Alteraciones del microbioma intestinal en el personal médico de primera línea bajo estrés (AGMFMSS)

En diciembre de 2019, surgió un nuevo brote de neumonía por coronavirus en Wuhan, provincia de Hubei, China, y posteriormente se propagó a más de 30 provincias de China y casi 100 países del mundo. En la lucha contra el nuevo coronavirus de 2019 (2019-nCoV), los trabajadores médicos en Wuhan se han enfrentado a un estrés enorme, incluido un alto riesgo de infección y protección inadecuada contra la contaminación, aislamiento, pacientes con emociones negativas, falta de contacto con sus familias. y agotamiento. La grave situación está provocando problemas de salud mental como estrés, ansiedad, síntomas depresivos, insomnio, negación, ira y miedo. Estos problemas de salud mental también podrían causar síntomas de estrés postraumático (PTS) en un tiempo duradero. Una investigación que examinó el impacto psicológico del brote de síndrome respiratorio agudo severo de 2003 en los empleados del hospital encontró que alrededor del 10% de los encuestados habían experimentado niveles altos de síntomas de SPT desde el brote de SARS.

El eje microbioma-intestino-cerebro (MGB) ha sido validado en estudios en expansión, lo que significa que existe una comunicación bidireccional entre los organismos comensales dentro del intestino y el cerebro. La microbiota intestinal puede influir en la función cerebral a través de vías neurales, endocrinas e inmunitarias. Por ejemplo, las sustancias producidas por la microbiota intestinal pueden ser absorbidas llegando al cerebro por el torrente sanguíneo. El cerebro, a su vez, puede influir en la microbiota intestinal a través de vías neuronales y endocrinas. En los últimos años, muchas investigaciones respaldan la relevancia de la microbiota y el estado de salud mental. Bercik et al. microbiota trasplantada de ratones adultos BALB/c libres de gérmenes (GF) (una cepa de ratón con mucha ansiedad) a ratones adultos GF NIH Swiss (una cepa de ratón con poca ansiedad), y luego se encontró que el perfil conductual del donante era evidente en el receptor animal, lo que demuestra que la microbiota puede afectar directamente el comportamiento. Además, los estudios preclínicos han demostrado que el estrés y las emociones, incluida la separación y la restricción maternas, el calor y el estrés acústico, alteran la composición de la microbiota intestinal, tal vez a través de la liberación de hormonas del estrés o neurotransmisores simpáticos que influyen en la fisiología intestinal y alteran el hábitat de la microbiota Además, los investigadores descubrieron que el estrés tiene la capacidad de aumentar la permeabilidad intestinal, probablemente a través de la participación del factor liberador de corticotrofina y sus receptores (CRFR1 y CRFR2), que desempeñan un papel clave en la disfunción de la permeabilidad intestinal inducida por el estrés. El aumento de la permeabilidad intestinal brinda a las bacterias la oportunidad de trasladarse a través de la mucosa intestinal y acceder directamente a las células inmunitarias y neuronales del sistema nervioso entérico (SNE). El estrés también activa el sistema nervioso autónomo, que afecta la secreción de ácido gástrico, bilis y moco, así como la motilidad intestinal. La motilidad intestinal es de particular importancia ya que está fuertemente asociada con la composición y riqueza de la microbiota intestinal. Con base en estas investigaciones, el microbioma intestinal merece cada vez más atención para comprender los trastornos psiquiátricos.

Por lo tanto, el presente estudio tiene como objetivo recopilar las muestras fecales y las evaluaciones clínicas de una parte de los trabajadores médicos de primera línea en tres momentos para analizar el perfil cambiante del microbioma intestinal según los resultados de la secuenciación del ARNr 16s. Las muestras de los controles de salud coincidentes también se secuenciarán para compararlas con el grupo expuesto en la comunidad de microbiomas intestinales.

Métodos Diseño del estudio y recolección de muestras Se incluirán los trabajadores de primera línea en el Primer Hospital Afiliado de la Universidad Xi'an Jiaotong si se conforman con (1) participar en el equipo médico para apoyar a Wuhan, (2) de 18 a 50 años de edad, ( 3) no tomó antibióticos dentro de los 3 meses anteriores a la recolección de la muestra, (4) 17,5<índice de masa corporal (IMC)<30. Los controles sanos se seleccionarán del personal del First Affiliated Hospital que no se unió al equipo médico pero que cumple con las últimas tres condiciones anteriores para coincidir con el personal de primera línea en cuanto a edad, sexo, IMC y dieta. Cualquier participante será excluido si cumple con los siguientes criterios: (1) tiene enfermedad cardiovascular grave, enfermedad de la sangre y enfermedad endocrina, (2) tiene antecedentes de cáncer o sus complicaciones, (3) tiene enfermedades gastrointestinales activas o complicaciones y enfermedades sistémicas graves, (4) tener antecedentes de enfermedades o complicaciones orgánicas cerebrales y retraso mental, (5) tener trastornos mentales como trastorno del estado de ánimo y trastornos de ansiedad, (6) estar embarazada o en período de lactancia, (7) haber bebido en la última semana ( licor>250ml o cerveza>1 botella) o el día anterior (licor>50ml o cerveza>50ml). Todas las personas incluidas deben proporcionar un consentimiento informado firmado antes de la recolección de muestras, y el protocolo fue aprobado por el Comité de Ética del Primer Hospital Afiliado de la Universidad Xi'an Jiaotong (KYLLSL-2020-043). Las muestras fecales de cada miembro del personal deben recolectarse en el hospital y congelarse a -80 ℃ utilizando un recolector de heces específico.

Las evaluaciones clínicas PHQ-15, PHQ-9, GAD-7, PSQI, SCL-90 e IES-R se utilizarán para la evaluación de los síntomas clínicos relacionados con el trastorno psiquiátrico para el grupo expuesto en tres puntos temporales y el grupo no expuesto.

Extracción de ADN y secuenciación del ARNr 16S Los investigadores realizarán la secuenciación del ARNr 16S de todas las muestras fecales recogidas. Brevemente, se extraerá el ADN genómico bacteriano y la región completa del ARNr 16S se amplificará mediante PCR y luego se secuenciará.

Análisis estadístico Los datos de secuenciación del rARN 16S se analizarán utilizando Perspectivas Cuantitativas de la Ecología Microbiana (QIIME). Luego, los investigadores usan usearch para agrupar secuencias en unidades taxonómicas (OTU) con una identidad del 97 % y construyen la tabla OTU. Se analizarán la estructura de la comunidad microbiana, la diversidad alfa y la diversidad beta. El análisis LEfSe y el análisis de bosque aleatorio se utilizarán para encontrar el biomarcador entre diferentes grupos. La correlación de rango de Spearman se utilizará para identificar la correlación entre las evaluaciones clínicas y el microbioma asociado al estrés.