Ajustes de dose de insulina para refeições com teor de gordura diferente em DM1

Desenho do estudo e Metodologia Desenho geral: 18 indivíduos com diabetes tipo 1 (T1DM), do sexo masculino ou feminino, com idade entre 18 e 50 anos, serão convidados a participar de quatro sessões de laboratório, cada uma com 7 dias de intervalo. Os participantes serão recrutados na clínica e por meio de publicidade na mídia local. Os participantes completarão quatro ensaios principais de forma aleatória e balanceada. Os principais ensaios envolverão a manipulação da composição da refeição (teor de gordura) e da dose de insulina de ação rápida. Durante cada visita, amostras de sangue serão medidas durante um período pós-prandial de 6 horas para determinar os parâmetros glicêmicos, lipêmicos, hormonais e metabólitos.

Cálculo do tamanho da amostra:

O requisito de tamanho da amostra foi estimado usando a Eq. 1 Hopkins (2000):

n = 8s2/d2 [Eq. 1] Onde n é o tamanho da amostra, s é o erro típico na medição ed é o tamanho do efeito significativo. A magnitude de d foi derivada de 0,8 da variação entre sujeitos, que foi calculada usando dados existentes. A área incremental pós-prandial sob a curva (AUC) para as concentrações de triglicerídeos após uma refeição com macronutrientes mistos em pessoas com DM1 é tipicamente 0,74 mmol.l-1.hour-1, com um desvio padrão entre indivíduos de 0,99 mmol.l-1 .hora-1 (Levetan et al. 2003). Portanto d foi calculado como 0,79 mmol.l-1.hora-1. O CV desta medida derivado de tentativas repetidas é de 23% (Weiss et al. 2008), dando um erro típico na região de 0,18 mmol.l-1.hour-1. Esses dados indicam que um tamanho de amostra de 18 participantes oferece mais de 80% de chance de detectar um efeito estatisticamente significativo com um valor de P < 0,05.

Critérios de inclusão/exclusão Participantes: Para inclusão no estudo, os voluntários serão do sexo masculino ou feminino e com idade entre 18 e 50 anos, livres de qualquer complicação do diabetes além de retinopatia diabética de fundo, não tomando nenhum medicamento prescrito além da insulina e sendo tratados com um regime estável de insulina composto por uma combinação de insulina glargina/determir de ação lenta/longa e um análogo de insulina de ação rápida (lispro ou aspart, glulisina) e têm HbA1c <9,5% (80 mmol/mol). Os participantes estarão usando o método de contagem de carboidratos para administrar insulina de ação rápida na hora da refeição.

Antes dos testes principais: Os participantes serão instruídos a seguir um plano de dieta recomendado por 48 horas antes do teste. Os participantes deverão ler e assinar um formulário de consentimento informado e um questionário médico que será revisado durante cada visita ao laboratório. 24 horas antes de cada teste, os participantes serão equipados com um sistema de monitoramento contínuo de glicose em tempo real (CGM). O CGM consiste em um sensor que é inserido no tecido subcutâneo que é fixado no lugar com um curativo adesivo à prova d'água. As leituras do sensor são obtidas e armazenadas na memória do monitor que está conectado ao sensor interno. As leituras de glicose são fornecidas na tela do monitor em tempo real. Os alarmes serão definidos no monitor para notificar os participantes se os níveis de glicose estiverem baixos (<3,9 mmol/L) ou altos (>14 mmol/L) durante o período pré-teste. Para fins de calibração, o participante deverá inserir os valores de glicemia capilar no mínimo 4 vezes por dia (na hora das refeições e antes de dormir) usando seu medidor de glicemia por picada no dedo. O CGM será removido no dia seguinte ao ensaio em um horário conveniente para o participante, para que a glicemia noturna e noturna possa ser capturada. O monitor CGM também atuará como uma medida de segurança para alertar os participantes sobre variações glicêmicas após a intervenção. Os participantes serão instruídos a não usar valores de glicose CGM em tempo real para determinar correções de glicose no sangue (administração adicional de carboidratos/insulina).

Ensaios principais: Todos os ensaios serão conduzidos de forma aleatória e balanceada. Para cada visita, os participantes deverão chegar ao laboratório do NIHR Clinical Research Facility pela manhã (~07:00 - 09:00). Na primeira visita serão coletadas variáveis ​​antropométricas (massa, estatura, IMC) antes da experimentação. Em cada visita, o participante assumirá uma posição sentada e descansada enquanto uma cânula de calibre 18 é inserida na veia antecubital de seu braço não dominante para coleta de sangue venoso. Isso será mantido patente com infusão periódica de solução salina. Após a conclusão da canulação, uma amostra de sangue em repouso de 12 ml será coletada. Os participantes realizarão uma das quatro tentativas:

Ensaio 1) Refeição apenas com carboidratos: Os participantes consumirão uma refeição padronizada de carboidratos (80 g de carboidratos, 25 g de proteína, 0 g de gordura: composição da refeição, arroz branco, frango, molho de curry; 420 kcal) e auto-administrarão (no tecido subcutâneo do abdome, de acordo com sua rotina regular) uma dose de insulina de ação rápida calculada de acordo com a proporção de contagem de carboidratos (por exemplo, 1 UI de insulina por 10 g de carboidratos).

Prova 2) Os participantes irão replicar a Prova 1, mas nesta ocasião a refeição consumida terá um acréscimo de 50 g de gordura (via adição de Ghee). Essa gordura será adicionada ao molho dentro da refeição (80 g de carboidratos, 25 g de proteína, 50 g de gordura; 735 Kcal). Os participantes administrarão sua insulina de ação rápida de acordo com o método de contagem de carboidratos (ou seja, a mesma UI de insulina do Teste 1).

Ensaio 3) Os participantes replicarão o Ensaio 2, mas administrarão uma dose de insulina de ação rápida que foi aumentada em 15%.

Ensaio 4) Os participantes replicarão o Ensaio 2, mas administrarão uma dose de insulina de ação rápida que foi aumentada em 30%.

Uma vez que os participantes tenham consumido a refeição, eles permanecerão em repouso por 6 horas, com 12ml de amostras de sangue por hora para capturar as mudanças ao longo do tempo nas concentrações de glicemia, lipemia, hormônios e metabólitos. Durante as primeiras 2 horas, uma amostra adicional de 1ml será coletada em períodos de 15 e 45 minutos para determinar apenas glicemia e lactato. Assim, a quantidade total de sangue total coletada em cada teste é de 160 ml, o que é menos da metade de uma lata típica de refrigerante.

Processo de amostragem de sangue Para cada amostra de sangue, 1 ml de sangue total será coletado e usado para a quantificação imediata de glicose e lactato (Biosen C, EKF Diagnostics, Reino Unido). Nas amostras em que são retirados os 11 ml adicionais de sangue, o sangue restante será transferido para tubos projetados para coletar plasma sanguíneo e soro. Ambos os recipientes serão então centrifugados a 3000 x g por 15 minutos para obtenção de plasma e soro, que serão armazenados a -80 C° para posterior análise de insulina (Invitron, UK), triglicerídeos (Randox Labs, UK), Apoliopoprotein-B48 ( Oxford Biosystems, Reino Unido), Apolipoproteína-B-100 (Oxford Biosystems, Reino Unido), ácidos graxos não esterificados (Randox Labs, Reino Unido), TNF-α (Sigma Aldrich), GLP-1 (Oxford Biosystems, Reino Unido), PYY ( Sigma Aldrich, Reino Unido), capacidade antioxidante total (Eagle Biosciences, Reino Unido) e mieloperoxidase humana (Eagle Biosciences, Reino Unido).

Durante cada coleta de sangue, os participantes serão solicitados a preencher uma Escala Analógica Visual Likert de 10 pontos (VAS) para determinar sentimentos subjetivos de fome e saciedade. Após a coleta de sangue e realização da EVA 6 horas pós-refeição, os participantes receberão alta do laboratório.