Hvedemelsbehandling med mikrobiel transglutaminase og lysinethylester: nye grænser i behandling af cøliaki. (WHETMIT)
Hvedemel udsat for mikrobiel transglutaminase-enzymatisk behandling i tilstedeværelse af lysinethylester til fordøjelsesanvendelse til behandling af cøliaki.
Cøliaki er en af de mest almindelige former for fødevareintolerance (prævalens 1/200). Sygdommen opstår hos genetisk disponerede personer efter indtagelse af fødevarer, der indeholder gluten. Cøliakipatienter kan lide af alvorligt malabsorptionssyndrom, hovedsageligt karakteriseret ved diarré og vægttab. Den eneste terapeutiske tilgang, der i øjeblikket er anerkendt, er en livslang glutenfri diæt.
Specifikke områder af glutenmolekyle bliver genkendelige af lymfocytter og aktiverer dem på grund af ændringer foretaget af vævstransglutaminase. Disse ændringer består i omdannelsen af specifikke rester af glutamin til glutaminsyre. Konsekvensen er en øget bindingsaffinitet mellem gluten og histokompatibilitetsmolekyle (HLA-DQ2), lokaliseret på overfladen af de "antigenpræsenterende celler" (APC); eksponeringen af fragmenterne af modificeret gluten på overfladen af APC er et fænomen, der til sidst aktiverer T-lymfocytter.
Nylige undersøgelser af modificeret gluten bekræftede hypotesen om, at det er muligt at blokere præsentationen af gluten til lymfocytter ved hjælp af lysinethylester, der udelukkende binder til de glutenregioner, der er ansvarlige for lymfocytaktivering.
Den enzymatiske behandling udføres direkte på mel i stedet for ekstraheret gluten, hvilket bibeholder den samme anti-inflammatoriske effektivitet.
Proceduren bruger et enzym af fødevarekvalitet, den mikrobielle transglutaminase (mTGasi) isoleret fra Streptoverticillium mobarensis, der er i stand til at katalysere dannelsen af intermolekylære "tværbindinger", der modificerer produkternes funktionelle egenskaber.
Formålet med undersøgelsen er at validere evnen af enzymbehandling af hvedemel med mTGasi og lysinethylester til at blokere den toksiske virkning af gluten hos cøliakipatienter.
Studieoversigt
Status
Betingelser
Detaljeret beskrivelse
Cøliaki er en af de mest almindelige former for fødevareintolerance (prævalens 1/200). Sygdommen opstår hos genetisk disponerede personer efter indtagelse af fødevarer, der indeholder hvedegluten og lignende proteiner, der findes i andre almindelige kornsorter såsom byg og rug. Cøliakipatienter kan lide af alvorligt malabsorptionssyndrom, hovedsageligt karakteriseret ved diarré, vægttab og væksthæmning. Den eneste terapeutiske tilgang, der i øjeblikket er anerkendt, er en livslang glutenfri diæt.
Specifikke områder af glutenmolekyle bliver genkendelige af lymfocytter og aktiverer dem på grund af ændringer foretaget af vævstransglutaminase. Disse ændringer består i omdannelsen af specifikke rester af glutamin (Q) til glutaminsyre (E). Konsekvensen er en øget bindingsaffinitet mellem gluten og histokompatibilitetsmolekyle (HLA-DQ2), lokaliseret på overfladen af de "antigenpræsenterende celler" (APC); eksponeringen af fragmenterne af modificeret gluten på overfladen af APC er et fænomen, der til sidst aktiverer T-lymfocytter.
Nylige undersøgelser af modificeret gluten bekræftede hypotesen om, at det er muligt at blokere præsentationen af gluten til lymfocytter ved hjælp af lysinethylester, der udelukkende binder til de glutenregioner, der er ansvarlige for lymfocytaktivering.
Specifikt er det muligt at udføre den enzymatiske behandling direkte på mel i stedet for ekstraheret gluten, hvorved den samme anti-inflammatoriske effektivitet bevares. Den endelige procedure består i at opløse melet i vand i nærværelse af passende koncentrationer af enzym og lysinethylester, idet suspensionen holdes i konstant bevægelse i to timer ved stuetemperatur.
Proceduren bruger et enzym af fødevarekvalitet, den mikrobielle transglutaminase (mTGasi) isoleret fra Streptoverticillium mobarensis, som allerede anvendes til tilberedning af fødevarer. mTgasi er i stand til at katalysere dannelsen af intermolekylære "tværbindinger", der modificerer produkternes funktionelle egenskaber gennem aggregering og polymerisation af proteiner. Den ejendommelige metode identificeret af vores laboratorium reducerer muligheden for tværbindinger mellem proteiner: som følge heraf involverer minimale ændringer glutenstrukturen og følgelig dejens viskoelastiske egenskaber.
Formålet med undersøgelsen er at validere evnen af enzymbehandling af hvedemel med mTGasi og lysinethylester til at blokere den toksiske virkning af gluten hos cøliakipatienter.
Undersøgelsestype
Tilmelding (Forventet)
Fase
- Fase 2
Kontakter og lokationer
Studiesteder
-
-
-
Rome, Italien, 00186
- Rekruttering
- Sapienza University - Policlinico Umberto I
-
Kontakt:
- Antonio Picarelli, medicine
- Telefonnummer: +390649978370
- E-mail: antonio.picarelli@uniroma1.it
-
-
Deltagelseskriterier
Berettigelseskriterier
Aldre berettiget til at studere
Tager imod sunde frivillige
Køn, der er berettiget til at studere
Beskrivelse
Inklusionskriterier:
INKLUSIONSKRITERIER
- diagnose af cøliaki i henhold til ESPGHAN-kriterier: klasse III i henhold til Marsh-Oberhuber-klassificering, klar respons på glutenfri diæt, serologiske antiendomysium- og antitransglutaminase-antistoffer positive resultater før GFD;
- HLA DQ2-DQ8 positive resultater;
- glutenfri diæt fra mindst et år;
- negativ serologi fra mindst 1 år;
EXKLUSIONSKRITERIER
- inflammatoriske tarmsygdomme;
- tumorer;
- infektiøs leversygdom;
- nedsat nyrefunktion.
Studieplan
Hvordan er undersøgelsen tilrettelagt?
Design detaljer
- Primært formål: Behandling
- Tildeling: Randomiseret
- Interventionel model: Parallel tildeling
- Maskning: Tredobbelt
Våben og indgreb
Deltagergruppe / Arm |
Intervention / Behandling |
|---|---|
|
Eksperimentel: tvebakker lavet med behandlet mel
Glutenfri diæt tilsat tvebakker (100 g/dag) fremstillet med kommercielt hvedemel enzymatisk behandlet med mTGasi og lysinethylester.
|
100 g tvebakker fremstillet af kommercielt hvedemel enzymatisk behandlet med mTGasi og lysinethylester, hver dag i 3 måneder
glutenfri diæt
|
|
Aktiv komparator: tvebakker lavet med ubehandlet mel
Glutenfri diæt tilsat tvebakker (100g/dag) fremstillet med ubehandlet hvedemel.
|
glutenfri diæt
100 g tvebakker fremstillet af kommercielt hvedemel, IKKE enzymatisk behandlet med mTGasi og lysinethylester, hver dag i 3 måneder
|
Hvad måler undersøgelsen?
Primære resultatmål
Resultatmål |
Foranstaltningsbeskrivelse |
Tidsramme |
|---|---|---|
|
Ændring fra baseline i IgA anti-væv transglutaminase (anti-tTG) antistoffer efter 30 dage
Tidsramme: Efter 1 måned
|
Bevis for enhver positivisering af specifikke serologiske antistoffer mod cøliaki.
Resultater kvantificeret af en ELISA-læser ved 450 nm (A450 nm) er udtrykt i U/ml, og antistofniveauet 10 U/mL blev brugt som en cutoff-værdi til at identificere anti-tTG-positive resultater.
|
Efter 1 måned
|
|
Ændring fra baseline i IgA anti-væv transglutaminase (anti-tTG) antistoffer efter 60 dage
Tidsramme: Efter 2 måneder
|
Bevis for enhver positivisering af specifikke serologiske antistoffer mod cøliaki.
Resultater kvantificeret af en ELISA-læser ved 450 nm (A450 nm) er udtrykt i U/ml, og antistofniveauet 10 U/mL blev brugt som en cutoff-værdi til at identificere anti-tTG-positive resultater.
|
Efter 2 måneder
|
|
Ændring fra baseline i IgA anti-væv transglutaminase (anti-tTG) antistoffer efter 90 dage
Tidsramme: Efter 3 måneder
|
Bevis for enhver positivisering af specifikke serologiske antistoffer mod cøliaki.
Resultater kvantificeret af en ELISA-læser ved 450 nm (A450 nm) er udtrykt i U/ml, og antistofniveauet 10 U/mL blev brugt som en cutoff-værdi til at identificere anti-tTG-positive resultater.
|
Efter 3 måneder
|
|
Ændring fra baseline i IgA anti-endomysium antistoffer (EMA) efter 30 dage
Tidsramme: Efter 1 måned
|
Test brugt til at bekræfte serologisk aktivering af cøliaki.
IgA EMA blev undersøgt i sera fortyndet 1:5 ved indirekte immunfluorescensanalyse på kryostatudsnit af abe-esophagus.
Resultaterne er udtrykt som ''positive/negative''.
|
Efter 1 måned
|
|
Ændring fra baseline i IgA anti-endomysium antistoffer (EMA) efter 60 dage
Tidsramme: Efter 2 måneder
|
Test brugt til at bekræfte serologisk aktivering af cøliaki.
IgA EMA blev undersøgt i sera fortyndet 1:5 ved indirekte immunfluorescensanalyse på kryostatudsnit af abe-esophagus.
Resultaterne er udtrykt som ''positive/negative''.
|
Efter 2 måneder
|
|
Ændring fra baseline i IgA anti-endomysium antistoffer (EMA) efter 90 dage
Tidsramme: Efter 3 måneder
|
Test brugt til at bekræfte serologisk aktivering af cøliaki.
IgA EMA blev undersøgt i sera fortyndet 1:5 ved indirekte immunfluorescensanalyse på kryostatudsnit af abe-esophagus.
Resultaterne er udtrykt som ''positive/negative''.
|
Efter 3 måneder
|
|
Patologiske variationer i histologisk analyse fra baseline
Tidsramme: Efter 3 måneder, eller i tilfælde af serum anti-tTG IgA/EMA IgA positive resultater
|
Bevis for histologiske ændringer i duodenalslimhinden induceret af cøliaki, bestående af ændret (<3:1) forhold mellem villøs højde/kryptdybde og øgede (>25) intraepiteliale lymfocytter pr. 100 intestinale epitelceller, ifølge Marsh-Oberhuber klassifikation.
|
Efter 3 måneder, eller i tilfælde af serum anti-tTG IgA/EMA IgA positive resultater
|
Sekundære resultatmål
Resultatmål |
Foranstaltningsbeskrivelse |
Tidsramme |
|---|---|---|
|
Tilstedeværelse af oppustethed ved baseline
Tidsramme: Ved baseline
|
Evaluering af oppustethed intensitet rapporteres i henhold til Visual Analog eller Analog Scale (VAS), med et interval på 0-10.
|
Ved baseline
|
|
Tilstedeværelse af mavesmerter ved baseline
Tidsramme: Ved baseline
|
Evaluering af intensiteten af mavesmerter rapporteres i henhold til Visual Analog eller Analog Scale (VAS), med et interval på 0-10.
|
Ved baseline
|
|
Tilstedeværelse af diarré ved baseline
Tidsramme: Ved baseline
|
Evaluering af diarréintensitet rapporteres i henhold til den visuelle analoge eller analoge skala (VAS), med et interval på 0-10.
|
Ved baseline
|
|
Tilstedeværelse af asteni ved baseline
Tidsramme: Ved baseline
|
Evaluering af asteniintensitet rapporteres i henhold til Visual Analog eller Analog Scale (VAS), med et interval på 0-10.
|
Ved baseline
|
|
Variation af oppustethed fra baseline ved 30 dage
Tidsramme: Efter 1 måned
|
Evaluering af oppustethed intensitet rapporteres i henhold til Visual Analog eller Analog Scale (VAS), med et interval på 0-10.
|
Efter 1 måned
|
|
Variation af mavesmerter fra baseline ved 30 dage
Tidsramme: Efter 1 måned
|
Evaluering af intensiteten af mavesmerter rapporteres i henhold til Visual Analog eller Analog Scale (VAS), med et interval på 0-10.
|
Efter 1 måned
|
|
Variation af diarré fra baseline ved 30 dage
Tidsramme: Efter 1 måned
|
Evaluering af diarréintensitet rapporteres i henhold til den visuelle analoge eller analoge skala (VAS), med et interval på 0-10.
|
Efter 1 måned
|
|
Variation af asteni fra baseline ved 30 dage
Tidsramme: Efter 1 måned
|
Evaluering af asteniintensitet rapporteres i henhold til Visual Analog eller Analog Scale (VAS), med et interval på 0-10.
|
Efter 1 måned
|
|
Variation af oppustethed fra baseline ved 60 dage
Tidsramme: Efter 2 måneder
|
Evaluering af oppustethed intensitet rapporteres i henhold til Visual Analog eller Analog Scale (VAS), med et interval på 0-10.
|
Efter 2 måneder
|
|
Variation af mavesmerter fra baseline ved 60 dage
Tidsramme: Efter 2 måneder
|
Evaluering af intensiteten af mavesmerter rapporteres i henhold til Visual Analog eller Analog Scale (VAS), med et interval på 0-10.
|
Efter 2 måneder
|
|
Variation af diarré fra baseline ved 60 dage
Tidsramme: Efter 2 måneder
|
Evaluering af diarréintensitet rapporteres i henhold til den visuelle analoge eller analoge skala (VAS), med et interval på 0-10.
|
Efter 2 måneder
|
|
Variation af asteni fra baseline ved 60 dage
Tidsramme: Efter 2 måneder
|
Evaluering af asteniintensitet rapporteres i henhold til Visual Analog eller Analog Scale (VAS), med et interval på 0-10.
|
Efter 2 måneder
|
|
Variation af oppustethed fra baseline ved 90 dage
Tidsramme: Efter 3 måneder
|
Evaluering af oppustethed intensitet rapporteres i henhold til Visual Analog eller Analog Scale (VAS), med et interval på 0-10.
|
Efter 3 måneder
|
|
Variation af mavesmerter fra baseline ved 90 dage
Tidsramme: Efter 3 måneder
|
Evaluering af intensiteten af mavesmerter rapporteres i henhold til Visual Analog eller Analog Scale (VAS), med et interval på 0-10.
|
Efter 3 måneder
|
|
Variation af diarré fra baseline ved 90 dage
Tidsramme: Efter 3 måneder
|
Evaluering af diarréintensitet rapporteres i henhold til den visuelle analoge eller analoge skala (VAS), med et interval på 0-10.
|
Efter 3 måneder
|
|
Variation af asteni fra baseline ved 90 dage
Tidsramme: Efter 3 måneder
|
Evaluering af asteniintensitet rapporteres i henhold til Visual Analog eller Analog Scale (VAS), med et interval på 0-10.
|
Efter 3 måneder
|
Samarbejdspartnere og efterforskere
Sponsor
Publikationer og nyttige links
Generelle publikationer
- Catassi C, Fabiani E, Iacono G, D'Agate C, Francavilla R, Biagi F, Volta U, Accomando S, Picarelli A, De Vitis I, Pianelli G, Gesuita R, Carle F, Mandolesi A, Bearzi I, Fasano A. A prospective, double-blind, placebo-controlled trial to establish a safe gluten threshold for patients with celiac disease. Am J Clin Nutr. 2007 Jan;85(1):160-6. doi: 10.1093/ajcn/85.1.160.
- Branski D, Fasano A, Troncone R. Latest developments in the pathogenesis and treatment of celiac disease. J Pediatr. 2006 Sep;149(3):295-300. doi: 10.1016/j.jpeds.2006.06.003. No abstract available.
- Nilsen EM, Jahnsen FL, Lundin KE, Johansen FE, Fausa O, Sollid LM, Jahnsen J, Scott H, Brandtzaeg P. Gluten induces an intestinal cytokine response strongly dominated by interferon gamma in patients with celiac disease. Gastroenterology. 1998 Sep;115(3):551-63. doi: 10.1016/s0016-5085(98)70134-9.
- Molberg O, Mcadam SN, Korner R, Quarsten H, Kristiansen C, Madsen L, Fugger L, Scott H, Noren O, Roepstorff P, Lundin KE, Sjostrom H, Sollid LM. Tissue transglutaminase selectively modifies gliadin peptides that are recognized by gut-derived T cells in celiac disease. Nat Med. 1998 Jun;4(6):713-7. doi: 10.1038/nm0698-713. Erratum In: Nat Med 1998 Aug;4(8):974.
- Gianfrani C, Siciliano RA, Facchiano AM, Camarca A, Mazzeo MF, Costantini S, Salvati VM, Maurano F, Mazzarella G, Iaquinto G, Bergamo P, Rossi M. Transamidation of wheat flour inhibits the response to gliadin of intestinal T cells in celiac disease. Gastroenterology. 2007 Sep;133(3):780-9. doi: 10.1053/j.gastro.2007.06.023. Epub 2007 Jun 20.
- Yokoyama K, Nio N, Kikuchi Y. Properties and applications of microbial transglutaminase. Appl Microbiol Biotechnol. 2004 May;64(4):447-54. doi: 10.1007/s00253-003-1539-5. Epub 2004 Jan 22.
- Fink ML, Chung SI, Folk JE. gamma-Glutamylamine cyclotransferase: specificity toward epsilon-(L-gamma-glutamyl)-L-lysine and related compounds. Proc Natl Acad Sci U S A. 1980 Aug;77(8):4564-8. doi: 10.1073/pnas.77.8.4564.
- Picarelli A, Di Tola M, Sabbatella L, Anania MC, Calabro A, Renzi D, Bai JC, Sugai E, Carroccio A, Di Prima L, Bardella MT, Barisani D, Ribes-Koninckx C, Aliaga ED, Gasparin M, Bravi E; Multicentre Organ Culture System Study Group. Usefulness of the organ culture system in the in vitro diagnosis of coeliac disease: a multicentre study. Scand J Gastroenterol. 2006 Feb;41(2):186-90. doi: 10.1080/00365520510024151.
- Picarelli A, Maiuri L, Frate A, Greco M, Auricchio S, Londei M. Production of antiendomysial antibodies after in-vitro gliadin challenge of small intestine biopsy samples from patients with coeliac disease. Lancet. 1996 Oct 19;348(9034):1065-7. doi: 10.1016/S0140-6736(96)03060-7.
- Marino M, Casale R, Borghini R, Di Nardi S, Donato G, Angeloni A, Moscaritolo S, Grasso L, Mazzarella G, Di Tola M, Rossi M, Picarelli A. The effects of modified versus unmodified wheat gluten administration in patients with celiac disease. Int Immunopharmacol. 2017 Jun;47:1-8. doi: 10.1016/j.intimp.2017.03.012. Epub 2017 Mar 23.
Datoer for undersøgelser
Studer store datoer
Studiestart
Primær færdiggørelse (Forventet)
Studieafslutning (Forventet)
Datoer for studieregistrering
Først indsendt
Først indsendt, der opfyldte QC-kriterier
Først opslået (Skøn)
Opdateringer af undersøgelsesjournaler
Sidste opdatering sendt (Skøn)
Sidste opdatering indsendt, der opfyldte kvalitetskontrolkriterier
Sidst verificeret
Mere information
Begreber relateret til denne undersøgelse
Nøgleord
Yderligere relevante MeSH-vilkår
Andre undersøgelses-id-numre
- 672/10 Rif. 1907 / 22.07.2010
Disse oplysninger blev hentet direkte fra webstedet clinicaltrials.gov uden ændringer. Hvis du har nogen anmodninger om at ændre, fjerne eller opdatere dine undersøgelsesoplysninger, bedes du kontakte register@clinicaltrials.gov. Så snart en ændring er implementeret på clinicaltrials.gov, vil denne også blive opdateret automatisk på vores hjemmeside .