As Próteses Articulares Podem Tratar Com Sucesso a Osteoartrite Incapacitante. Contudo, a Infeção é uma Causa Importante de Insucesso. O Diagnóstico Adequado Continua a Ser Desafiante. A Combinação de Imagiologia Avançada com Sequenciação de Próxima Geração de Amostras Obtidas Endoscopicamente Deve Ajudar a Mapear e Caracterizar. (PJI MAP/DEF)

A possibilidade de realizar uma análise adicional de ADN no material residual destas amostras (que de outra forma seriam descartadas) oferece a perspetiva de obter uma imagem mais precisa do microbioma e do biofilme presentes nos componentes protéticos. Este é o objetivo do projeto. Com base nos critérios para suspeita de infeção (Musculoskeletal Infection Society e a European Society for Bone and Joint Infections), os doentes selecionados são submetidos a testes padrão através da análise de amostras de sangue, líquido sinovial, tecido e osso (medula), bem como a exames de imagem como radiografias, ressonância magnética e cintigrafias. Se, com base nisto (Fase 1), o diagnóstico e a natureza de uma infeção estiverem claros, o procedimento diagnóstico de artroscopia combinado com biópsias de tecido sinovial periprotético, osso e medula óssea (Fase 2) e prosseguir diretamente para cirurgia aberta, na qual parte ou toda a prótese é substituída numa ou duas sessões (Fase 3), e também são colhidas amostras de líquido sinovial, tecido, osso e medula óssea.

Todas as amostras obtidas durante a Fase 1, 2 ou 3 são submetidas a testes microbiológicos e patológicos padrão; no entanto, o material residual agora também é submetido a análise genética do ADN bacteriano/fúngico. O ADN humano do doente não é testado. As amostras são obtidas utilizando instrumentos separados para evitar contaminação cruzada. Líquido sinovial (1 a 10 mL), tecido sinovial (2 a 6 mm³) e osso (medula óssea) (2 a 6 mL) colhidos dentro e em torno dos componentes protéticos são recolhidos e armazenados em recipientes estéreis para exame microbiológico e em recipientes estéreis contendo formaldeído para exame patológico. Cada recipiente é etiquetado com a identificação do doente e a localização da colheita (por exemplo, perna, lado lateral). Um saco contendo 6 a 8 recipientes etiquetados é transportado para o laboratório de Microbiologia. Um saco semelhante é enviado para o laboratório de Patologia. Existe sempre excesso de líquido, tecido, osso ou material de medula óssea (1 a 2 ml ou mm³ por local). Este material é normalmente descartado. Para este projeto de investigação, é recolhido, mas ao contrário das amostras microbiológicas e patológicas, estes recipientes são apenas codificados (por exemplo, SEPTORT001 (o número corresponde ao doente um) líquido sinovial, sinóvia 1, sinóvia 2, (biofilme no) acetábulo, (biofilme no) trocânter maior do fémur, (biofilme) diáfise média do fémur, (biofilme na) ponta da haste numa prótese de anca). No final da sessão, os recipientes são recolhidos num pequeno saco de plástico. Este saco é colocado num saco de plástico maior juntamente com um formulário MicroGenDx. Este formulário contém as seguintes informações: SEPTORT e número do doente, idade, sexo, lado direito ou esquerdo, articulação (prótese de anca, joelho, ombro…), a data da colheita, o diagnóstico de trabalho (infeção articular periprotética), caixa de verificação para exame ortopédico, caixa de verificação para análise desejada (qPCR Rapid Screening e NGS), bem como a assinatura do investigador principal. No final da sessão cirúrgica, ele entrega pessoalmente isto ao HIRUZ BioBank para ser armazenado num congelador a -80°C. Uma vez recolhidos cerca de cinco sacos ao longo de algumas semanas, um estafeta internacional recolhe uma caixa de cartão contendo estes sacos. A caixa de Investigação Médica (sem necessidade de gelo seco) é selada por um técnico de laboratório no HIRUZ Biobank. A caixa é normalmente recolhida na tarde de terça-feira e chega ao laboratório no Texas na manhã seguinte, quarta-feira (hora local). Dependendo da carga de trabalho clínica normal, as amostras de investigação são processadas para análise genética do microbioma no mesmo dia ou posteriormente após armazenamento. O laboratório dos EUA não recebe quaisquer dados que possam identificar o doente. Os dados dos resultados da análise genética são encriptados e transmitidos eletronicamente num formato seguro para o investigador principal no UZ Gent. Apenas o investigador principal e o Professor David Creytens estão autorizados a aceder a esta base de dados. Ambos são responsáveis pelo controlo de qualidade contínuo do sistema de segurança, impedindo assim o acesso não autorizado aos dados, de acordo com as diretrizes de Boas Práticas Clínicas. Esta investigação deve permitir-nos confirmar ou excluir se uma infeção protética subjacente é de facto a causa dos sintomas do doente, mas também pode ajudar a determinar a topografia da infeção — especificamente, se é difusa ou concentrada num componente protético específico — bem como a composição do microbioma e do biofilme.