Коррекция дозы инсулина для пищи с разным содержанием жира при СД1

План исследования и методология Общий план: 18 мужчин и женщин с диабетом 1 типа (СД1) в возрасте от 18 до 50 лет будут приглашены для участия в четырех лабораторных сессиях, каждая из которых разделена на 7 дней. Участники будут набираться в клинике и через рекламу в местных СМИ. Участники пройдут четыре основных испытания рандомизированным и встречно-сбалансированным образом. Основные испытания будут включать манипуляции как с составом пищи (содержание жира), так и с дозой инсулина быстрого действия. Во время каждого посещения образцы крови будут измеряться в течение 6-часового постпрандиального периода для определения параметров гликемии, липемии, гормонов и метаболитов.

Расчет размера выборки:

Требования к размеру выборки оценивались с использованием уравнения 1 Хопкинс (2000):

n = 8s2/d2 [уравнение. 1] Где n — размер выборки, s — типичная ошибка измерения, а d — величина значимого эффекта. Величина d была получена из 0,8 вариации между субъектами, которая была рассчитана с использованием существующих данных. Постпрандиальная приростная площадь под кривой (AUC) для концентраций триглицеридов после приема пищи со смешанными макронутриентами у людей с СД1 обычно составляет 0,74 ммоль·л-1·час-1 со стандартным отклонением между субъектами 0,99 ммоль·л-1. .час-1 (Леветан и др., 2003). Поэтому d был рассчитан как 0,79 ммоль.л-1.час-1. CV этой меры, полученной из повторных испытаний, составляет 23% (Weiss et al. 2008), что дает типичную ошибку в районе 0,18 ммоль.л-1.час-1. Эти данные показывают, что размер выборки из 18 участников обеспечивает вероятность обнаружения статистически значимого эффекта более 80% со значением P <0,05.

Критерии включения/исключения Участники: для включения в исследование добровольцами должны быть мужчины или женщины в возрасте от 18 до 50 лет, без каких-либо осложнений диабета, кроме фоновой диабетической ретинопатии, не принимающие какие-либо предписанные лекарства, кроме инсулина, и получающие лечение. со стабильным режимом инсулинотерапии, состоящим из комбинации инсулина медленного/длительного действия гларгина/детермира и быстродействующего аналога инсулина (лизпро или аспарт, глулизин), и имеют HbA1c <9,5% (80 ммоль/моль). В настоящее время участники будут использовать метод подсчета углеводов для введения инсулина быстрого действия во время еды.

Перед основными испытаниями: участники будут проинструктированы соблюдать рекомендуемый план диеты в течение 48 часов до тестирования. Участники должны будут прочитать и подписать форму информированного согласия и медицинскую анкету, которые будут просматриваться во время каждого визита в лабораторию. За 24 часа до каждого испытания участники будут оснащены системой непрерывного мониторинга уровня глюкозы (CGM) в режиме реального времени. CGM состоит из датчика, который вводится в подкожную клетчатку и фиксируется водонепроницаемой липкой повязкой. Показания датчиков снимаются и сохраняются в памяти монитора, который подключен к стационарному датчику. Показания глюкозы выводятся на экран монитора в режиме реального времени. На мониторе будут установлены сигналы тревоги, чтобы уведомлять участников о низком (<3,9 ммоль/л) или высоком (>14 ммоль/л) уровне глюкозы в течение предварительного периода. В целях калибровки участник должен будет вводить значения уровня глюкозы в капиллярной крови не менее 4 раз в день (во время еды и перед сном) с помощью своего измерителя уровня глюкозы в крови из пальца. CGM будет удален на следующий день после испытания в удобное для участника время, чтобы можно было зафиксировать вечернюю и ночную гликемию. Монитор CGM также будет действовать как мера безопасности, чтобы предупредить участников о гликемических отклонениях после вмешательства. Участники будут проинструктированы не использовать значения глюкозы CGM в реальном времени для определения поправок к глюкозе в крови (дополнительное введение углеводов / инсулина).

Основные испытания: Все испытания будут проводиться рандомизированным и уравновешенным образом. Для каждого визита участники должны будут прибыть в лабораторию Центра клинических исследований NIHR утром (~ 07:00 - 09:00). При первом посещении будут собраны антропометрические переменные (масса, рост, ИМТ) до начала экспериментов. При каждом посещении участник будет принимать сидячее и отдохнувшее положение, в то время как канюля 18 размера вставляется в антекубитальную вену его недоминантной руки для сбора венозной крови. Это будет поддерживаться периодической инфузией физиологического раствора. После завершения катетеризации будет взят образец крови покоя объемом 12 мл. Затем участники выполнят одно из четырех испытаний:

Испытание 1) Еда, содержащая только углеводы: участники будут потреблять стандартизированную углеводную пищу (80 г углеводов, 25 г белков, 0 г жиров: состав еды, белый рис, курица, соус карри; 420 ккал) и будут самостоятельно вводить (в подкожной клетчатки живота, в соответствии с их обычной рутиной) дозу инсулина быстрого действия, рассчитанную по соотношению количества углеводов (например, 1 МЕ инсулина на 10 г углеводов).

Испытание 2) Участники будут повторять испытание 1, но в этом случае потребляемая еда будет содержать дополнительные 50 г жира (за счет добавления топленого масла). Этот жир будет добавляться в соус во время еды (80 г углеводов, 25 г белков, 50 г жиров; 735 ккал). Участники будут вводить быстродействующий инсулин в соответствии с методом подсчета углеводов (т. е. те же МЕ инсулина, что и в испытании 1).

Испытание 3) Участники будут повторять испытание 2, но будут вводить дозу инсулина быстрого действия, увеличенную на 15%.

Испытание 4) Участники будут повторять испытание 2, но будут вводить дозу инсулина быстрого действия, увеличенную на 30%.

После того, как участники съели еду, они будут оставаться в состоянии покоя в течение 6 часов, с образцами крови 12 мл в час, чтобы зафиксировать временные изменения гликемии, липемии, концентрации гормонов и метаболитов. В течение первых 2 часов будет взят дополнительный образец объемом 1 мл через 15 и 45 минут для определения только уровня глюкозы и лактата в крови. Таким образом, общее количество цельной крови, собранной в рамках каждого испытания, составляет 160 мл, что меньше половины обычной банки безалкогольных напитков.

Процесс забора крови Для каждого образца крови будет взят 1 мл цельной крови, который будет использован для немедленного количественного определения глюкозы и лактата (Biosen C, EKF Diagnostics, Великобритания). При заборе дополнительных 11 мл крови оставшаяся часть крови будет перенесена в пробирки, предназначенные для сбора плазмы и сыворотки крови. Затем оба контейнера будут центрифугированы при 3000 x g в течение 15 минут для получения плазмы и сыворотки, которые будут храниться при -80°C для последующего анализа инсулина (Invitron, Великобритания), триглицеридов (Randox Labs, Великобритания), аполиопопротеина-B48 ( Oxford Biosystems, Великобритания), аполипопротеин-B-100 (Oxford Biosystems, Великобритания), неэтерифицированные жирные кислоты (Randox Labs, Великобритания), TNF-α (Sigma Aldrich), GLP-1 (Oxford Biosystems, Великобритания), PYY ( Sigma Aldrich, Великобритания), общая антиоксидантная способность (Eagle Biosciences, Великобритания) и человеческая миелопероксидаза (Eagle Biosciences, Великобритания).

Во время каждого взятия крови участников просят заполнить 10-балльную визуально-аналоговую шкалу Лайкерта (ВАШ), чтобы определить субъективное чувство голода и сытости. После взятия образца крови и завершения VAS через 6 часов после еды участники будут выписаны из лаборатории.