스트레스를 받는 일선 의료진의 장내 마이크로바이옴 변화 (AGMFMSS)

2019년 12월, 중국 후베이성 ​​우한에서 신종 코로나바이러스 폐렴 발병이 발생했으며 이후 중국 30개 이상의 성과 전 세계 거의 100개국으로 퍼졌습니다. 2019년 신종 코로나바이러스(2019-nCoV)와의 싸움에서 우한의 의료 종사자들은 높은 감염 위험, 오염으로부터의 부적절한 보호, 고립, 부정적인 감정을 가진 환자, 가족과의 접촉 부족 등 엄청난 스트레스에 직면해 있습니다. , 그리고 피로. 심각한 상황은 스트레스, 불안, 우울 증상, 불면증, 부정, 분노, 두려움과 같은 정신 건강 문제를 일으키고 있습니다. 이러한 정신 건강 문제는 외상 후 스트레스(PTS) 증상을 지속적으로 유발할 수도 있습니다. 2003년 중증급성호흡기증후군(Severe Acute Respiratory Syndrome) 발병이 병원 직원에게 미친 심리적 영향을 조사한 연구에 따르면 응답자의 약 10%가 SARS 발병 이후 높은 수준의 PTS 증상을 경험한 것으로 나타났습니다.

MGB(Microbiome-gut-brain) 축은 확대 연구에서 검증되었으며, 이는 장과 뇌 내의 공생 유기체 간에 양방향 통신이 있음을 의미합니다. 장내 미생물군은 신경, 내분비 및 면역 경로를 통해 뇌 기능에 영향을 미칠 수 있습니다. 예를 들어, 장내 미생물에 의해 생성된 물질은 혈류를 통해 뇌에 도달하는 흡수될 수 있습니다. 차례로 뇌는 신경 및 내분비 경로를 통해 장내 미생물총에 영향을 미칠 수 있습니다. 최근 몇 년 동안 많은 연구가 미생물과 정신 건강 상태의 관련성을 뒷받침합니다. Bercik et al. 성인 무균(GF) BALB/c 마우스(고불안 마우스 변종)의 미생물군을 성인 GF NIH 스위스 마우스(저불안 마우스 변종)에 이식한 후 기증자의 행동 프로필이 수혜자에게서 분명하다는 것을 발견했습니다. 미생물군이 행동에 직접적으로 영향을 미칠 수 있음을 보여줍니다. 또한, 전임상 연구에 따르면 산모의 분리 및 구속, 열 및 음향 스트레스를 포함한 스트레스와 감정은 장 생리학에 영향을 미치고 장의 서식지를 변경하는 스트레스 호르몬 또는 교감 신경 전달 물질의 방출을 통해 장내 미생물의 구성을 변경하는 것으로 나타났습니다. 미생물군. 또한 연구자들은 스트레스가 장 투과성을 증가시키는 능력을 가지고 있음을 발견했는데, 이는 아마도 스트레스로 인한 장 투과성 기능 장애에서 중요한 역할을 하는 코르티코트로핀 방출 인자와 그 수용체(CRFR1 및 CRFR2)의 관여를 통해 가능할 것입니다. 증가된 장 투과성은 박테리아가 장 점막을 가로질러 이동하고 장 신경계(ENS)의 면역 및 신경 세포 모두에 직접 접근할 수 있는 기회를 제공합니다. 스트레스는 또한 자율신경계를 활성화시켜 위산, 담즙 및 점액 분비와 장 운동에 영향을 미칩니다. 장 운동성은 장내 미생물 구성 및 풍부함과 밀접하게 연관되어 있기 때문에 특히 중요합니다. 이러한 연구를 바탕으로 정신 질환을 이해하기 위해 장내 마이크로바이옴에 대한 관심이 점점 높아지고 있습니다.

따라서 본 연구는 16s rRNA 시퀀싱 결과에 따른 장내 미생물의 변화하는 프로파일을 분석하기 위해 3가지 시점에서 일선 의료진의 일부 분변 샘플과 임상 평가를 수집하는 것을 목표로 한다. 일치된 건강 대조군의 샘플은 또한 장내 미생물군집 커뮤니티의 노출된 그룹과 비교하기 위해 시퀀싱됩니다.

방법 연구 설계 및 샘플 수집 Xi'an Jiaotong University 제1부속병원의 일선 근무자는 (1) 우한을 지원하기 위해 의료 팀에 참여하는 경우, (2) 18~50세, ( 3) 검체채취 전 3개월 이내에 항생제를 복용하지 않은 자, (4) 17.5<체질량지수(BMI)<30. 건강한 컨트롤은 의료진에 합류하지 않았지만 위의 마지막 세 가지 조건을 충족하는 제 1 부속 병원 직원 중에서 연령, 성별, BMI 및 다이어트에 대한 일선 직원과 일치하도록 선택됩니다. 다음 기준을 충족하는 모든 참가자는 제외됩니다: (1) 심각한 심혈관 질환, 혈액 질환 및 내분비 질환, (2) 암 또는 그 합병증의 병력이 있는 경우, (3) 활동성 위장 질환 또는 합병증이 있는 경우 및 심각한 전신 질환, (4) 뇌 기질 질환 또는 합병증 및 정신 지체의 병력이 있는 경우, (5) 기분 장애 및 불안 장애와 같은 정신 장애가 있는 경우, (6) 임신 또는 수유 중인 경우, (7) 지난 주에 음주( 주류>250ml 또는 맥주>1병) 또는 전날(주류>50ml 또는 맥주>50ml). 포함된 모든 사람은 샘플 수집 전에 서명된 정보에 입각한 동의를 제공해야 하며 프로토콜은 Xi'an Jiaotong University의 첫 번째 부속 병원 윤리 위원회(KYLLSL-2020-043)의 승인을 받았습니다. 각 직원의 분변 검체는 병원에서 갓 채취한 후 지정된 분변 채취기를 사용하여 -80℃에서 동결해야 합니다.

임상 평가자 PHQ-15, PHQ-9, GAD-7, PSQI, SCL-90, IES-R은 노출군과 비노출군의 정신질환 관련 임상증상 평가에 사용될 예정이다.

DNA 추출 및 16S rRNA 시퀀싱 조사관은 수집된 모든 대변 샘플에 대해 16S rRNA 시퀀싱을 수행합니다. 간단히 말해서, 박테리아 게놈 DNA를 추출하고 16S rRNA 전체 영역을 PCR로 증폭한 다음 시퀀싱합니다.

통계 분석 QIIME(Quantitative Insights Into Microbial Ecology)를 사용하여 16S rRNA 시퀀싱 데이터를 분석합니다. 그런 다음 조사관은 usearch를 사용하여 서열을 분류 단위(OTU)로 97% 동일성으로 클러스터링하고 OTU 테이블을 구성합니다. 미생물 군집 구조, 알파 다양성 및 베타 다양성을 분석합니다. LEfSe 분석 및 랜덤 포레스트 분석을 사용하여 서로 다른 그룹 간의 바이오마커를 찾습니다. Spearman의 순위 상관관계는 임상 평가와 스트레스 관련 미생물 군집 사이의 상관관계를 식별하는 데 사용될 것입니다.