호중구 유래 ROS 생성 측정이 패혈증의 새로운 바이오마커가 될 수 있습니까? (LIT-sepsis)

소개:

패혈증은 장기 기능 장애로 이어지는 감염에 대한 조절되지 않은 숙주 반응으로 정의됩니다. 패혈증과 패혈성 쇼크는 수백만 명의 사람들에게 영향을 미치는 중요한 건강 문제로 매년 전 세계적으로 심각한 사망률을 초래합니다. 진단 및 적절한 치료 시작의 지연은 패혈증 관련 사망의 가장 중요한 원인입니다. 한편, 패혈증의 과진단과 광범위 항생제 치료의 시작은 부적절하게 병원비 증가, 항생제 관련 부작용, 항생제 내성 증가, 내성 병원내 감염 발생 등의 결과를 초래한다. 이러한 정확한 구분을 위해 오늘날까지 수많은 바이오마커가 연구되었습니다. 패혈증 관련 바이오마커의 기대되는 이점은 감염 및 패혈증의 검출, 패혈증의 경과를 예측할 수 있는 가능성 또는 치료 지침입니다. 이 주제에 대해 150개 이상의 바이오마커가 연구되었지만 임상 실습의 모든 측면에서 이러한 기대치를 충족하는 단일 바이오마커는 없습니다.

호중구는 패혈증에서 숙주 반응의 발달에 중요한 역할을 합니다. 호중구는 주화성, 식균 작용, 반응성 산소 종(ROS) 및 과립 단백질의 방출, 이러한 목적을 위한 사이토카인의 생성 및 방출을 포함하는 다양한 메커니즘을 사용하여 작동합니다. 감염과 싸우기 위해서는 제어된 호중구 반응이 필요합니다. 최근 시험관 내 화학 자극에 반응하여 ROS를 생산하는 백혈구(주로 호중구)의 능력을 평가하는 기능 분석이 입증되었습니다. Leukocyte ImmunoTest™(LIT™)는 모세혈관, 동맥 또는 정맥 공급원에서 얻을 수 있는 소량의 혈액을 사용하여 호중구 ROS 방출을 구체적이고 신속하게(10분) 정량화합니다. 따라서 LIT 점수는 슈퍼옥사이드 라디칼을 실시간으로 생성하는 호중구의 세포 용량을 모니터링하기 위한 생리학적 관련 수단을 제공합니다. 호중구의 세포 기능 장애에 대한 객관적인 마커는 임상의가 감염 상태와 관련된 변화를 감지 및 모니터링하고 패혈증의 진행 및 개입의 긍정적 효과를 결정하는 데 유용한 도구가 될 것입니다.

방법:

본 연구는 대학병원 내과의학과 중환자실 및 내과에서 윤리위원회 승인을 받아 전향적 관찰연구로 시행하였다. 환자 모집단은 다양한 감염성 병인으로 인해 ICU 또는 내부에 입원한 환자로 구성됩니다. 대조군은 ICU에 입원하거나 비감염성 병인으로 입원한 외래 환자 또는 입원 환자로 구성됩니다. PMA에 반응하는 ROS 생성은 임상 샘플에서 수행되었으며 수집 후 30분 이내에 분석되었습니다. LIT 검사는 사망 또는 연구가 수행되는 병동에서 퇴원할 때까지 환자군에 대해 매일 또는 격일로 수행되었습니다. LIT 검사는 외래환자 통제일에 외래환자 그룹에 대해 1회만 수행되었다.

광도계에 의한 ROS 생성 측정:

일상적인 테스트를 위해 채취한 임상 샘플에서 ROS 생산을 측정했습니다. 간략하게, 새로 채취한 혈액(정맥주사로 채취) 10μl 샘플을 포르볼 12-미리스테이트 13-아세테이트(PMA; Sigma) 및 루미놀을 함유하는 100 마이크로리터의 인산완충식염수(PBS)에 첨가했습니다. 용액을 37.5℃에서 10분 동안 배양하였다. 화학발광은 RLU(relative light unit)에서 휴대용 발광측정기(3M, Clean-Trace, NG3)를 사용하여 10분 후에 정량화되었습니다. 각 환자에 대한 호중구 기능의 상관 관계로서 LIT 점수를 플롯했습니다. 비정상적으로 높은(과생산) ROS 생성은 감염, 패혈증 또는 패혈성 쇼크와 관련이 있습니다. 이는 LIT™ 및 LIT™/호중구 수 비율(LIT/N)이 예측 임상 도구로 사용될 가능성을 높입니다.