Změny střevního mikrobiomu u předního zdravotnického personálu ve stresu (AGMFMSS)

V prosinci 2019 se ve Wu-chanu v provincii Hubei v Číně objevil nový koronavirový zápal plic, který se následně rozšířil do více než 30 provincií v Číně a téměř 100 zemí světa. V boji proti novému koronaviru z roku 2019 (2019-nCoV) čelí zdravotníci ve Wu-chanu obrovskému stresu, včetně vysokého rizika infekce a nedostatečné ochrany před kontaminací, izolace, pacientů s negativními emocemi, nedostatku kontaktu se svými rodinami. a vyčerpání. Závažná situace způsobuje problémy duševního zdraví, jako je stres, úzkost, depresivní příznaky, nespavost, popírání, hněv a strach. Tyto problémy s duševním zdravím by také mohly dlouhodobě způsobit příznaky posttraumatického stresu (PTS). Výzkum zkoumající psychologický dopad vypuknutí těžkého akutního respiračního syndromu v roce 2003 na zaměstnance v nemocnici zjistil, že asi 10 % respondentů zažilo od vypuknutí SARS vysoké úrovně symptomů PTS.

Osa mikrobiom-střevo-mozek (MGB) byla ověřena v rozšiřujících se studiích, což znamená, že existuje obousměrná komunikace mezi komenzálními organismy ve střevě a mozku. Střevní mikroflóra může ovlivnit funkci mozku prostřednictvím nervových, endokrinních a imunitních cest. Například látky produkované střevní mikroflórou mohou být absorbovány krevním oběhem až do mozku. Mozek zase může ovlivňovat střevní mikroflóru prostřednictvím neuronálních a endokrinních drah. V posledních letech mnoho výzkumů podporuje význam mikrobioty a stavu duševního zdraví. Berčík a kol. transplantovali mikroflóru z dospělých bezmikrobních (GF) myší BALB/c (kmen vysoce úzkostných myší) do dospělých myší GF NIH Swiss (kmen myší s nízkou úzkostí), poté zjistili, že profil chování dárce byl zřejmý u příjemce zvíře, což ukazuje, že mikrobiota může přímo ovlivnit chování. Kromě toho předklinické studie ukázaly, že stres a emoce, včetně mateřské separace a omezení, horka a akustického stresu, mění složení střevní mikroflóry, možná prostřednictvím uvolňování stresových hormonů nebo sympatických neurotransmiterů, které ovlivňují fyziologii střev a mění životní prostředí. mikrobiota. Kromě toho vědci zjistili, že stres má schopnost zvýšit propustnost střev, pravděpodobně prostřednictvím zapojení faktoru uvolňujícího kortikotropin a jeho receptorů (CRFR1 a CRFR2), které hrají klíčovou roli v dysfunkci střevní propustnosti vyvolané stresem. Zvýšená střevní permeabilita poskytuje bakteriím příležitost k translokaci přes střevní sliznici a přímý přístup k imunitním i neuronovým buňkám enterického nervového systému (ENS). Stres také aktivuje autonomní nervový systém, který ovlivňuje žaludeční kyselinu, sekreci žluči a hlenu a také motilitu střev. Střevní motilita je zvláště důležitá, protože je silně spojena se složením a bohatostí střevní mikroflóry. Na základě těchto výzkumů si střevní mikrobiom stále více zaslouží pozornost k pochopení psychiatrických poruch.

Cílem této studie je proto shromáždit vzorky stolice a klinická hodnocení od části předních lékařů ve třech časových bodech, aby bylo možné analyzovat měnící se profil střevního mikrobiomu podle výsledků sekvenování 16s rRNA. Vzorky z odpovídajících zdravotních kontrol budou také sekvenovány pro srovnání s exponovanou skupinou v komunitě střevních mikrobiomů.

Metody Návrh studie a sběr vzorků Pracovníci v první přidružené nemocnici na univerzitě Xi'an Jiaotong budou zahrnuti, pokud vyhověli (1) účasti v lékařském týmu na podporu Wu-chanu, (2) ve věku 18 až 50 let, ( 3) nebral antibiotika do 3 měsíců před odběrem vzorku, (4) 17,5<body mass index (BMI)<30. Zdravé kontroly budou vybrány ze zaměstnanců v First Affiliated Hospital, kteří se nepřipojili k lékařskému týmu, ale splňují poslední tři výše uvedené podmínky, aby se shodovali s předními zaměstnanci z hlediska věku, pohlaví, BMI a stravy. Každý účastník bude vyloučen, pokud splní následující kritéria: (1) má závažné kardiovaskulární onemocnění, onemocnění krve a endokrinní onemocnění, (2) má v anamnéze rakovinu nebo její komplikace, (3) má aktivní gastrointestinální onemocnění nebo komplikace a závažná systémová onemocnění, (4) mají v anamnéze organická onemocnění nebo komplikace v mozku a mentální retardaci, (5) mají duševní poruchy, jako jsou poruchy nálady a úzkostné poruchy, (6) těhotná nebo kojící, (7) pití v posledním týdnu ( likér>250ml nebo pivo>1 láhev) nebo předchozí den (likér>50ml nebo pivo>50ml). Všechny zahrnuté osoby by měly před odběrem vzorku poskytnout podepsaný informovaný souhlas a protokol byl schválen Etickou komisí první přidružené nemocnice univerzity Xi'an Jiaotong (KYLLSL-2020-043). Vzorky stolice od každého personálu by měly být čerstvě odebrány v nemocnici a zmraženy na -80 °C pomocí specifikovaného sběrače stolice.

Klinický hodnotitel PHQ-15, PHQ-9, GAD-7, PSQI, SCL-90 a IES-R bude použit pro hodnocení klinických příznaků souvisejících s psychiatrickou poruchou u exponované skupiny ve třech časových bodech a neexponované skupiny.

Extrakce DNA a sekvenování 16S rRNA Výzkumníci provedou sekvenování 16S rRNA pro všechny odebrané vzorky stolice. Stručně řečeno, bakteriální genomová DNA bude extrahována a celá oblast 16S rRNA bude amplifikována pomocí PCR a poté sekvenována.

Statistická analýza Údaje o sekvenování 16S rRNA budou analyzovány pomocí Quantitative Insights Into Microbial Ecology (QIIME). Vyšetřovatelé pak použijí usearch k seskupení sekvencí do taxonomických jednotek (OTU) s 97% identitou a vytvoří tabulku OTU. Bude analyzována struktura mikrobiální komunity, alfa diverzita a beta diverzita. K nalezení biomarkeru mezi různými skupinami bude použita analýza LEfSe a náhodná analýza lesa. K identifikaci korelace mezi klinickým hodnocením a mikrobiomem spojeným se stresem bude použita Spearmanova hodnostní korelace.