Az inzulin dózisának módosítása a zsírtartalomban eltérő étkezésekhez a T1DM-ben

A vizsgálat tervezése és módszertana Általános terv: 18 18 és 50 év közötti, 1-es típusú cukorbetegségben (T1DM) szenvedő férfi vagy női személyt hívnak meg négy laboratóriumi ülésre, melyeket 7 nap választ el egymástól. A résztvevőket a klinikán és a helyi médiában megjelenő hirdetéseken keresztül toborozzák. A résztvevők négy fő vizsgálatot végeznek el randomizált és ellensúlyozott módon. A fő kísérletek mind az étkezés összetételének (zsírtartalmának), mind a gyors hatású inzulin adagjának módosítását érintik. Minden egyes látogatás alkalmával vérmintákat mérnek 6 órás étkezés utáni időszakban, hogy meghatározzák a glikémiás, lipaemiás, hormon- és metabolit paramétereket.

Mintaméret számítás:

A mintaméret-szükségletet az Eq. 1 Hopkins (2000):

n = 8s2/d2 [Eq. 1] Ahol n a minta mérete, s a tipikus mérési hiba, d pedig az értelmes hatásméret. A d magnitúdóját az alanyok közötti eltérés 0,8-ából származtattuk, amelyet a meglévő adatok felhasználásával számítottunk ki. A T1DM-ben szenvedő betegeknél a trigliceridkoncentráció posztprandiális inkrementális görbe alatti területe (AUC) egy vegyes makrotápanyagot tartalmazó étkezést követően jellemzően 0,74 mmol.l-1.óra-1, az alanyok közötti szórás pedig 0,99 mmol.l-1. .óra-1 (Levetan et al. 2003). Ezért d-t 0,79 mmol.l-1.óra-1 értéknek számítottuk. Ennek a mérésnek az ismételt kísérletekből származó CV-je 23% (Weiss et al. 2008), ami tipikusan 0,18 mmol.l-1.óra-1 tartományba esik. Ezek az adatok azt mutatják, hogy a 18 résztvevős mintanagyság több mint 80%-os esélyt ad a statisztikailag szignifikáns hatás kimutatására 0,05-nél kisebb P érték mellett.

Bevételi/kizárási kritériumok Résztvevők: A vizsgálatba való bevonáshoz az önkéntesek férfiak vagy nők, 18-50 évesek, mentesek a diabéteszes szövődményektől, kivéve a háttérben előforduló diabéteszes retinopátiát, nem szednek semmilyen, az inzulinon kívül felírt gyógyszert, és kezelni kell őket. stabil inzulinkezeléssel, amely lassú/hosszú hatású glargin/determir inzulin és egy gyors hatású inzulinanalóg (lispro vagy aszpart, glulizin) kombinációjából áll, és HbA1c-értéke <9,5% (80 mmol/mol). A résztvevők jelenleg a szénhidrátszámláló módszert használják az étkezési gyors hatású inzulin adagolására.

A főpróbák előtt: A résztvevőket arra utasítják, hogy a tesztelés előtt 48 órával kövessenek egy ajánlott étrendet. A résztvevőknek el kell olvasniuk és alá kell írniuk a beleegyező nyilatkozatot és az orvosi kérdőívet, amelyeket minden laboratóriumi látogatás során felül kell vizsgálni. Minden vizsgálat előtt 24 órával a résztvevőket valós idejű folyamatos glükózmonitorozó rendszerrel (CGM) szerelik fel. A CGM egy érzékelőből áll, amelyet a bőr alatti szövetbe helyeznek be, és amelyet vízálló öntapadó kötéssel rögzítenek. Az érzékelő leolvasott értékeit a rendszer a monitor memóriájában tárolja, amely a belső érzékelőhöz van csatlakoztatva. A glükózértékek valós időben jelennek meg a monitor képernyőjén. A monitoron riasztások jelennek meg, amelyek értesítik a résztvevőket, ha a glükózszint alacsony (<3,9 mmol/L) vagy magas (>14 mmol/L) a próbaidőszak alatt. Kalibrálás céljából a résztvevőnek naponta legalább 4-szer (étkezéskor és lefekvés előtt) meg kell adnia a vércukorszint-értékét a vércukorszint-mérő ujjbegye segítségével. A CGM-et a vizsgálatot követő napon eltávolítják a résztvevő számára megfelelő időpontban, hogy rögzíteni lehessen a késő esti és éjszakai glikémiát. A CGM monitor biztonsági intézkedésként is szolgál majd, hogy figyelmeztesse a résztvevőket a beavatkozást követő glikémiás kirándulásokra. A résztvevőket utasítjuk, hogy ne használjanak valós idejű CGM glükóz értékeket a vércukorszint korrekcióinak meghatározásához (további szénhidrát/inzulin adagolás).

Főbb vizsgálatok: Minden vizsgálatot randomizált és kiegyensúlyozott módon hajtanak végre. Minden látogatás alkalmával a résztvevőknek egy reggel (~07:00-09:00) kell megérkezniük az NIHR Klinikai Kutatóközpont laboratóriumába. Az első látogatás alkalmával antropometriai változókat gyűjtenek (tömeg, termet, BMI) a kísérletezés előtt. Minden egyes látogatás alkalmával a résztvevő ülő és pihenő helyzetet vesz fel, miközben egy 18 gauge kanült helyeznek be nem domináns karjának antecubitalis vénájába a vénás vér levétele céljából. Ezt időszakos sóoldat infúzióval szabadalmaztatni. A kanül behelyezése után 12 ml nyugalmi vérmintát veszünk. A résztvevők ezután a négy próba egyikét hajtják végre:

Próba 1) Csak szénhidráttartalmú étkezés: A résztvevők szabványos szénhidráttartalmú ételt fogyasztanak (80 g szénhidrát, 25 g fehérje, 0 g zsír: étkezés összetétele, fehér rizs, csirke, curry szósz; 420 kcal), és önmagukban adják be (a a has bőr alatti szövetében, szokásos rutinjuk szerint) gyors hatású inzulinadag, amelyet a szénhidrátszámlálási arány szerint számítanak ki (pl. 1 NE inzulin 10 g szénhidrátra).

2. próba) A résztvevők megismétlik az 1. próbát, de ebben az esetben az elfogyasztott étel további 50 g zsírt tartalmaz (Ghee hozzáadásával). Ezt a zsírt az étkezés során adjuk a szószhoz (80 g szénhidrát, 25 g fehérje, 50 g zsír; 735 Kcal). A résztvevők a szénhidrátszámlálási módszer szerint adják be gyors hatású inzulinjukat (azaz ugyanazt a NE inzulint, mint az 1. kísérletben).

3. próba) A résztvevők megismétlik a 2. kísérletet, de 15%-kal megemelt, gyors hatású inzulin adagot fognak beadni.

4. próba) A résztvevők megismétlik a 2. kísérletet, de 30%-kal megemelt, gyors hatású inzulin adagot fognak beadni.

Miután a résztvevők elfogyasztották az étkezést, 6 órán keresztül nyugalomban maradnak, óránként 12 ml vérmintával, hogy rögzítsék a glikémia, lipaemia, hormon- és metabolitkoncentráció időbeli változásait. Az első 2 órában további 1 ml-es mintát vesznek 15 és 45 percenként, hogy meghatározzák a vércukorszintet és a laktátot. Így az egyes vizsgálatok során összegyűjtött teljes vér teljes mennyisége 160 ml, ami kevesebb, mint a fele egy tipikus üdítőitaldoboznak.

Vérmintavételi eljárás Minden vérmintához 1 ml teljes vért vesznek, és a glükóz és laktát azonnali mennyiségi meghatározására használják fel (Biosen C, EKF Diagnostics, Egyesült Királyság). Azokon a mintákon, amelyekből további 11 ml vért vesznek, a fennmaradó vért a vérplazma és a szérum gyűjtésére szolgáló csövekbe töltik. Ezután mindkét tartályt 3000 x g-vel centrifugálják 15 percig, hogy plazmát és szérumot kapjanak, amelyeket -80 C°-on tárolnak az inzulin (Invitron, UK), trigliceridek (Randox Labs, UK), az Apoliopoprotein-B48 (Egyesült Királyság) későbbi elemzéséhez. Oxford Biosystems, Egyesült Királyság), Apolipoprotein-B-100 (Oxford Biosystems, Egyesült Királyság), nem észterezett zsírsavak (Randox Labs, Egyesült Királyság), TNF-α (Sigma Aldrich), GLP-1 (Oxford Biosystems, Egyesült Királyság), PYY ( Sigma Aldrich, Egyesült Királyság), Teljes Antioxidáns kapacitás (Eagle Biosciences, Egyesült Királyság) és Human Myeloperoxidase (Eagle Biosciences, Egyesült Királyság).

Minden vérvétel alkalmával a résztvevőket felkérik egy 10 pontos Likert Visual Analogue Scale (VAS) kitöltésére az éhség és teltség szubjektív érzésének meghatározására. A vérminta levétele és a VAS befejezése után 6 órával étkezés után a résztvevőket kiengedik a laboratóriumból.