Sporing af den metaboliske flux af oralt administrerede NAD+ forløbere

Baggrund og betydning

1.1 NAD's rolle i fysiologi nicotinamid adenin dinucleotid (NAD+) er et nøgle coenzym i alle levende organismer, der findes i oxideret (NAD+) og reducerede (NADH) former. Ud over sin vigtige rolle i redoxreaktioner og ATP-generation fungerer NAD+ også som co-substrat for adskillige signalenzymer, såsom Sirtuins, PARPS og CD38. Systemisk NAD+ insufficiens kan forårsage sygdomme som pellagra; Nedsat NAD+ -tilgængelighed er blevet impliceret i aldrende og aldersrelaterede lidelser.

1.2 Oral NAD+ forløbere administration af NAD+ forløbere (f.eks. NMN, NR, NAM) kan øge NAD+ -niveauerne. Selvom menneskelig forskning har vist, at oral NMN hæver blod NAD+ -koncentrationer, forstås mange aspekter af dens absorption, stofskifte og generel biotilgængelighed stadig dårligt. Gnaverundersøgelser antyder, at oral NMN gennemgår omfattende første-pass metabolisme i tarmen med delvis konvertering til NAM, inden de går ind i systemisk cirkulation.

1.3 Aging og NAD+ I gnavermodeller falder NAD+ -niveauer ofte, når dyrene bliver ældre. Nogle beviser tyder på, at NAD+ omsætning kan forhøjes i aldrende gnavere, hvilket antyder en højere hastighed på NAD+ -forbrug. Imidlertid er ækvivalente sporingsundersøgelser endnu ikke blevet udført hos mennesker.

1.4 Behov for menneskelige sporstofstudier Disse forbindelser undersøges for forebyggelse og behandling af aldersrelaterede sygdomme. Der er behov for at afklare, hvordan de absorberes, og hvordan de nøjagtigt løfter NAD+ i forskellige væv. Brug af stabil isotopmærket NMN og NAM vil hjælpe med at kortlægge fluxen fra orale forløbere til blod, muskler, urin og afføring, og vil også afsløre, hvordan aldring påvirker NAD+ omsætning.

2. mål og målsætninger

AIM 1: Brug stabile isotopspor og massespektrometri hos raske unge voksne til at spore, hvor oralt administreret NMN eller NAM metaboliseres, hvordan de går ind i NAD+ puljer, og hvor meget udskilles eller konverteres til andre metabolitter.

Mål 2: Sammenlign disse samme fluxer hos ældre voksne (≥65 år). Efterforskere ønsker specifikt at se, om alderen ændrer den metaboliske rute fra forløber til NAD+, og om ældre voksne udviser højere forbrug (omsætning) af NAD+.

3. Undersøgelsesdesign

3.1 Oversigt Single-Center-forsøg på Brigham og Women's Hospital.

Grupper: To hovedgrupper af deltagere:

Gruppe A (NMN-gruppe): 16 deltagere (8 unge voksne i alderen 18-40 år; 8 ældre voksne i alderen ≥65).

Gruppe B (NAM Group): 16 deltagere (8 unge; 8 ældre). Hver deltager tager enten NMN eller NAM oralt i 14 dage. Undersøgelsen bruger stabile isotoper (ikke-radioaktive) til at mærke NMN eller NAM for at spore, hvordan disse molekyler vises i NAD+ og dens nedstrøms metabolitter.

3.2 Deltagere i behandlingsvarigheden modtager daglige doser af deres tildelte behandling (NMN eller NAM) i 14 dage. Detaljeret prøveudtagning udført på dag 1 og 14.

3.3 Dosering NMN: 1000 mg en gang dagligt (fire 250 mg kapsler). Nam: 370 mg en gang dagligt. På dag 1 og 14 er hele den orale dosis fuldt mærket med stabile isotoper; På de mellemliggende dage (2-13) er produktet umærket.

3.4 Nøglevurderinger Blodtræk på flere tidspunkter (f.eks. For-dosis, 30 minutter, 1 time, 2 timer, 4 timer, 8 timer) på dag 1 og 14.

Muskelbiopsier af vastus lateralis (dag 1 og 14, typisk ~ 6-8 timer efter dosis) for at bestemme, hvor meget mærket forløber vises i muskel NAD+ puljer.

Tidsbestemt opsamling af urin og afføring på dag 1-2 og 14-15 for at se, hvordan forløberen eller NAD+ metabolitterne udskilles og for at karakterisere tarmmikrobiome (som kan påvirke NAD+ precursormetabolisme og kan blive påvirket af NMN eller NAM).

4. slutpunkter

Primære endepunkter (for NMN -gruppe) Fraktion af perifert blod NAD+ indeholdende den stabile isotop mærket sporstof

Primære endepunkter (for NAM Group) Fraktion af perifert blod NAD+ indeholdende den stabile isotop mærket Tracer

5. Undersøgelsesprocedurer Screeningsfase (op til 4 uger før dag 1) Medicinsk historie, demografi, laboratorieundersøgelser (CBC, kemi, A1C), fysisk undersøgelse og EKG hvis indikeret.

Bekræft støtteberettigelse. Interventionsfase (dage 1-14)

Dag 1:

Indsaml baseline -blodprøver og muskelbiopsi. Blodtræk på flere tidspunkter (f.eks. Fordosis, 30 minutter, 1 time, 2 timer, 4 timer, 8 timer).

Administrer stabilt-isotopmærket produkt (NMN eller NAM) på tidspunktet 0. Gentag blod trækker med specificerede intervaller. Saml urin og afføring.

Dag 2:

Yderligere blod trækker. Begynd at tage umærkede studieprodukt dagligt hjemme.

Dage 3, 5, 8:

Korte besøg til prøveudtagning af blod, vitale tegn, adhæsionskontrol.

Dag 14:

Indsaml baseline -blodprøver og muskelbiopsi. Blodtræk på flere tidspunkter (f.eks. Fordosis, 30 minutter, 1 time, 2 timer, 4 timer, 8 timer).

Administrer stabilt-isotopmærket produkt (NMN eller NAM) på tidspunktet 0. Saml urin og afføring.

Dag 15:

Umærket behandling (NAM eller NMN) administration. Opfølgning af blodtræk.

Opfølgningsfase:

Dage 16, 43:

Endelige sikkerhedslaboratorier, kontroller for bivirkninger, måler alle mærkede/umærkede NAD+ eller metabolitter, der måtte blive hængende.

6. Risici og sikkerhed

Lægemiddel sikkerhed:

Forrige fase 1-forsøg viser 1000 mg NMN op til to gange dagligt er sikkert og godt tolereret uden alvorlige lægemiddelrelaterede bivirkninger.

NAM anerkendes generelt som sikre ved disse doser. Niacin med høj dosis kan forårsage skylning, GI-forstyrrelse eller leverenzymhøjder, men disse er ikke set med NMN eller NAM.

Muskelbiopsi:

Potentiale for midlertidigt ubehag, blå mærker eller sjælden infektion på biopsi -stedet. Holdet vil bruge lokalbedøvelses- og standard steril teknik.

Blodtræk:

Almindelige risici inkluderer kortvarig smerte eller blå mærker og sjældent infektion.

Urin- og afføringssamling:

Hovedrisikoen er ulejlighed og mildt ubehag; Ingen væsentlig medicinsk risiko fra selve samlingen.

Bivirkninger rapportering:

Protokollen specificerer regelmæssig overvågning og rapportering. Et sikkerhedsgennemgangsudvalg (SRC) mødes hver sjette måned.

7. Statistisk analyse

Primære analyser:

Kvantificer brøkdelen af ​​mærket NAD+ vs. umærket i blod, PBMC'er, muskler, urin og afføring.

Sammenlign unge vs. ældre voksne for at se, om aldring skifter ruten eller størrelsen af ​​NAD+ forløbermetabolisme.

Modeller:

Mixed-model gentagne mål (MMRM) eller ANCOVA med faktorer for alder, køn og basislinjeværdier.

Prøvestørrelse:

16 forsøgspersoner pr. Arm (8 unge + 8 ældre i NMN-gruppen; 8 unge + 8 ældre i NAM-gruppen) er baseret på pilotdata og den specialiserede karakter af stabil-isotopsporing.

8. Undersøgelsesadfærd og logistik

Randomisering:

1: 1-forhold og NMN vs. NAM, blokrandomiseret, stratificeret efter aldersgruppe.

Blinding:

Protokollen er en open-label-sammenligning af to mærkede forløbere.

Datastyring:

Elektroniske CRF'er, REDCAP -database, verifikation af efterforskere.

Overvågning:

Internt team plus sponsor tilsyn.

Etiske overvejelser:

IRB -godkendelse, informeret samtykke detaljerede mål, procedurer og risici. Vægt på at sikre deltagernes sikkerhed.

9. Betydning og potentiel indflydelse

Protokollen adresserer kritiske huller i viden, som hvor oralt indtaget NAD+ -forløbere (NMN, NAM) bliver NAD+ i humant væv.

Resultaterne vil informere, om ældre voksne har tydeligt højere NAD+ omsætning og muligvis reagerer forskelligt på NAD+ Augmentation.

Resultater kunne forme kliniske doseringsanbefalinger til NMN/NAM i terapeutiske eller forebyggende omgivelser relateret til aldring og metabolisk sundhed.