针对 T1DM 中不同脂肪含量膳食的胰岛素剂量调整

研究设计和方法 总体设计：将邀请 18 名年龄在 18 至 50 岁之间的男性或女性 1 型糖尿病 (T1DM) 患者参加四次实验室会议，每次会议相隔 7 天。 将在诊所和通过在当地媒体上刊登广告招募参与者。 参与者将以随机和反平衡的方式完成四项主要试验。 主要试验将涉及膳食成​​分（脂肪含量）和速效胰岛素剂量的控制。 在每次就诊期间，将在餐后 6 小时内测量血样以确定血糖、脂肪血症、激素和代谢物参数。

样本量计算：

使用等式估计样本量要求。 1 霍普金斯大学 (2000)：

n = 8s2/d2 [Eq. 1] 其中 n 是样本量，s 是典型的测量误差，d 是有意义的效应量。 d 的大小来自 0.8 的受试者之间的差异，这是使用现有数据计算的。 T1DM 患者混合大量营养素餐后甘油三酯浓度的餐后增量曲线下面积 (AUC) 通常为 0.74 mmol.l-1.hour-1，受试者间标准差为 0.99 mmol.l-1 .hour-1 （Levetan 等人，2003 年）。 因此 d 计算为 0.79 mmol.l-1.hour-1。 重复试验得出的该测量值的 CV 为 23%（Weiss 等人，2008 年），典型误差在 0.18 mmol.l-1.hour-1 范围内。 这些数据表明 18 名参与者的样本量提供了超过 80% 的机会检测到 P 值 < 0.05 的统计显着效果。

纳入/排除标准参与者：为了纳入研究，志愿者将是男性或女性，年龄在 18-50 岁之间，除背景糖尿病性视网膜病变外没有任何糖尿病并发症，不服用胰岛素以外的任何处方药，并接受治疗使用由慢效/长效甘精胰岛素/地特胰岛素和速效胰岛素类似物（赖脯胰岛素或门冬胰岛素、谷赖胰岛素）组成的稳定胰岛素治疗方案，并且 HbA1c <9.5% (80 mmol/mol)。 参与者目前将使用碳水化合物计数方法来管理进餐时间速效胰岛素。

在主要试验之前：将指导参与者在测试前 48 小时遵循推荐的饮食计划。 参与者将被要求阅读并签署知情同意书和医疗问卷，每次访问实验室时都会对其进行审查。 每次试验前 24 小时，参与者将安装实时连续血糖监测系统 (CGM)。 CGM 由一个插入皮下组织的传感器组成，皮下组织用防水粘性敷料固定到位。 获得传感器读数并将其存储在连接到内置传感器的监视器的存储器中。 血糖读数实时显示在监护仪的屏幕上。 如果在试验前期间葡萄糖水平低（<3.9 mmol/L）或高（>14 mmol/L），将在监视器上设置警报以通知参与者。 出于校准目的，参与者将被要求使用他们的血糖手指采血仪每天至少输入 4 次毛细血管血糖值（在用餐时间和睡前）。 CGM 将在试验后的第二天在参与者方便的时间移除，以便可以捕获傍晚和夜间的血糖。 CGM 监测器还将作为一项安全措施，提醒参与者注意干预后的血糖波动。 将指示参与者不要使用实时 CGM 葡萄糖值来确定血糖校正（额外的碳水化合物/胰岛素给药）。

主要试验：所有试验将以随机和平衡的方式进行。 对于每次访问，参与者将被要求在早上（~07:00 - 09:00 AM）到达 NIHR 临床研究设施实验室。 在第一次访问时，将在实验前收集人体测量变量（质量、身高、BMI）。 每次访问时，参与者将采取坐姿和休息姿势，同时将 18 号插管插入其非优势手臂的肘前静脉以收集静脉血。 这将通过定期输注盐水来保持专利。 插管完成后，将收集 12 毫升静息血样。 然后，参与者将执行四个试验之一：

试验 1) 仅碳水化合物膳食：参与者将食用标准化的碳水化合物膳食（80 克碳水化合物、25 克蛋白质、0 克脂肪：膳食成分、白米饭、鸡肉、咖喱酱；420 大卡）并将自行管理（进入腹部皮下组织，按照他们的常规）根据碳水化合物计数比计算的速效胰岛素剂量（例如，每 10 克碳水化合物需要 1 IU 胰岛素）。

试验 2) 参与者将重复试验 1，但这次消耗的膳食将额外增加 50 克脂肪（通过添加酥油）。 这种脂肪将添加到膳食中的酱汁中（80 克碳水化合物、25 克蛋白质、50 克脂肪；735 大卡）。 参与者将按照碳水化合物计数法（即与试验 1 相同的 IU 胰岛素）施用速效胰岛素。

试验 3) 参与者将重复试验 2，但将使用增加 15% 的速效胰岛素剂量。

试验 4) 参与者将重复试验 2，但将使用增加 30% 的速效胰岛素剂量。

参与者吃完饭后，他们将休息 6 小时，每小时采集 12 毫升血液样本，以捕捉血糖、血脂、激素和代谢物浓度随时间的变化。 在最初的 2 小时内，将在 15 分钟和 45 分钟的时间段内额外采集 1ml 样本，以仅测定血糖和乳酸。 因此，每次试验采集的全血总量为 160 毫升，不到一罐典型软饮料的一半。

采血过程 对于每个血样，将收集 1 ml 全血并用于立即定量葡萄糖和乳酸（Biosen C，EKF Diagnostics，UK）。 在采集额外 11 毫升血液的样本上，剩余的血液将被转移到设计用于收集血浆和血清的试管中。 然后将两个容器以 3000 x g 离心 15 分钟，以获得血浆和血清，将其储存在 -80 C°，用于以后分析胰岛素（Invitron，英国）、甘油三酯（Randox Labs，英国）、载脂蛋白-B48（ Oxford Biosystems, UK)、Apolipoprotein-B-100 (Oxford Biosystems, UK)、非酯化脂肪酸 (Randox Labs, UK)、TNF-α (Sigma Aldrich)、GLP-1 (Oxford Biosystems, UK)、PYY ( Sigma Aldrich，英国）、总抗氧化能力（Eagle Biosciences，英国）和人髓过氧化物酶（Eagle Biosciences，英国）。

在每次抽血期间，将要求参与者完成 10 点李克特视觉模拟量表 (VAS)，以确定饥饿和饱腹感的主观感受。 在餐后 6 小时采集血样并完成 VAS 后，参与者将从实验室出院。