Sledování metabolického toku orálně podávaných prekurzorů NAD+

Pozadí a význam

1.1 Role NAD+ve fyziologii Nicotinamid adenin dinukleotid (NAD+) je klíčovým koenzymem ve všech živých organismech, existující v oxidovaných (NAD+) a redukovaných (NADH) formách. Kromě své zásadní role v redoxních reakcích a generování ATP, NAD+ také slouží jako ko-substrát pro několik signalizačních enzymů, jako jsou sirtuiny, PARP a CD38. Systémová NAD+ nedostatečnost může způsobit onemocnění, jako je pelgragra; Snížená dostupnost NAD+ byla zapojena do stárnutí a poruch souvisejících s věkem.

1.2 Orální podávání prekurzorů NAD+ Prekurzorů NAD+ prekurzorů (např. NMN, NR, NAM) může zvýšit úrovně NAD+. Ačkoli lidský výzkum ukázal, že orální NMN zvyšuje koncentrace krve NAD+, mnoho aspektů jeho absorpce, metabolismu a celkové biologické dostupnosti je stále špatně pochopeno. Studie hlodavců naznačují, že orální NMN podléhá rozsáhlému metabolismu prvního průchodu ve střevě, s částečnou přeměnou na NAM před vstupem do systémového oběhu.

1.3 Stárnutí a NAD+ v modelech hlodavců se hladiny NAD+ často snižují, jak zvířata stárnou. Některé důkazy naznačují, že obrat NAD+ může být zvýšen u stárnoucích hlodavců, což naznačuje vyšší míru spotřeby NAD+. Ekvivalentní studie stopar však dosud nebyly provedeny u lidí.

1.4 Potřeba studií lidských stopovacích studií Tyto sloučeniny jsou zkoumány pro prevenci a léčbu chorob souvisejících s věkem. Je třeba objasnit, jak jsou absorbovány a jak přesně zvyšují NAD+ v různých tkáních. Použití stabilního izotopů značeného NMN a NAM pomůže zmapovat tok z ústních prekurzorů do krve, svalu, moči a stolice a také odhalí, jak stárnutí ovlivňuje obrat NAD+.

2. cíle a cíle

Cíl 1: Použijte stabilní izotopové stopy a hmotnostní spektrometrie u zdravých mladých dospělých ke sledování toho, jak jsou metabolizovány orálně podávané NMN nebo NAM, jak vstupují do NAD+ bazénů a kolik je vylučováno nebo převedeno na jiné metabolity.

Cíl 2: Porovnejte stejné toky u starších dospělých (≥65 let). Vyšetřovatelé konkrétně chtějí zjistit, zda věk mění metabolickou cestu z prekurzoru do NAD+ a zda starší dospělí vykazují vyšší spotřebu (obrat) NAD+.

3. návrh studie

3.1 Přehled soudního řízení v Brighamu a ženské nemocnici.

Skupiny: Dvě hlavní skupiny účastníků:

Skupina A (skupina NMN): 16 účastníků (8 mladých dospělých ve věku 18–40 let; 8 starších dospělých ve věku ≥ 65).

Skupina B (skupina NAM): 16 účastníků (8 mladých; 8 starších). Každý účastník bere NMN nebo NAM orálně po dobu 14 dnů. Studie používá stabilní izotopy (ne-radioaktivní) k označení NMN nebo NAM, aby se sledovaly, jak se tyto molekuly objevují v NAD+ a jeho downstream metabolitů.

3.2 Účastníci trvání léčby dostávají denní dávky přiřazené léčby (NMN nebo NAM) po dobu 14 dnů. Podrobné vzorkování provedené ve dnech 1. a 14.

3.3 Dávkování NMN: 1000 mg jednou denně (čtyři 250 mg tobolek). NAM: 370 mg jednou denně. Ve dnech 1 a 14 je celá perorální dávka plně označena stabilními izotopy; Ve středních dnech (2-13) je produkt neoznačen.

3.4 Klíčová hodnocení krevní odebírání ve více časových bodech (např. Předdaku, 30 minut, 1 h, 2 hodiny, 4 hodiny, 8 hodin) ve dnech 1 a 14.

Svalové biopsie obrovského body (dny 1 a 14, obvykle ~ 6-8 hodin po dávce), aby se určilo, kolik značeného prekurzoru se objevuje ve svalových bazénech NAD+.

Načasovaný sběr moči a stolice ve dnech 1-2 a 14-15, aby se zjistilo, jak se vylučují prekurzor nebo metabolity NAD+ a charakterizovat střevní mikrobiom (který může ovlivnit metabolismus PRECROSU+ prekurzorů a může být ovlivněn NMN nebo NAM).

4. koncové body

Primární koncové body (pro skupinu NMN) zlomek periferní krve nad+ obsahující stabilní izotop označený stopovaným

Primární koncové body (pro NAM Group) zlomek periferní krve nad+ obsahující stabilní izotop označený stopovaným

5. Fáze screeningu studií (až 4 týdny před 1. dnem) anamnéza, demografie, laboratorní testy (CBC, chemie, A1c), fyzikální vyšetření a EKG, pokud jsou uvedeny.

Potvrďte způsobilost. Intervenční fáze (dny 1-14)

1. den:

Sbírejte vzorky základní krve a svalovou biopsii. Odběr krve ve více časových bodech (např. Předdaku, 30 minut, 1 h, 2 hodiny, 4 hodiny, 8 hodin).

Podávejte stabilní izotopový produkt značený (NMN nebo NAM) v čase 0. Opakujte odběr krve ve specifikovaných intervalech. Sbírejte moč a stolici.

Den 2:

Další odběr krve. Začněte užívat neznačený studijní produkt denně doma.

Dny 3, 5, 8:

Krátké návštěvy odběru krve, vitálních příznaků, kontroly adherence.

Den 14:

Sbírejte vzorky základní krve a svalovou biopsii. Odběr krve ve více časových bodech (např. Předdaku, 30 minut, 1 h, 2 hodiny, 4 hodiny, 8 hodin).

Spravujte produkt značený stabilní izotopy (NMN nebo NAM) v čase 0. Sbírejte moč a stolici.

15. den:

Neznačená léčba (NAM nebo NMN) podávání. Následné odběr krve.

Fáze sledování:

Dny 16, 43:

Závěrečné bezpečnostní laboratoře, zkontrolujte nežádoucí účinky, změřte jakékoli označené/neznačené NAD+ nebo metabolity, které by mohly přetrvávat.

6. Rizika a bezpečnost

Bezpečnost léčiva:

Předchozí studie fáze 1 ukazují, že 1000 mg NMN až dvakrát denně je bezpečné a dobře tolerované, bez závažných nežádoucích účinků souvisejících s drogami.

NAM je v těchto dávkách obecně považován za bezpečný. Vysoká dávka niacinu může způsobit proplachování, narušení GI nebo zvýšení enzymu jater, ale ty nebyly vidět u NMN nebo NAM.

Svalová biopsie:

Potenciál pro dočasné nepohodlí, modřiny nebo vzácnou infekci v místě biopsie. Tým bude používat lokální anestetickou a standardní sterilní techniku.

Odběr krve:

Mezi běžná rizika patří přechodná bolest nebo modřiny a zřídka infekce.

Sběr moči a stolice:

Hlavním rizikem jsou nepříjemnosti a mírné nepohodlí; Žádné významné lékařské riziko ze samotného sbírky.

Hlášení nepříznivých událostí:

Protokol určuje pravidelné monitorování a vykazování. Každých šest měsíců se schází komise pro přezkum bezpečnosti (SRC).

7. Statistická analýza

Primární analýzy:

Kvantifikujte zlomek značeného NAD+ vs. neznačeného v krvi, PBMC, svalu, moči a stolici.

Porovnejte mladé vs. starší dospělé a zjistěte, zda stárnutí posune trasu nebo velikost metabolismu prekurzorů NAD+.

Modely:

Smíšené modely opakované měření (MMRM) nebo ANCOVA s faktory pro věk, pohlaví a základní hodnoty.

Velikost vzorku:

16 subjektů na rameno (8 mladých + 8 starších ve skupině NMN; 8 mladých + 8 starších ve skupině NAM) je založeno na pilotních datech a specializované povaze trasování stabilních izotopů.

8. Studijní chování a logistika

Randomizace:

Poměr 1: 1 k NMN vs. NAM, blokované randomizované, stratifikované podle věkové skupiny.

Oslepující:

Protokol je srovnání dvou označených prekurzorů s otevřeným označením.

Správa dat:

Elektronické CRFS, databáze RedCap, ověření vyšetřovateli.

Monitorování:

Interní tým Plus sponzorů.

Etické úvahy:

Schválení IRB, informovaný souhlas s podrobnostmi o podrobnostech, postupy a rizika. Důraz na zajištění bezpečnosti účastníků.

9. Důležitost a potenciální dopad

Protokol řeší kritické mezery ve znalostech, jako je to, jak se v lidských tkáních stávají nad+ ústní požití NAD+ Prekurzory (NMN, NAM).

Výsledky budou informovat, zda starší dospělí mají výrazně vyšší obrat NAD+ a mohou reagovat odlišně na augmentaci NAD+.

Zjištění by mohla formovat doporučení pro klinické dávkování pro NMN/NAM v terapeutických nebo preventivních prostředích souvisejících se stárnutím a metabolickým zdravím.