Ajustes de dosis de insulina para comidas que difieren en contenido de grasa en T1DM

Diseño y metodología del estudio Diseño general: Se invitará a 18 personas con diabetes tipo 1 (DM1), hombres o mujeres, de entre 18 y 50 años, a asistir a cuatro sesiones de laboratorio, cada una separada por 7 días. Los participantes serán reclutados en la clínica ya través de publicidad en los medios locales. Los participantes completarán cuatro ensayos principales de forma aleatoria y equilibrada. Los ensayos principales implicarán la manipulación tanto de la composición de la comida (contenido de grasa) como de la dosis de insulina de acción rápida. Durante cada visita, se medirán muestras de sangre durante un período posprandial de 6 horas para determinar los parámetros glucémicos, lipémicos, hormonales y de metabolitos.

Cálculo del tamaño de la muestra:

El requisito de tamaño de muestra se estimó utilizando la ecuación. 1 Hopkins (2000):

n = 8s2/d2 [Ec. 1] Donde n es el tamaño de la muestra, s es el error típico en la medición y d es el tamaño del efecto significativo. La magnitud de d se derivó de 0,8 de la variación entre sujetos, que se calculó utilizando los datos existentes. El área incremental posprandial bajo la curva (AUC) para las concentraciones de triglicéridos después de una comida de macronutrientes mixtos en personas con DM1 es típicamente 0,74 mmol.l-1.hora-1, con una desviación estándar entre sujetos de 0,99 mmol.l-1 .hora-1 (Levetan et al. 2003). Por lo tanto, d se calculó como 0,79 mmol.l-1.hora-1. El CV de esta medida derivado de ensayos repetidos es del 23% (Weiss et al. 2008), dando un error típico en la región de 0,18 mmol.l-1.hora-1. Estos datos indican que un tamaño de muestra de 18 participantes proporciona una probabilidad superior al 80 % de detectar un efecto estadísticamente significativo con un valor de p < 0,05.

Criterios de inclusión/exclusión Participantes: para la inclusión en el estudio, los voluntarios serán hombres o mujeres y tendrán entre 18 y 50 años, no tendrán ninguna complicación diabética aparte de la retinopatía diabética de fondo, no tomarán ningún otro medicamento recetado que no sea insulina y recibirán tratamiento. con un régimen de insulina estable compuesto por una combinación de insulina glargina/determir de acción lenta/prolongada y un análogo de insulina de acción rápida (lispro o aspart, glulisina), y tienen una HbA1c <9,5 % (80 mmol/mol). Los participantes utilizarán actualmente el método de conteo de carbohidratos para administrar insulina de acción rápida a la hora de las comidas.

Antes de las pruebas principales: se indicará a los participantes que sigan un plan de dieta recomendado durante 48 horas antes de la prueba. Los participantes deberán leer y firmar un formulario de consentimiento informado y un cuestionario médico que se revisará durante cada visita al laboratorio. 24 horas antes de cada prueba, a los participantes se les colocará un sistema de monitoreo continuo de glucosa (MCG) en tiempo real. El CGM consta de un sensor que se inserta en el tejido subcutáneo y se asegura en su lugar con un vendaje adhesivo resistente al agua. Las lecturas del sensor se obtienen y almacenan en la memoria del monitor que está conectado al sensor permanente. Las lecturas de glucosa se proporcionan en la pantalla del monitor en tiempo real. Se configurarán alarmas en el monitor para notificar a los participantes si los niveles de glucosa son bajos (<3,9 mmol/L) o altos (>14 mmol/L) durante el período previo al ensayo. Para fines de calibración, se requerirá que el participante ingrese los valores de glucosa en sangre capilar un mínimo de 4 veces al día (a la hora de comer y antes de acostarse) utilizando su medidor de glucosa en sangre con pinchazo en el dedo. El CGM se retirará el día posterior a la prueba en un momento conveniente para el participante, de modo que se pueda capturar la glucemia nocturna y vespertina. El monitor CGM también actuará como una medida de seguridad para alertar a los participantes sobre excursiones glucémicas después de la intervención. Se indicará a los participantes que no utilicen valores de glucosa CGM en tiempo real para determinar las correcciones de la glucosa en sangre (administración adicional de carbohidratos/insulina).

Ensayos principales: Todos los ensayos se realizarán de forma aleatoria y equilibrada. Para cada visita, los participantes deberán llegar al laboratorio del Centro de Investigación Clínica NIHR en una mañana (~07:00 - 09:00 AM). En la primera visita se recogerán variables antropométricas (masa, estatura, IMC) previas a la experimentación. En cada visita, el participante asumirá una posición sentada y descansada mientras se inserta una cánula de calibre 18 en la vena antecubital de su brazo no dominante para la recolección de sangre venosa. Este se mantendrá permeable con infusiones periódicas de solución salina. Una vez finalizada la canulación, se recogerá una muestra de sangre en reposo de 12 ml. Luego, los participantes realizarán una de las cuatro pruebas:

Prueba 1) Comida con solo carbohidratos: los participantes consumirán una comida estandarizada con carbohidratos (80 g de carbohidratos, 25 g de proteína, 0 g de grasa: composición de la comida, arroz blanco, pollo, salsa de curry; 420 kcal) y se autoadministrarán (en el tejido subcutáneo del abdomen, según su rutina habitual) una dosis de insulina de acción rápida calculada según la proporción de conteo de carbohidratos (por ejemplo, 1 UI de insulina por 10 g de carbohidratos).

Ensayo 2) Los participantes replicarán el Ensayo 1, pero en esta ocasión la comida consumida tendrá 50 g adicionales de grasa (a través de la adición de Ghee). Esta grasa se añadirá a la salsa dentro de la comida (80 g de hidratos de carbono, 25 g de proteína, 50 g de grasa; 735 Kcal). Los participantes administrarán su insulina de acción rápida según el método de conteo de carbohidratos (es decir, la misma UI de insulina que en el Ensayo 1).

Ensayo 3) Los participantes replicarán el Ensayo 2, pero administrarán una dosis de insulina de acción rápida que se ha incrementado en un 15 %.

Ensayo 4) Los participantes replicarán el Ensayo 2, pero administrarán una dosis de insulina de acción rápida que se ha incrementado en un 30 %.

Una vez que los participantes hayan consumido la comida, permanecerán en reposo durante 6 horas, con muestras de sangre de 12 ml por hora para capturar los cambios en el transcurso del tiempo en las concentraciones de glucemia, lipemia, hormonas y metabolitos. Durante las primeras 2 horas, se tomará una muestra adicional de 1 ml en períodos de tiempo de 15 y 45 minutos para determinar únicamente la glucosa y el lactato en sangre. Por lo tanto, la cantidad total de sangre completa recolectada en cada prueba es de 160 ml, que es menos de la mitad de una lata de refresco típica.

Proceso de muestreo de sangre Para cada muestra de sangre, se recolectará 1 ml de sangre entera y se usará para la cuantificación inmediata de glucosa y lactato (Biosen C, EKF Diagnostics, Reino Unido). En las muestras en las que se toman los 11 ml adicionales de sangre, la sangre restante se transferirá a tubos diseñados para recolectar plasma sanguíneo y suero. A continuación, ambos recipientes se centrifugarán a 3000 x g durante 15 minutos para obtener plasma y suero, que se almacenarán a -80 C° para su posterior análisis de insulina (Invitron, UK), triglicéridos (Randox Labs, UK), Apoliopoproteína-B48 ( Oxford Biosystems, Reino Unido), Apolipoprotein-B-100 (Oxford Biosystems, Reino Unido), ácidos grasos no esterificados (Randox Labs, Reino Unido), TNF-α (Sigma Aldrich), GLP-1 (Oxford Biosystems, Reino Unido), PYY ( Sigma Aldrich, Reino Unido), capacidad antioxidante total (Eagle Biosciences, Reino Unido) y mieloperoxidasa humana (Eagle Biosciences, Reino Unido).

Durante cada extracción de sangre, se les pedirá a los participantes que completen una escala analógica visual (EVA) de Likert de 10 puntos para determinar las sensaciones subjetivas de hambre y saciedad. Después de la muestra de sangre y la finalización de la VAS a las 6 horas después de la comida, los participantes serán dados de alta del laboratorio.