치에서 천연 바이러스 삼량체를 거의 모방하지만 고유한 바이러스 면역 회피 메커니즘을 변경할 수 있는 설계 전략을 통합하는 용해성 면역원을 설계할 것입니다(Sanders RW, 2013). Env는 3개의 동일한 복합체(트리머)로 구성되어 있으며 각 복합체에는 gp120과 gp41이라는 두 개의 분자가 포함되어 있습니다. 이 복합체는 gp140이라는 가용성 분자를 만들기 위해 변형될 수 있습니다. 이 복합체는 면역원의 기반이 됩니다. 우리는 모든 HIV-1 하위 유형에서 나타나는 공통 에피토프에 대한 B 세포 반응을 프라이밍하도록 설계된 모델 합의 gp140 Env 트리머(모든 글로벌 균주의 합의)를 개발했습니다. 우리는 ConM SOSIP 및 ConS UFO라는 두 가지 설계 전략을 활용하여 네이티브와 같은 형태로 안정화했습니다. ConM SOSIP 삼량체는 gp120과 gp41 엑토도메인(gp140을 구성함) 사이의 이황화 연결 결합을 포함하는 새로운 돌연변이를 포함하며, 이는 단량체 서브유닛으로의 분리를 방지합니다.

ConS UFO에는 Env 트리머의 해리를 방지하기 위한 대안 전략으로 gp120 및 gp41 서브유닛을 함께 묶는 짧은 유연한 아미노산 링커가 포함되어 있습니다. 우리는 B 세포 레퍼토리에 대한 효과를 결정하기 위해 두 디자인을 모두 테스트하고자 합니다.

우리의 합의 기반 모델 설계에 대한 중요한 부속물은 Env의 초가변 영역의 면역 우세를 극복하고 보존된 중화 에피토프에 대한 항체 반응에 집중할지 여부를 결정하도록 설계된 3개의 모자이크 gp140 Env 트리머 칵테일을 사용하는 것입니다. 컴퓨터 알고리즘을 사용하여 디자인되었지만 이러한 모자이크는 완벽하게 기능하고 고유한 구조를 가진 진정한 Env 구조를 나타냅니다. 우리의 새로운 디자인은 특히 4차 bNAb 에피토프(Julien, JP, 2013; Kong L, 2013; Lyumkis D, 2013)를 강조하여 원치 않는 면역우성 항체 반응을 제거하고 B 세포를 Env에서 고도로 보존된 취약성 수퍼사이트로 집중시키는 것을 목표로 합니다. 위에서 설명한 ConM SOSIP 및 ConS UFO 삼량체와 마찬가지로 모자이크 삼량체는 gp120 및 gp41이 단량체 서브유닛으로 분리되는 것을 방지하는 이황화 결합을 가지고 있습니다.

MOSAIC 연구 그룹에서 우리는 Env의 보존된 영역에 대한 B 세포 반응에 집중하기 위해 순차적으로(일련의 다른 순서로) 또는 칵테일로 사용되는 세 가지 모자이크 면역원의 사용을 탐구할 것입니다. 이러한 반응을 증폭시키기 위해 우리는 컨센서스 면역원(ConM 및 ConS) 모두를 사용하여 최종 부스팅 면역화를 제공하려고 합니다.

이러한 다양한 전략이 중화 범위를 유도할 수 있는 정도와 관련된 메커니즘 및 동인의 식별은 인간 면역원 도전 연구를 통해서만 경험적으로 결정할 수 있습니다.