Léčba pšeničnou moukou s mikrobiální transglutaminázou a lysinethylesterem: Nové hranice v léčbě celiakie. (WHETMIT)
Pšeničná mouka podrobená enzymatickému ošetření mikrobiální transglutaminázou v přítomnosti ethylesteru lysinu pro použití v potravinách při léčbě celiakie.
Celiakie je jednou z nejčastějších forem potravinové intolerance (prevalence 1/200). Onemocnění vzniká u geneticky predisponovaných jedinců po požití potravin obsahujících lepek. Pacienti s celiakií mohou trpět těžkým malabsorpčním syndromem, který je charakterizován především průjmem a úbytkem hmotnosti. Jediným v současnosti uznávaným terapeutickým přístupem je celoživotní bezlepková dieta.
Specifické oblasti molekuly lepku se stávají rozpoznatelnými lymfocyty a aktivují je v důsledku změn provedených tkáňovou transglutaminázou. Tyto změny spočívají v přeměně specifických zbytků glutaminu na kyselinu glutamovou. Důsledkem je zvýšená vazebná afinita mezi lepkem a histokompatibilní molekulou (HLA-DQ2), lokalizovanou na povrchu "antigen prezentujících buněk" (APC); expozice fragmentů modifikovaného lepku na povrchu APC je fenomén, který nakonec aktivuje T lymfocyty.
Nedávné studie modifikovaného lepku potvrdily hypotézu, že je možné blokovat prezentaci lepku lymfocytům pomocí vazby ethylesteru lysinu výhradně na ty oblasti lepku, které jsou zodpovědné za aktivaci lymfocytů.
Enzymatické ošetření se provádí přímo na mouce místo extrahovaného lepku, přičemž je zachována stejná protizánětlivá účinnost.
Postup využívá potravinářský enzym, mikrobiální transglutaminázu (mTGasi) izolovanou ze Streptoverticillium mobarensis, schopnou katalyzovat tvorbu mezimolekulárních „příčných vazeb“, které modifikují funkční vlastnosti produktů.
Cílem studie je ověřit schopnost enzymatické úpravy pšeničné mouky mTGasi a ethylesterem lysinu blokovat toxický účinek lepku u pacientů s celiakií.
Přehled studie
Postavení
Podmínky
Detailní popis
Celiakie je jednou z nejčastějších forem potravinové intolerance (prevalence 1/200). Onemocnění se vyskytuje u geneticky predisponovaných jedinců po požití potravin obsahujících pšeničný lepek a podobné bílkoviny, které se nacházejí v jiných běžných obilovinách, jako je ječmen a žito. Pacienti s celiakií mohou trpět těžkým malabsorpčním syndromem, který je charakterizován především průjmem, ztrátou hmotnosti a zpomalením růstu. Jediným v současnosti uznávaným terapeutickým přístupem je celoživotní bezlepková dieta.
Specifické oblasti molekuly lepku se stávají rozpoznatelnými lymfocyty a aktivují je v důsledku změn provedených tkáňovou transglutaminázou. Tyto změny spočívají v přeměně specifických zbytků glutaminu (Q) na kyselinu glutamovou (E). Důsledkem je zvýšená vazebná afinita mezi lepkem a histokompatibilní molekulou (HLA-DQ2), lokalizovanou na povrchu "antigen prezentujících buněk" (APC); expozice fragmentů modifikovaného lepku na povrchu APC je fenomén, který nakonec aktivuje T lymfocyty.
Nedávné studie modifikovaného lepku potvrdily hypotézu, že je možné blokovat prezentaci lepku lymfocytům pomocí vazby ethylesteru lysinu výhradně na ty oblasti lepku, které jsou zodpovědné za aktivaci lymfocytů.
Konkrétně je možné provést enzymatické ošetření přímo na mouce místo extrahovaného lepku, při zachování stejné protizánětlivé účinnosti. Konečný postup spočívá v rozpuštění mouky ve vodě v přítomnosti vhodných koncentrací enzymu a ethylesteru lysinu, přičemž se suspenze udržuje v konstantním pohybu po dobu dvou hodin při teplotě místnosti.
Procedura využívá potravinářský enzym, mikrobiální transglutaminázu (mTGasi) izolovanou ze Streptoverticillium mobarensis, již používanou k přípravě jídla. mTgasi je schopen katalyzovat tvorbu mezimolekulárních "křížových vazeb" modifikujících funkční vlastnosti produktů prostřednictvím agregace a polymerace proteinů. Zvláštní metoda identifikovaná naší laboratoří snižuje možnost křížových vazeb mezi proteiny: v důsledku toho se minimální změny týkají struktury lepku a následně viskoelastických vlastností těsta.
Cílem studie je ověřit schopnost enzymatické úpravy pšeničné mouky mTGasi a ethylesterem lysinu blokovat toxický účinek lepku u pacientů s celiakií.
Typ studie
Zápis (Očekávaný)
Fáze
- Fáze 2
Kontakty a umístění
Studijní místa
-
-
-
Rome, Itálie, 00186
- Nábor
- Sapienza University - Policlinico Umberto I
-
Kontakt:
- Antonio Picarelli, medicine
- Telefonní číslo: +390649978370
- E-mail: antonio.picarelli@uniroma1.it
-
-
Kritéria účasti
Kritéria způsobilosti
Věk způsobilý ke studiu
Přijímá zdravé dobrovolníky
Pohlaví způsobilá ke studiu
Popis
Kritéria pro zařazení:
KRITÉRIA PRO ZAŘAZENÍ
- diagnostika celiakie podle kritérií ESPGHAN: třída III podle klasifikace Marsh-Oberhuber, jasná odpověď na bezlepkovou dietu, sérologické antiendomysium a antitransglutaminázové protilátky pozitivní výsledky před GFD;
- HLA DQ2-DQ8 pozitivní výsledky;
- bezlepková dieta minimálně od jednoho roku;
- negativní sérologie od minimálně 1 roku;
VYLUČOVACÍ KRITÉRIA
- zánětlivá onemocnění střev;
- nádory;
- infekční onemocnění jater;
- poškození ledvin.
Studijní plán
Jak je studie koncipována?
Detaily designu
- Primární účel: Léčba
- Přidělení: Randomizované
- Intervenční model: Paralelní přiřazení
- Maskování: Trojnásobný
Zbraně a zásahy
Skupina účastníků / Arm |
Intervence / Léčba |
|---|---|
|
Experimentální: suchary vyrobené z upravené mouky
Bezlepková dieta s přidáním sucharů (100 g / den) vyrobených z komerční pšeničné mouky enzymaticky ošetřené mTGasi a ethylesterem lysinu.
|
100 g sucharů získaných z komerční pšeničné mouky enzymaticky ošetřené mTGasi a ethylesterem lysinu, každý den po dobu 3 měsíců
bezlepková dieta
|
|
Aktivní komparátor: suchary vyrobené z neupravené mouky
Bezlepková dieta s přidáním sucharů (100 g/den) vyrobených z neošetřené pšeničné mouky.
|
bezlepková dieta
100 g sucharů získaných z komerční pšeničné mouky, která není enzymaticky ošetřena mTGasi a ethylesterem lysinu, každý den po dobu 3 měsíců
|
Co je měření studie?
Primární výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
Změna od výchozí hodnoty v IgA protilátek proti tkáňové transglutamináze (anti-tTG) po 30 dnech
Časové okno: Po 1 měsíci
|
Průkaz případné pozitivizace specifických sérologických protilátek na celiakii.
Výsledky kvantifikované čtečkou ELISA při 450 nm (A450nm) jsou vyjádřeny v U/ml a hladina protilátky 10 U/ml byla použita jako hraniční hodnota pro identifikaci anti-tTG pozitivních výsledků.
|
Po 1 měsíci
|
|
Změna od výchozí hodnoty v IgA protilátek proti tkáňové transglutamináze (anti-tTG) po 60 dnech
Časové okno: Po 2 měsících
|
Průkaz případné pozitivizace specifických sérologických protilátek na celiakii.
Výsledky kvantifikované čtečkou ELISA při 450 nm (A450nm) jsou vyjádřeny v U/ml a hladina protilátky 10 U/ml byla použita jako hraniční hodnota pro identifikaci anti-tTG pozitivních výsledků.
|
Po 2 měsících
|
|
Změna od výchozí hodnoty v IgA protilátek proti tkáňové transglutamináze (anti-tTG) po 90 dnech
Časové okno: Po 3 měsících
|
Průkaz případné pozitivizace specifických sérologických protilátek na celiakii.
Výsledky kvantifikované čtečkou ELISA při 450 nm (A450nm) jsou vyjádřeny v U/ml a hladina protilátky 10 U/ml byla použita jako hraniční hodnota pro identifikaci anti-tTG pozitivních výsledků.
|
Po 3 měsících
|
|
Změna od výchozí hodnoty v IgA protilátek proti endomyziu (EMA) po 30 dnech
Časové okno: Po 1 měsíci
|
Test používaný k potvrzení sérologické aktivace celiakie.
IgA EMA byly hledány v sérech zředěných 1:5 nepřímou imunofluorescenční analýzou na kryostatických řezech opičího jícnu.
Výsledky jsou vyjádřeny jako ''pozitivní/negativní''.
|
Po 1 měsíci
|
|
Změna od výchozí hodnoty v IgA protilátek proti endomyziu (EMA) po 60 dnech
Časové okno: Po 2 měsících
|
Test používaný k potvrzení sérologické aktivace celiakie.
IgA EMA byly hledány v sérech zředěných 1:5 nepřímou imunofluorescenční analýzou na kryostatických řezech opičího jícnu.
Výsledky jsou vyjádřeny jako ''pozitivní/negativní''.
|
Po 2 měsících
|
|
Změna od výchozí hodnoty v IgA protilátek proti endomyziu (EMA) po 90 dnech
Časové okno: Po 3 měsících
|
Test používaný k potvrzení sérologické aktivace celiakie.
IgA EMA byly hledány v sérech zředěných 1:5 nepřímou imunofluorescenční analýzou na kryostatických řezech opičího jícnu.
Výsledky jsou vyjádřeny jako ''pozitivní/negativní''.
|
Po 3 měsících
|
|
Patologické odchylky v histologické analýze od výchozího stavu
Časové okno: Po 3 měsících nebo v případě sérových anti-tTG IgA/EMA IgA pozitivních výsledků
|
Důkaz histologických změn duodenální sliznice vyvolaných celiakií, spočívající ve změněném (<3:1) poměru výška/hloubka klků a zvýšených (>25) intraepiteliálních lymfocytů na 100 střevních epiteliálních buněk, podle klasifikace Marsh-Oberhuber.
|
Po 3 měsících nebo v případě sérových anti-tTG IgA/EMA IgA pozitivních výsledků
|
Sekundární výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
Přítomnost nadýmání na začátku
Časové okno: Na základní linii
|
Hodnocení intenzity nadýmání se uvádí podle vizuální analogové nebo analogové škály (VAS) s rozsahem 0-10.
|
Na základní linii
|
|
Přítomnost bolesti břicha na začátku
Časové okno: Na základní linii
|
Hodnocení intenzity bolesti břicha se uvádí podle vizuální analogové nebo analogové škály (VAS) s rozsahem 0-10.
|
Na základní linii
|
|
Přítomnost průjmu na začátku
Časové okno: Na základní linii
|
Hodnocení intenzity průjmu se uvádí podle vizuální analogové nebo analogové škály (VAS) s rozsahem 0-10.
|
Na základní linii
|
|
Přítomnost astenie na začátku
Časové okno: Na základní linii
|
Hodnocení intenzity astenie se uvádí podle vizuální analogové nebo analogové škály (VAS) s rozsahem 0-10.
|
Na základní linii
|
|
Variace nadýmání od výchozí hodnoty po 30 dnech
Časové okno: Po 1 měsíci
|
Hodnocení intenzity nadýmání se uvádí podle vizuální analogové nebo analogové škály (VAS) s rozsahem 0-10.
|
Po 1 měsíci
|
|
Změna bolesti břicha od výchozí hodnoty po 30 dnech
Časové okno: Po 1 měsíci
|
Hodnocení intenzity bolesti břicha se uvádí podle vizuální analogové nebo analogové škály (VAS) s rozsahem 0-10.
|
Po 1 měsíci
|
|
Změna průjmu od výchozí hodnoty po 30 dnech
Časové okno: Po 1 měsíci
|
Hodnocení intenzity průjmu se uvádí podle vizuální analogové nebo analogové škály (VAS) s rozsahem 0-10.
|
Po 1 měsíci
|
|
Variace astenie od výchozí hodnoty po 30 dnech
Časové okno: Po 1 měsíci
|
Hodnocení intenzity astenie se uvádí podle vizuální analogové nebo analogové škály (VAS) s rozsahem 0-10.
|
Po 1 měsíci
|
|
Variace nadýmání od výchozí hodnoty po 60 dnech
Časové okno: Po 2 měsících
|
Hodnocení intenzity nadýmání se uvádí podle vizuální analogové nebo analogové škály (VAS) s rozsahem 0-10.
|
Po 2 měsících
|
|
Změna bolesti břicha od výchozí hodnoty po 60 dnech
Časové okno: Po 2 měsících
|
Hodnocení intenzity bolesti břicha se uvádí podle vizuální analogové nebo analogové škály (VAS) s rozsahem 0-10.
|
Po 2 měsících
|
|
Změna průjmu od výchozího stavu po 60 dnech
Časové okno: Po 2 měsících
|
Hodnocení intenzity průjmu se uvádí podle vizuální analogové nebo analogové škály (VAS) s rozsahem 0-10.
|
Po 2 měsících
|
|
Variace astenie od výchozí hodnoty po 60 dnech
Časové okno: Po 2 měsících
|
Hodnocení intenzity astenie se uvádí podle vizuální analogové nebo analogové škály (VAS) s rozsahem 0-10.
|
Po 2 měsících
|
|
Variace nadýmání od výchozí hodnoty po 90 dnech
Časové okno: Po 3 měsících
|
Hodnocení intenzity nadýmání se uvádí podle vizuální analogové nebo analogové škály (VAS) s rozsahem 0-10.
|
Po 3 měsících
|
|
Změna bolesti břicha od výchozí hodnoty po 90 dnech
Časové okno: Po 3 měsících
|
Hodnocení intenzity bolesti břicha se uvádí podle vizuální analogové nebo analogové škály (VAS) s rozsahem 0-10.
|
Po 3 měsících
|
|
Změna průjmu od výchozího stavu po 90 dnech
Časové okno: Po 3 měsících
|
Hodnocení intenzity průjmu se uvádí podle vizuální analogové nebo analogové škály (VAS) s rozsahem 0-10.
|
Po 3 měsících
|
|
Variace astenie od výchozí hodnoty po 90 dnech
Časové okno: Po 3 měsících
|
Hodnocení intenzity astenie se uvádí podle vizuální analogové nebo analogové škály (VAS) s rozsahem 0-10.
|
Po 3 měsících
|
Spolupracovníci a vyšetřovatelé
Sponzor
Publikace a užitečné odkazy
Obecné publikace
- Catassi C, Fabiani E, Iacono G, D'Agate C, Francavilla R, Biagi F, Volta U, Accomando S, Picarelli A, De Vitis I, Pianelli G, Gesuita R, Carle F, Mandolesi A, Bearzi I, Fasano A. A prospective, double-blind, placebo-controlled trial to establish a safe gluten threshold for patients with celiac disease. Am J Clin Nutr. 2007 Jan;85(1):160-6. doi: 10.1093/ajcn/85.1.160.
- Branski D, Fasano A, Troncone R. Latest developments in the pathogenesis and treatment of celiac disease. J Pediatr. 2006 Sep;149(3):295-300. doi: 10.1016/j.jpeds.2006.06.003. No abstract available.
- Nilsen EM, Jahnsen FL, Lundin KE, Johansen FE, Fausa O, Sollid LM, Jahnsen J, Scott H, Brandtzaeg P. Gluten induces an intestinal cytokine response strongly dominated by interferon gamma in patients with celiac disease. Gastroenterology. 1998 Sep;115(3):551-63. doi: 10.1016/s0016-5085(98)70134-9.
- Molberg O, Mcadam SN, Korner R, Quarsten H, Kristiansen C, Madsen L, Fugger L, Scott H, Noren O, Roepstorff P, Lundin KE, Sjostrom H, Sollid LM. Tissue transglutaminase selectively modifies gliadin peptides that are recognized by gut-derived T cells in celiac disease. Nat Med. 1998 Jun;4(6):713-7. doi: 10.1038/nm0698-713. Erratum In: Nat Med 1998 Aug;4(8):974.
- Gianfrani C, Siciliano RA, Facchiano AM, Camarca A, Mazzeo MF, Costantini S, Salvati VM, Maurano F, Mazzarella G, Iaquinto G, Bergamo P, Rossi M. Transamidation of wheat flour inhibits the response to gliadin of intestinal T cells in celiac disease. Gastroenterology. 2007 Sep;133(3):780-9. doi: 10.1053/j.gastro.2007.06.023. Epub 2007 Jun 20.
- Yokoyama K, Nio N, Kikuchi Y. Properties and applications of microbial transglutaminase. Appl Microbiol Biotechnol. 2004 May;64(4):447-54. doi: 10.1007/s00253-003-1539-5. Epub 2004 Jan 22.
- Fink ML, Chung SI, Folk JE. gamma-Glutamylamine cyclotransferase: specificity toward epsilon-(L-gamma-glutamyl)-L-lysine and related compounds. Proc Natl Acad Sci U S A. 1980 Aug;77(8):4564-8. doi: 10.1073/pnas.77.8.4564.
- Picarelli A, Di Tola M, Sabbatella L, Anania MC, Calabro A, Renzi D, Bai JC, Sugai E, Carroccio A, Di Prima L, Bardella MT, Barisani D, Ribes-Koninckx C, Aliaga ED, Gasparin M, Bravi E; Multicentre Organ Culture System Study Group. Usefulness of the organ culture system in the in vitro diagnosis of coeliac disease: a multicentre study. Scand J Gastroenterol. 2006 Feb;41(2):186-90. doi: 10.1080/00365520510024151.
- Picarelli A, Maiuri L, Frate A, Greco M, Auricchio S, Londei M. Production of antiendomysial antibodies after in-vitro gliadin challenge of small intestine biopsy samples from patients with coeliac disease. Lancet. 1996 Oct 19;348(9034):1065-7. doi: 10.1016/S0140-6736(96)03060-7.
- Marino M, Casale R, Borghini R, Di Nardi S, Donato G, Angeloni A, Moscaritolo S, Grasso L, Mazzarella G, Di Tola M, Rossi M, Picarelli A. The effects of modified versus unmodified wheat gluten administration in patients with celiac disease. Int Immunopharmacol. 2017 Jun;47:1-8. doi: 10.1016/j.intimp.2017.03.012. Epub 2017 Mar 23.
Termíny studijních záznamů
Hlavní termíny studia
Začátek studia
Primární dokončení (Očekávaný)
Dokončení studie (Očekávaný)
Termíny zápisu do studia
První předloženo
První předloženo, které splnilo kritéria kontroly kvality
První zveřejněno (Odhad)
Aktualizace studijních záznamů
Poslední zveřejněná aktualizace (Odhad)
Odeslaná poslední aktualizace, která splnila kritéria kontroly kvality
Naposledy ověřeno
Více informací
Termíny související s touto studií
Klíčová slova
Další relevantní podmínky MeSH
Další identifikační čísla studie
- 672/10 Rif. 1907 / 22.07.2010
Tyto informace byly beze změn načteny přímo z webu clinicaltrials.gov. Máte-li jakékoli požadavky na změnu, odstranění nebo aktualizaci podrobností studie, kontaktujte prosím register@clinicaltrials.gov. Jakmile bude změna implementována na clinicaltrials.gov, bude automaticky aktualizována i na našem webu .