Infeções Relacionadas com Implantes em Doentes com Sarcomas Ósseos (IRISSAR)

Em oncologia ortopédica, o risco e as consequências das infeções relacionadas com dispositivos ortopédicos (ODRIs) são maiores, uma vez que os doentes têm frequentemente respostas imunitárias comprometidas devido a doenças subjacentes, quimioterapia ou radioterapia. Os implantes utilizados podem ser de carga a ponto de ser impossível removê-los ou substituí-los em caso de infeção, podendo, no pior dos casos, resultar em amputação ou morte. Comparando com a incidência de 1-2% de PJI numa população não oncológica com prótese total de anca ou joelho, os doentes com megaprótese devido a sarcoma esquelético apresentam uma incidência de infeção de 3-25%. Fatores relacionados com o doente, cirurgias extensas e repetidas e grandes implantes reconstrutivos provavelmente explicam o aumento da incidência.

Até onde sabemos, nenhum estudo avaliou o papel de fatores microbiológicos, como a produção de biofilme e a suscetibilidade nesta população. Além disso, fatores imunológicos deficientes nestes doentes, como defeitos na migração de neutrófilos, expressão de citocinas e explosão respiratória de fagócitos, envolvidos na eliminação de micróbios, podem criar um ambiente que favorece fenótipos mais virulentos. Conhecimentos fundamentais sobre o papel do biofilme nesta população poderiam contribuir para melhorar o planeamento do tratamento e os resultados.

Distinguir patógenos causadores de contaminantes pode ser desafiador, especialmente em infeções polimicrobianas. A adição de diagnósticos metagenómicos, ainda pouco utilizados na prática clínica, pode melhorar as sensibilidades, mas a precisão preditiva continua a ser um problema. Comparar os resultados da cultura microbiológica convencional com o sequenciamento metagenómico seria interessante para determinar a precisão dos métodos de diagnóstico atuais.

O presente estudo é um projeto exploratório que aborda a natureza multifatorial da PJI, focando-se no fenótipo microbiano em doentes com sarcoma esquelético. O papel dos fatores do hospedeiro, do micróbio e do implante será investigado utilizando um conjunto de métodos diferentes e comparado com casos de PJI em doentes com prótese convencional de anca ou joelho.

Amostras de sangue pré-operatórias serão colhidas e amostras de tecido mole periprotético, osso e líquido articular serão recolhidas intraoperatoriamente. Os doentes serão amostrados durante a sua operação primária com megaprótese devido a sarcoma esquelético e, em caso de PJI pós-operatória, serão amostrados da mesma forma durante a sua cirurgia de revisão. Doentes submetidos a reoperação devido a PJI numa prótese total convencional de anca ou joelho também serão amostrados com sangue, osso, tecido mole e líquido articular intraoperatoriamente.

Serão feitas comparações descritivas entre (i) tecidos periprotéticos e tecidos de PJI antes e depois da infeção em doentes de oncologia ortopédica, e (ii) tecidos de PJI em doentes de oncologia ortopédica e doentes com PJI convencional, relativamente aos seguintes parâmetros:

Papel do hospedeiro:

• Parâmetros clínicos: pontuação ASA, diabetes, IMC, idade, sexo, uso de antibióticos 2 semanas antes da cirurgia, duração da quimioterapia, tipo de quimioterapia, cessação da quimioterapia, início dos sintomas em caso de infeção, tipo de implante, duração da cirurgia, tipo de osteossarcoma, grau e estádio, localização da cirurgia, extensão da ressecção.
• Bioquímica no sangue (hemograma completo com diferencial, densidade de neutrófilos, PCR, procalcitonina, IL-6).
• Histologia e imuno-histoquímica (FISH para identificação de bactérias, infiltrados inflamatórios (presença de células gigantes de corpo estranho), angiogénese, necrose tecidual)
• Expressão génica (marcadores relacionados com angiogénese, inflamação, reconhecimento microbiano e necrose tecidual). Em amostras selecionadas embebidas em parafina, será explorada a análise com transcriptómica espacial.

Papel do patógeno:

• Cinco culturas de tecido para cultura de rotina (para determinar o agente causador) e uma adicional para extração de ADN bacteriano e sequenciação do gene 16S rRNA.
• Estirpes estafilocócicas clínicas isoladas de PJI e endoprótese tumoral no momento da infeção serão caracterizadas e comparadas quanto à sua produção fenotípica de biofilme, suscetibilidade antimicrobiana e presença de genes de virulência utilizando CV, MBEC e NGS.
• Diferença na expressão génica de genes relacionados com o biofilme entre estirpes estafilocócicas de PJI (convencionais e de oncologia ortopédica) quando cultivadas em titânio com pré-condicionamento com soro in vitro.