局部冷冻治疗膝关节炎的抗炎作用 (ALGGAR)

患者纳入法国贝桑松大学医院风湿病科住院并患有非化脓性膝关节炎（根据 ACR-EULAR 标准的类风湿性关节炎、根据 ASAS 标准的脊柱关节炎、痛风或焦磷酸钙沉积病 (CPDD)）的患者-通过滑液中的显微微晶评估诊断）在签署知情同意书后连续包括在内。 该方案由当地伦理委员会宣布并批准 - clinicaltrials.gov:NCT02573298， Comité de Protection des Personnes - Est II: 12-664)，所有研究均按照相关指南/法规进行。 患有化脓性关节炎和膝骨关节炎的患者被排除在外。 患者在纳入前 6 个月未接受生物治疗或常规 DMARD。 皮质类固醇、秋水仙碱和非甾体抗炎药在纳入前至少停用 24 小时。

研究设计 在研究的第一阶段，纳入的患者被随机分配 (1:1) 接受局部冰敷（Thermogel®, Artsana, Grandate, Italy - 30 分钟应用 - N=16）或高压冷二氧化碳 - 78°C（Cryo+®，Cryonic，Salins-les-Bains，法国 - 2 分钟 - N=16）。 每位患者每隔 8 小时（上午 9 点和下午 5 点）接受两次随机选择的技术应用。 使用 MLT409/A Skin Temperature Probe® 和 ML309 Thermistor Pod® (ADInstruments,Dunedin, NZ) 监测治疗膝盖的皮肤温度。 这 32 名患者中的 30 名也被纳入研究的另一部分，旨在评估滑膜能量多普勒半定量评分在 2 次冷应用（冰与冷 CO2）2 之前/之后的变化。就在第一次冷应用之前，上午 9 点和 24 小时后（第 1 天上午 9 点），进行了关节穿刺术。 对滑液进行标准分析（细菌学、细胞学和微晶显微镜评估）。 此外，将一部分滑液离心，然后冷冻在-80℃。 对于第二次关节穿刺术，在收集滑液进行相同分析后，在取出针头之前进行关节内皮质类固醇注射（去炎松、HEXATRIONE®、Ethypharm、Saint-Cloud、France）。 这些滑液样本用于执行研究的当前部分，该部分总体上有能力评估 2 次冷应用之前/之后滑液中 IL-6 水平的变化。 纳入所有患者后，滑液 IL-6、IL-17A、IL-1β、TNF-α、VEGF（多重流式细胞术，CBA® BD Bioscience，Franklin Lakes，New Jersey，USA）和 PG-E2（ELISA , KGE004B®, Bio-Techne, Minneapolis, Minnesota, USA), NF-KB-P65/NFkB-p65-P (ELISA,85-86083-11®, Thermofisher, Waltham, Massachusetts, USA) 水平。

在研究的第二阶段，我们只纳入了患有双膝关节炎的患者，并根据上述方案仅对他们进行局部冰敷（N=15 + 1 名先前纳入第一阶段的膝关节双关节炎患者冰处理组的研究）。 除了冷冻治疗外，对侧未治疗的膝盖应用相同的方案。 因此，与治疗膝关节相比，在相同的评估时间收集和分析滑液，因此这些对侧关节炎膝关节用作细胞因子和酶测定的配对对照（N = 16）。

统计分析。 计算样本大小以检测 2 次冷应用之前/之后 IL-6 滑膜蛋白水平的显着变化。 根据发表的 IL-6 测定结果，每组需要 15.78 (N=16) 名患者检测 IL-6 蛋白水平 2325 pg/mL 的差异，功效为 95%，p 值为 0.05膝关节滑液。 因此，在研究的第一个随机阶段（冰疗与冷 CO2）中纳入了 2 组 16 名患者，然后研究的第二阶段需要 16 名膝关节双关节炎患者（冰疗与对侧膝关节，N =15+1 名患者已经参加了第一阶段）。 由于这些原因，总共包括 47 名患者。 进行配对 Wilcoxon Mann-Whitney 检验以比较治疗前后的平均细胞因子和酶水平。 还计划进行亚组分析（根据治疗方式（冰或冷 CO2）和风湿病的类型（微晶诱发的关节炎 - 合并的痛风和 CPDD 患者 - 对比非微晶诱发的疾病 - 合并的 RA 和 SpA 患者）。 此外，使用 R® 软件（rmeta® 和 meta®）计算了冰处理膝盖和相应的对侧未治疗膝盖之间的细胞因子水平（治疗前/后）的组间效应量（95% CI 的加权平均差异）包）。 还使用 Pearson 系数进行相关性检验，以评估与细胞因子水平变化相关的参数（治疗前/后）。 使用 R® 和 Graphpad® 软件进行统计分析。

其他信息资金：这项工作得到了 GIRCI Est II（“青年科学家”资助 - 2014 - 21324 欧元）的支持。

竞争利益：无。