Magnésio nas Doenças Gastrointestinais (MAGIC)

Este estudo transversal tem como objetivo melhorar a avaliação do estado do magnésio em doentes com doenças intestinais crónicas. O estudo irá avaliar e comparar uma variedade de marcadores bioquímicos e funcionais para determinar quais fornecem o reflexo mais preciso, fiável e clinicamente útil do estado do magnésio em todo o corpo. O objetivo a longo prazo é apoiar o desenvolvimento de uma estratégia de rastreio mais sensível para a deficiência de magnésio na prática clínica, especialmente para populações com risco aumentado devido a perdas gastrointestinais ou má absorção.

A deficiência de magnésio é frequentemente subdiagnosticada devido às limitações da medição padrão do magnésio plasmático. Embora o magnésio total do corpo seja armazenado principalmente no osso e no tecido mole, o método de diagnóstico padrão atual (magnésio plasmático) reflete apenas uma pequena fração do magnésio total (<1%) e não se correlaciona bem com o conteúdo de magnésio intracelular. Como resultado, muitos casos de deficiência de magnésio subclínica ou funcional passam despercebidos, particularmente em populações com condições gastrointestinais crónicas que alteram a absorção e a excreção.

Desenho e Fundamentação do Estudo:

O estudo consistirá em quatro visitas e incluirá dois grupos:

1. Doentes com doença ou condições gastrointestinais, divididos em três subgrupos: aqueles com doença inflamatória intestinal (DII; doença de Crohn ou colite ulcerosa), aqueles com ileostomia ou doentes com diarreia por ácidos biliares.
2. Controlos saudáveis sem doença gastrointestinal conhecida.

Os três subgrupos de doentes são selecionados com base em fatores de risco conhecidos para depleção de magnésio: diarreia crónica, ressecção intestinal e má absorção. O grupo de controlo saudável serve como população de referência.

Todos os participantes serão submetidos a um protocolo padronizado de exame clínico e colheita biológica, incluindo:

• Colheita de sangue para magnésio plasmático, magnésio ionizado e magnésio intracelular (PBMC, RBC e buffy coat)
• Colheita de urina de 24 horas para excreção de magnésio
• Um teste de carga de magnésio intravenoso (teste de retenção)
• Biópsia muscular para quantificação da concentração total de magnésio no músculo esquelético
• Amostra fecal para análise da composição do microbioma intestinal
• Avaliação da função muscular (teste de força de preensão manual e teste de sentar e levantar)
• Medição da composição corporal (análise de bioimpedância)
• Resultados reportados pelo doente abrangendo fadiga, sintomas gastrointestinais, bem-estar mental e qualidade de vida
• Questionário de frequência alimentar avaliando a ingestão dietética de magnésio

Um subconjunto de participantes submetidos a procedimentos endoscópicos clinicamente indicados terá biópsias intestinais (mucosa duodenal ou cólica) colhidas para análises exploratórias da concentração de magnésio no tecido e expressão de transportadores de magnésio, incluindo TRPM6, TRPM7, CNNM4 e SLC41A1.

Métodos Analíticos:

As concentrações de magnésio serão medidas usando espectrometria de massa com plasma indutivamente acoplado (ICP-MS), que permite a quantificação altamente sensível e específica do conteúdo total de magnésio em várias matrizes biológicas. Amostras de plasma e urina serão analisadas para magnésio total e magnésio ionizado, quando aplicável.

O magnésio intracelular em células mononucleares do sangue periférico (PBMCs), glóbulos vermelhos (RBCs) e buffy coat será analisado seguindo protocolos de separação padronizados. São tomadas precauções especiais durante o manuseamento e armazenamento das amostras para evitar contaminação por metais vestigiais, incluindo o uso de tubos de colheita livres de metais vestigiais, reagentes ultrapuros e plásticos de laboratório certificados.

As amostras de tecido muscular serão criopreservadas e analisadas em colaboração com um laboratório de referência com experiência em análise de metais vestigiais em tecidos. Antes da digestão e quantificação por ICP-MS, as amostras de tecido podem sofrer liofilização e homogeneização em condições de sala limpa.

Para os participantes que completarem o teste de retenção de magnésio, a excreção urinária de magnésio basal será comparada com a excreção após uma carga padronizada de sulfato de magnésio intravenoso. A retenção de magnésio será calculada como a diferença entre a dose de magnésio infundida e a quantidade excretada na urina durante 24 horas. Este método é considerado o padrão de referência para avaliar as reservas totais de magnésio no corpo, mas raramente é usado na prática clínica devido à sua complexidade.

Manuseamento de Dados e Análise Estatística:

Os dados serão recolhidos usando REDCap e armazenados em servidores institucionais seguros com acesso restrito ao pessoal do estudo. A todos os participantes será atribuído um ID de estudo único para garantir a confidencialidade. Estatísticas descritivas serão usadas para resumir as características demográficas e clínicas. As diferenças entre grupos serão analisadas usando testes estatísticos apropriados (por exemplo, ANOVA, Kruskal-Wallis, qui-quadrado) dependendo da distribuição dos dados.

Serão realizadas análises de correlação para comparar o magnésio plasmático com os níveis de magnésio intracelular e tecidual. Podem ser geradas curvas Receiver Operating Characteristic (ROC) para avaliar a sensibilidade e especificidade de vários biomarcadores em relação ao teste de retenção de magnésio e/ou conteúdo de magnésio muscular como padrões de referência.

Análises de subgrupos podem explorar diferenças com base no tipo de doença, presença de ressecção, atividade da doença, uso de medicação (por exemplo, inibidores da bomba de protões, diuréticos) e ingestão nutricional.

Considerações Éticas:

O estudo foi revisto e aceite pela Comissão de Ética de Investigação relevante e cumpre a Declaração de Helsínquia e a legislação nacional sobre ética na investigação. Será obtido consentimento informado por escrito de todos os participantes antes de qualquer procedimento do estudo. A biópsia muscular e a biópsia intestinal são opcionais e apenas realizadas em participantes que consentem com estes procedimentos.

Os participantes são informados sobre os riscos potenciais relacionados com a biópsia muscular (por exemplo, nódoas negras, dor, risco raro de infeção) e a infusão intravenosa de magnésio (por exemplo, calor transitório, rubor, hipotensão). Todas as amostras biológicas serão armazenadas e manuseadas de acordo com os regulamentos atuais para material de biobanco e podem ser usadas para investigação futura dentro do mesmo âmbito se os participantes fornecerem consentimento.

Impacto Esperado:

Espera-se que este estudo forneça novos insights sobre a avaliação clínica do estado do magnésio em doentes com doenças gastrointestinais. Ao comparar marcadores tradicionais e alternativos do estado do magnésio com medidas de referência como o magnésio muscular e a retenção de magnésio, o estudo ajudará a identificar métodos mais precisos, práticos e escaláveis para detetar deficiência em populações de risco.

Os resultados podem informar futuras diretrizes sobre rastreio nutricional, apoiar um diagnóstico mais precoce da deficiência de magnésio e contribuir para uma melhor gestão dos sintomas e comorbilidades relacionadas com a depleção crónica de magnésio.