경구 투여 된 NAD+ 전구체의 대사 플럭스 추적

배경과 중요성

1.1 생리학에서 NAD+의 역할 니코틴 아미드 아데닌 디 뉴클레오티드 (NAD+)는 산화 된 (NAD+) 및 감소 된 (NADH) 형태로 존재하는 모든 살아있는 유기체의 주요 코엔자임이다. 산화 환원 반응 및 ATP 세대에서의 중요한 역할 외에도 NAD+는 또한 시르 투 인, PARP 및 CD38과 같은 몇몇 신호 효소에 대한 공동-서류 역할을한다. 전신 NAD+ 기능 부전은 pellagra와 같은 질병을 유발할 수 있습니다. 감소 된 NAD+ 가용성은 노화 및 연령 관련 장애에 연루되어 있습니다.

1.2 NAD+ 전구체 (예 : NMN, NR, NAM)의 구강 NAD+ 전구체 투여 NAD+ 레벨을 향상시킬 수 있습니다. 인간의 연구에 따르면 경구 NMN이 혈액 NAD+ 농도를 증가시키는 것으로 나타 났지만, 그 흡수, 신진 대사 및 전반적인 생체 이용률의 많은 측면은 여전히 ​​잘 이해되지 않습니다. 설치류 연구에 따르면 경구 NMN은 장에서 광범위한 1 차 대사를 겪고 있으며, 전신 순환에 들어가기 전에 NAM으로의 부분 전환이 발생합니다.

1.3 노화 및 NAD+ 설치류 모델에서는 동물이 나이가 들어감에 따라 NAD+ 수준이 자주 감소합니다. 일부 증거에 따르면 노화 설치류에서 NAD+ 회전율이 높아질 수 있으며 NAD+ 소비율이 높을 수 있습니다. 그러나, 동등한 추적자 연구는 아직 인간에게서 수행되지 않았다.

1.4 인간 추적기 연구의 필요성이 화합물은 연령 관련 질병의 예방 및 치료를 위해 조사되고 있습니다. 그들이 어떻게 흡수되는지와 다른 조직에서 NAD+를 정확하게 상승시키는 방법을 명확히해야합니다. 안정적인 동위 원소 표지 된 NMN 및 NAM을 사용하면 구강 전구체의 플럭스를 혈액, 근육, 소변 및 대변으로 매핑하는 데 도움이되며 노화가 NAD+ 회전율에 어떤 영향을 미치는지를 밝힐 것입니다.

2. 목표와 목표

조준 1 : 건강한 청소년에게 안정적인 동위 원소 추적기 및 질량 분석법을 사용하여 NMN 또는 NAM이 신진 대사되는 방법, NAD+ 풀에 들어가는 방법 및 다른 대사로 배설되거나 전환되는 양을 추적합니다.

AIM 2 : 노인의 동일한 플럭스 (65 세 이상)의 동일한 플럭스를 비교하십시오. 조사관은 구체적으로 연령대가 선구자에서 NAD+로의 대사 경로를 변경하는지 여부와 노인이 NAD+의 더 높은 소비 (회전)를 보이는지 여부를보고 싶어합니다.

3. 학습 디자인

3.1 브리검 및 여성 병원에서의 단일 센터 시험.

그룹 : 두 주요 참가자 그룹 :

그룹 A (NMN Group) : 16 명의 참가자 (18-40 세의 8 명의 성인, 65 세 이상의 노인 8 명).

그룹 B (NAM Group) : 16 명의 참가자 (8 세; 8 세). 각 참가자는 14 일 동안 NMN 또는 NAM을 경구로 사용합니다. 이 연구는 안정적인 동위 원소 (비 방사성)를 사용하여 NAD+ 및 하류 대사 산물에 이러한 분자가 어떻게 나타나는지 추적하기 위해 NMN 또는 NAM을 표시합니다.

3.2 치료 기간 참가자는 14 일 동안 할당 된 치료 (NMN 또는 NAM)의 일일 복용량을받습니다. 상세한 샘플링은 1 일 및 14 일에 수행됩니다.

3.3 복용량 NMN : 하루에 한 번 1000mg (4 개의 250mg 캡슐). 남 : 하루에 한 번 370mg. 1 일 및 14 일에, 전체 경구 용량은 안정적인 동위 원소로 완전히 표지되어있다. 중간 날 (2-13)에는 제품이 표지되지 않습니다.

3.4 주요 평가 혈액은 1 일 및 14 일에 여러 시점 (예 : 사전 복용량, 30 분, 1 시간, 2 시간, 4 시간, 8 시간)에서 끌어옵니다.

vastus 옆 옆의 근육 생검 (1 일 및 14 일, 일반적으로 복용량 후 ~ 6-8 시간)의 근육 NAD+ 수영장에 표지 된 전구체가 얼마나 많이 나타나는지 결정합니다.

전구체 또는 NAD+ 대사 산물이 어떻게 배설되는지 확인하고 장내 미생물 군집을 특성화하기 위해 1-2 일 및 14-15 일에 소변 및 대변의 시간을 모으고 있습니다 (NAD+ 전구체 대사에 영향을 줄 수 있으며 NMN 또는 NAM에 의해 영향을받을 수 있음).

4. 엔드 포인트

1 차 엔드 포인트 (NMN 그룹의 경우) 안정적인 동위 원소를 함유하는 말초 혈액 NAD+의 분율

1 차 엔드 포인트 (NAM 그룹의 경우) 안정적인 동위 원소 표지 된 트레이서를 함유하는 말초 혈액 NAD+의 분율

5. 연구 절차 선별 단계 (1 일 전 최대 4 주 전) 병력, 인구 통계, 실험실 테스트 (CBC, 화학, A1C), 신체 검사 및 EKG가 표시된 경우.

자격을 확인하십시오. 중재 단계 (1-14 일)

1 일 : 1 일째 : : 1 일 : : 1 일 : 일 : 일 1 일 : 일 : 1 일째 : 일 : 1 일째 : 일 1 일 : 일 1 일째 : 일 1 일째 날 : 일 : 일 1 일째 날 : 일 : 일 1 일째 날 : 일 : 일.

기준 혈액 샘플과 근육 생검을 수집하십시오. 혈액은 여러 시점 (예를 들어, 사전 복용량, 30 분, 1 시간, 2 시간, 4 시간, 8 시간)에서 드러납니다.

시간 0에 안정적인 동위 원소-표지 된 생성물 (NMN 또는 NAM)을 투여합니다. 지정된 간격으로 혈액을 반복합니다. 소변과 대변을 모으십시오.

2 일째 : : : : : : : : : : : : : : : : : : : 2 일째 : : 2 일째 : : 2 일째 : : 2 일째 날 : : 2 일째 날

추가 혈액을 끌어냅니다. 집에서 매일 표지되지 않은 학습 제품을 복용하기 시작하십시오.

3 일, 5 일, 8 일 :

혈액 샘플링, 활력 징후, 준수 점검을위한 짧은 방문.

Day 14:

기준 혈액 샘플과 근육 생검을 수집하십시오. 혈액은 여러 시점 (예를 들어, 사전 복용량, 30 분, 1 시간, 2 시간, 4 시간, 8 시간)에서 드러납니다.

시간 0에 안정-동위 원소-표지 된 생성물 (NMN 또는 NAM)을 투여합니다. 소변 및 대변을 수집하십시오.

Day 15:

표지되지 않은 치료 (NAM 또는 NMN) 투여. 후속 혈액을 끌어옵니다.

후속 단계 :

16 일, 43 일 :

최종 안전 실험실, 부작용을 확인하고, 라벨이 붙지 않은 NAD+ 또는 남아있을 수있는 대사 산물을 측정하십시오.

6. 위험과 안전

약물 안전 :

이전 1 상 시험은 하루에 2 회 최대 2 회 1000 mg NMN을 보여줍니다.

NAM은 일반적으로 이러한 복용량에서 안전한 것으로 인식됩니다. 고용량 니아신은 플러싱, GI 교란 또는 간 효소 상승을 유발할 수 있지만 NMN 또는 NAM에서는 보이지 않았습니다.

근육 생검 :

생검 부위에서 일시적인 불편 함, 타박상 또는 희귀 감염 가능성. 팀은 지역 마취 및 표준 멸균 기술을 사용합니다.

혈액 그리기 :

일반적인 위험에는 일시적인 통증이나 멍이 들며 감염이 거의 없습니다.

소변 및 대변 수집 :

주요 위험은 불편과 가벼운 불편 함입니다. 컬렉션 자체의 중대한 의학적 위험은 없습니다.

부작용보고 :

이 프로토콜은 정기적 인 모니터링 및보고를 지정합니다. SRC (Safety Review Committee)는 6 개월마다 만나는 경우가 있습니다.

7. 통계 분석

1 차 분석 :

혈액, PBMC, 근육, 소변 및 대변에서 표지 된 NAD+ 대 표지되지 않은 표지의 비율을 정량화하십시오.

노인과 노인을 비교하여 노화가 NAD+ 전구체 대사의 경로 또는 크기를 이동하는지 확인하십시오.

모델 :

연령, 성별 및 기준 값에 대한 요인이있는 혼합 모델 반복 측정 (MMRM) 또는 ANCOVA.

샘플 크기 :

ARM 당 16 명의 피험자 (NMN 그룹에서 8 영원 8 명, NAM 그룹의 8 영 및 8 세)는 파일럿 데이터와 안정적인 동위 원소 추적의 특수한 특성을 기반으로합니다.

8. 연구 행동 및 물류

무작위 화 :

1 : 1 NMN 대 NAM, Block-randomized, 연령 그룹에 의해 계층화 된 비율.

블라인드 :

이 프로토콜은 두 개의 라벨이 붙은 전구체의 개방형 비교입니다.

데이터 관리 :

전자 CRFS, REDCAP 데이터베이스, 조사자의 확인.

모니터링 :

내부 팀 플러스 후원 감독.

윤리적 고려 사항 :

IRB 승인, 사전 동의에 대한 자세한 내용의 목표, 절차 및 위험. 참가자 안전 보장에 중점을 둡니다.

9. 중요성과 잠재적 영향

이 프로토콜은 인간 조직에서 구두로 섭취 한 NAD+ 전구체 (NMN, NAM)가 NAD+가되는 방법과 같은 지식의 중요한 격차를 해결합니다.

결과는 노인이 NAD+ 회전율이 뚜렷하게 높고 NAD+ 증강에 다르게 반응 할 수 있는지 여부를 알려줍니다.

결과는 노화 및 대사 건강과 관련된 치료 또는 예방 환경에서 NMN/NAM에 대한 임상 투약 권장 사항을 형성 할 수 있습니다.