Alterações do microbioma intestinal na equipe médica da linha de frente sob estresse (AGMFMSS)

Em dezembro de 2019, um novo surto de pneumonia por coronavírus surgiu em Wuhan, província de Hubei, China, e posteriormente se espalhou para mais de 30 províncias na China e quase 100 países no mundo. Na luta contra o novo coronavírus de 2019 (2019-nCoV), os trabalhadores médicos em Wuhan têm enfrentado enorme estresse, incluindo alto risco de infecção e proteção inadequada contra contaminação, isolamento, pacientes com emoções negativas, falta de contato com suas famílias , e exaustão. A situação grave está causando problemas de saúde mental, como estresse, ansiedade, sintomas depressivos, insônia, negação, raiva e medo. Esses problemas de saúde mental também podem causar sintomas de estresse pós-traumático (PTS) em um tempo duradouro. Uma pesquisa que examinou o impacto psicológico do surto de síndrome respiratória aguda grave em funcionários do hospital em 2003 descobriu que cerca de 10% dos entrevistados experimentaram altos níveis de sintomas de PTS desde o surto de SARS.

O eixo microbioma-intestino-cérebro (MGB) foi validado em estudos em expansão, o que significa que há comunicação bidirecional entre organismos comensais dentro do intestino e do cérebro. A microbiota intestinal pode influenciar a função cerebral por meio de vias neurais, endócrinas e imunes. Por exemplo, substâncias produzidas pela microbiota intestinal podem ser absorvidas chegando ao cérebro pela corrente sanguínea. O cérebro, por sua vez, pode influenciar a microbiota intestinal através de vias neuronais e endócrinas. Nos últimos anos, muitas pesquisas apoiam a relevância da microbiota e do estado de saúde mental. Bercik et ai. microbiota transplantada de camundongos BALB/c livres de germes (GF) adultos (uma cepa de camundongos altamente ansiosos) para camundongos GF NIH Swiss adultos (uma cepa de camundongos de baixa ansiedade), e então descobriu que o perfil comportamental do doador era evidente no receptor animal, mostrando que a microbiota pode afetar diretamente o comportamento. Além disso, estudos pré-clínicos mostraram que o estresse e as emoções, incluindo separação e contenção materna, calor e estresse acústico, alteram a composição da microbiota intestinal, talvez por meio da liberação de hormônios do estresse ou neurotransmissores simpáticos que influenciam a fisiologia intestinal e alteram o habitat de a microbiota. Além disso, os pesquisadores descobriram que o estresse tem a capacidade de aumentar a permeabilidade intestinal, provavelmente através do envolvimento do fator de liberação de corticotrofina e seus receptores (CRFR1 e CRFR2), que desempenham um papel fundamental na disfunção da permeabilidade intestinal induzida pelo estresse. O aumento da permeabilidade intestinal fornece às bactérias uma oportunidade de se translocar através da mucosa intestinal e acessar diretamente as células imunes e neuronais do sistema nervoso entérico (ENS). O estresse também ativa o sistema nervoso autônomo, que afeta o ácido gástrico, a bile e a secreção de muco, bem como a motilidade intestinal. A motilidade intestinal é de particular importância, pois está fortemente associada à composição e riqueza da microbiota intestinal. Com base nessas pesquisas, o microbioma intestinal merece cada vez mais atenção para entender os transtornos psiquiátricos.

Portanto, o presente estudo tem como objetivo coletar amostras fecais e avaliações clínicas de uma parte dos trabalhadores médicos da linha de frente em três momentos para analisar o perfil de mudança do microbioma intestinal de acordo com os resultados do sequenciamento de 16s rRNA. As amostras dos controles de saúde correspondentes também serão sequenciadas para comparação com o grupo exposto na comunidade do microbioma intestinal.

Métodos Desenho do estudo e coleta de amostras Os trabalhadores da linha de frente no Primeiro Hospital Afiliado da Universidade de Xi'an Jiaotong serão incluídos se estiverem em conformidade com (1) fazer parte da equipe médica para apoiar Wuhan, (2) de 18 a 50 anos, ( 3) não tomou antibióticos nos 3 meses anteriores à coleta da amostra, (4) 17,5<índice de massa corporal (IMC)<30. Os controles saudáveis ​​serão selecionados entre as equipes do First Affiliated Hospital que não se juntaram à equipe médica, mas preenchem as três últimas condições acima para corresponder às equipes da linha de frente em idade, sexo, IMC e dieta. Qualquer participante será excluído se preencher os seguintes critérios: (1) ter doença cardiovascular grave, doença do sangue e doença endócrina, (2) ter histórico de câncer ou suas complicações, (3) ter doenças ou complicações gastrointestinais ativas e doenças sistêmicas graves, (4) tem histórico de doenças orgânicas cerebrais ou complicações e retardo mental, (5) tem transtornos mentais, como transtorno de humor e transtornos de ansiedade, (6) está grávida ou amamentando, (7) bebeu na última semana ( licor>250ml ou cerveja>1garrafa) ou no dia anterior (licor>50ml ou cerveja>50ml). Todas as pessoas incluídas devem fornecer consentimento informado assinado antes da coleta da amostra, e o protocolo foi aprovado pelo Comitê de Ética do Primeiro Hospital Afiliado da Universidade de Xi'an Jiaotong (KYLLSL-2020-043). As amostras fecais de cada equipe devem ser coletadas recentemente no hospital e congeladas a -80 ℃ usando o coletor fecal especificado.

Os avaliadores clínicos PHQ-15, PHQ-9, GAD-7, PSQI, SCL-90 e IES-R serão utilizados para a avaliação de sintomas clínicos relacionados ao transtorno psiquiátrico para grupo exposto em três momentos e grupo não exposto.

Extração de DNA e sequenciamento do 16S rRNA Os investigadores realizarão o sequenciamento do 16S rRNA para todas as amostras fecais coletadas. Resumidamente, o DNA genômico bacteriano será extraído, e toda a região 16S rRNA será amplificada por PCR e então sequenciada.

Análise estatística Os dados de sequenciamento de 16S rRNA serão analisados ​​usando Quantitative Insights Into Microbial Ecology (QIIME). Os investigadores então usam usearch para agrupar sequências em unidades taxonômicas (OTUs) com 97% de identidade e construir a tabela OTU. A estrutura da comunidade microbiana, a diversidade alfa e a diversidade beta serão analisadas. A análise LEfSe e a análise de floresta aleatória serão usadas para encontrar o biomarcador entre os diferentes grupos. A correlação de classificação de Spearman será usada para identificar a correlação entre as avaliações clínicas e o microbioma associado ao estresse.