La mesure de la production de ROS dérivés des neutrophiles peut-elle être un nouveau biomarqueur du sepsis ? (LIT-sepsis)

Introduction:

La septicémie est définie comme la réponse dérégulée de l'hôte à l'infection entraînant un dysfonctionnement des organes. La septicémie et le choc septique sont des problèmes de santé importants qui affectent des millions de personnes, entraînant chaque année un taux de mortalité élevé dans le monde. Le retard dans le diagnostic et la mise en route d'un traitement approprié sont les causes les plus importantes de mortalité liée au sepsis. D'autre part, le surdiagnostic du sepsis et l'instauration d'une antibiothérapie à large spectre ont des conséquences inappropriées telles que l'augmentation des coûts hospitaliers, les effets secondaires liés aux antibiotiques, l'augmentation de la résistance aux antibiotiques et le développement d'infections nosocomiales résistantes. Pour faire cette distinction précise, un grand nombre de biomarqueurs ont été étudiés jusqu'à aujourd'hui. Le bénéfice attendu des biomarqueurs liés à la septicémie est la détection de l'infection et de la septicémie, la possibilité de prédire l'évolution de la septicémie ou l'orientation du traitement. Bien qu'il existe plus de 150 biomarqueurs étudiés sur ce sujet, il n'y a pas un seul biomarqueur qui réponde à ces attentes dans tous les aspects de la pratique clinique.

Les neutrophiles jouent un rôle vital dans le développement de la réponse de l'hôte dans le sepsis. Les neutrophiles fonctionnent en utilisant un certain nombre de mécanismes différents, notamment la chimiotaxie, la phagocytose, la libération d'espèces réactives de l'oxygène (ROS) et de protéines granulaires, ainsi que la production et la libération de cytokines à cette fin. Une réponse contrôlée des neutrophiles est nécessaire pour combattre les infections. Récemment, un test fonctionnel qui évalue la capacité des leucocytes (principalement des neutrophiles) à produire des ROS en réponse à une stimulation chimique in vitro a été démontré. Le Leukocyte ImmunoTest™ (LIT™) quantifie spécifiquement et rapidement (10 minutes) la libération de ROS neutrophiles en utilisant un petit volume de sang pouvant être obtenu à partir de sources capillaires, artérielles ou veineuses. En tant que tel, le score LIT fournit un moyen physiologiquement pertinent pour surveiller la capacité cellulaire des neutrophiles à produire des radicaux superoxydes en temps réel. Un marqueur objectif du dysfonctionnement cellulaire des neutrophiles serait un outil utile pour le clinicien pour détecter et surveiller les changements liés à l'état de l'infection et pour déterminer le développement d'une septicémie et les effets positifs des interventions.

Méthode:

L'étude a été menée sous la forme d'une étude observationnelle prospective avec l'approbation d'un comité d'éthique dans une unité de soins intensifs médicaux et appartient au service des maladies internes d'un hôpital universitaire. La population de patients est composée de patients qui ont été admis aux soins intensifs ou à l'intérieur en raison de diverses étiologies infectieuses. Le groupe témoin est composé de patients ambulatoires ou hospitalisés admis en réanimation ou en interne pour des étiologies non infectieuses. La production de ROS en réponse au PMA a été réalisée sur des échantillons cliniques et analysée dans les 30 minutes suivant le prélèvement. Le test LIT a été effectué tous les jours ou tous les deux jours pour le groupe de patients jusqu'au décès ou à la sortie des unités où l'étude est menée. Le test LIT a été effectué une seule fois pour le groupe ambulatoire le jour du contrôle ambulatoire.

Mesures de production de ROS par luminomètre :

La production de ROS a été mesurée sur des échantillons cliniques prélevés pour des tests de routine. En bref, des échantillons de 10 μl de sang fraîchement obtenu (obtenu par ponction veineuse) ont été ajoutés à 100 microlitres de solution saline tamponnée au phosphate (PBS) contenant du phorbol 12-myristate 13-acétate (PMA; Sigma) et du luminol. La solution a été incubée pendant 10 minutes à 37,5°C. La chimiluminescence a été quantifiée après 10 minutes à l'aide d'un luminomètre portatif (3M, Clean-Trace, NG3) en unités de lumière relative (RLU). Les scores LIT en tant que corrélat de la fonction des neutrophiles pour chaque patient ont été tracés. Une génération de ROS anormalement élevée (hyperproduction) était associée à une infection, une septicémie ou un choc septique. Cela soulève la possibilité que LIT™ et LIT™/rapport de nombre de neutrophiles (LIT/N) soient utilisés comme outil clinique prédictif.