Leczenie mąki pszennej transglutaminazą drobnoustrojową i estrem etylowym lizyny: nowe granice w leczeniu celiakii. (WHETMIT)
Mąka pszenna poddana obróbce enzymatycznej transglutaminazą drobnoustrojów w obecności estru etylowego lizyny do stosowania w żywności w leczeniu celiakii.
Celiakia jest jedną z najczęstszych form nietolerancji pokarmowych (częstość występowania 1/200). Choroba występuje u osób predysponowanych genetycznie po spożyciu pokarmów zawierających gluten. Pacjenci z celiakią mogą cierpieć na ciężki zespół złego wchłaniania, charakteryzujący się głównie biegunką i utratą masy ciała. Jedynym obecnie uznanym podejściem terapeutycznym jest dieta bezglutenowa stosowana przez całe życie.
Określone regiony cząsteczki glutenu stają się rozpoznawalne przez limfocyty i aktywują je w wyniku zmian dokonywanych przez transglutaminazę tkankową. Zmiany te polegają na przemianie określonych reszt glutaminy w kwas glutaminowy. Konsekwencją jest zwiększone powinowactwo wiązania między glutenem a cząsteczką zgodności tkankowej (HLA-DQ2), zlokalizowaną na powierzchni „komórek prezentujących antygen” (APC); ekspozycja fragmentów modyfikowanego glutenu na powierzchnię APC jest zjawiskiem ostatecznie aktywującym limfocyty T.
Ostatnie badania nad glutenem modyfikowanym potwierdziły hipotezę, że możliwe jest zablokowanie prezentacji glutenu limfocytom za pomocą wiązania estru etylowego lizyny wyłącznie z regionami glutenu odpowiedzialnymi za aktywację limfocytów.
Obróbkę enzymatyczną przeprowadza się bezpośrednio na mące zamiast ekstrahowanego glutenu, zachowując tę samą skuteczność przeciwzapalną.
Procedura wykorzystuje enzym spożywczy, transglutaminazę drobnoustrojową (mTGasi) wyizolowaną ze Streptoverticillium mobarensis, zdolną do katalizowania tworzenia międzycząsteczkowych „powiązań poprzecznych”, które modyfikują właściwości funkcjonalne produktów.
Celem pracy jest sprawdzenie zdolności enzymatycznej obróbki mąki pszennej za pomocą mTGasi i estru etylowego lizyny do blokowania toksycznego działania glutenu u pacjentów z celiakią.
Przegląd badań
Status
Warunki
Szczegółowy opis
Celiakia jest jedną z najczęstszych form nietolerancji pokarmowych (częstość występowania 1/200). Choroba występuje u osób predysponowanych genetycznie po spożyciu pokarmów zawierających gluten pszenny i podobne białka występujące w innych pospolitych zbożach, takich jak jęczmień i żyto. Pacjenci z celiakią mogą cierpieć na ciężki zespół złego wchłaniania, charakteryzujący się głównie biegunką, utratą masy ciała i opóźnieniem wzrostu. Jedynym obecnie uznanym podejściem terapeutycznym jest dieta bezglutenowa stosowana przez całe życie.
Określone regiony cząsteczki glutenu stają się rozpoznawalne przez limfocyty i aktywują je w wyniku zmian dokonywanych przez transglutaminazę tkankową. Przemiany te polegają na przemianie określonych reszt glutaminy (Q) w kwas glutaminowy (E). Konsekwencją jest zwiększone powinowactwo wiązania między glutenem a cząsteczką zgodności tkankowej (HLA-DQ2), zlokalizowaną na powierzchni „komórek prezentujących antygen” (APC); ekspozycja fragmentów modyfikowanego glutenu na powierzchnię APC jest zjawiskiem ostatecznie aktywującym limfocyty T.
Ostatnie badania nad glutenem modyfikowanym potwierdziły hipotezę, że możliwe jest zablokowanie prezentacji glutenu limfocytom za pomocą wiązania estru etylowego lizyny wyłącznie z regionami glutenu odpowiedzialnymi za aktywację limfocytów.
W szczególności możliwe jest przeprowadzenie obróbki enzymatycznej bezpośrednio na mące zamiast ekstrahowanego glutenu, przy zachowaniu tej samej skuteczności przeciwzapalnej. Ostatnia procedura polega na rozpuszczeniu mąki w wodzie w obecności odpowiednich stężeń enzymu i estru etylowego lizyny, utrzymując zawiesinę w ciągłym ruchu przez dwie godziny w temperaturze pokojowej.
Procedura wykorzystuje enzym spożywczy, mikrobiologiczną transglutaminazę (mTGasi) wyizolowaną ze Streptoverticillium mobarensis, która jest już używana do przygotowywania żywności. mTgasi jest w stanie katalizować tworzenie międzycząsteczkowych „sieciowań” modyfikujących właściwości funkcjonalne produktów poprzez agregację i polimeryzację białek. Zidentyfikowana przez nasze laboratorium specyficzna metoda ogranicza możliwość powstawania wiązań krzyżowych między białkami: w konsekwencji minimalne zmiany dotyczą struktury glutenu, a co za tym idzie właściwości lepkosprężystych ciasta.
Celem pracy jest sprawdzenie zdolności enzymatycznej obróbki mąki pszennej za pomocą mTGasi i estru etylowego lizyny do blokowania toksycznego działania glutenu u pacjentów z celiakią.
Typ studiów
Zapisy (Oczekiwany)
Faza
- Faza 2
Kontakty i lokalizacje
Lokalizacje studiów
-
-
-
Rome, Włochy, 00186
- Rekrutacyjny
- Sapienza University - Policlinico Umberto I
-
Kontakt:
- Antonio Picarelli, medicine
- Numer telefonu: +390649978370
- E-mail: antonio.picarelli@uniroma1.it
-
-
Kryteria uczestnictwa
Kryteria kwalifikacji
Wiek uprawniający do nauki
Akceptuje zdrowych ochotników
Płeć kwalifikująca się do nauki
Opis
Kryteria przyjęcia:
KRYTERIA PRZYJĘCIA
- rozpoznanie celiakii wg kryteriów ESPGHAN: klasa III wg klasyfikacji Marsha-Oberhubera, wyraźna odpowiedź na dietę bezglutenową, dodatnie wyniki serologiczne przeciw endomysium i antytransglutaminazie przed GFD;
- HLA DQ2-DQ8 pozytywne wyniki;
- dieta bezglutenowa od co najmniej roku;
- ujemna serologia od co najmniej 1 roku;
KRYTERIA WYŁĄCZENIA
- choroby zapalne jelit;
- guzy;
- zakaźna choroba wątroby;
- zaburzenia czynności nerek.
Plan studiów
Jak projektuje się badanie?
Szczegóły projektu
- Główny cel: Leczenie
- Przydział: Randomizowane
- Model interwencyjny: Przydział równoległy
- Maskowanie: Potroić
Broń i interwencje
Grupa uczestników / Arm |
Interwencja / Leczenie |
|---|---|
|
Eksperymentalny: suchary z przetworzonej mąki
Dieta bezglutenowa dodająca sucharki (100g/dzień) wyprodukowana z komercyjnej mąki pszennej poddanej obróbce enzymatycznej mTGasi i estrem etylowym lizyny.
|
100 g sucharów uzyskanych z handlowej mąki pszennej poddanej obróbce enzymatycznej mTGasi i estrem etylowym lizyny, codziennie przez 3 miesiące
dieta bezglutenowa
|
|
Aktywny komparator: suchary z mąki nieprzetworzonej
Dieta bezglutenowa dodająca suchary (100g/dzień) wyprodukowane z nieprzetworzonej mąki pszennej.
|
dieta bezglutenowa
100 g sucharów uzyskanych z komercyjnej mąki pszennej NIE poddanej obróbce enzymatycznej mTGasi i estrem etylowym lizyny, codziennie przez 3 miesiące
|
Co mierzy badanie?
Podstawowe miary wyniku
Miara wyniku |
Opis środka |
Ramy czasowe |
|---|---|---|
|
Zmiana w stosunku do wartości początkowej przeciwciał IgA przeciw transglutaminazie tkankowej (anty-tTG) po 30 dniach
Ramy czasowe: Po 1 miesiącu
|
Dowód jakiejkolwiek pozytywizacji specyficznych przeciwciał serologicznych dla celiakii.
Wyniki określone ilościowo za pomocą czytnika ELISA przy 450 nm (A450nm) wyrażono w U/ml, a poziom przeciwciał 10 U/ml zastosowano jako wartość odcięcia do identyfikacji wyników dodatnich anty-tTG.
|
Po 1 miesiącu
|
|
Zmiana w stosunku do wartości początkowej przeciwciał IgA przeciw transglutaminazie tkankowej (anty-tTG) po 60 dniach
Ramy czasowe: Po 2 miesiącach
|
Dowód jakiejkolwiek pozytywizacji specyficznych przeciwciał serologicznych dla celiakii.
Wyniki określone ilościowo za pomocą czytnika ELISA przy 450 nm (A450nm) wyrażono w U/ml, a poziom przeciwciał 10 U/ml zastosowano jako wartość odcięcia do identyfikacji wyników dodatnich anty-tTG.
|
Po 2 miesiącach
|
|
Zmiana w stosunku do wartości początkowej przeciwciał IgA przeciw transglutaminazie tkankowej (anty-tTG) po 90 dniach
Ramy czasowe: Po 3 miesiącach
|
Dowód jakiejkolwiek pozytywizacji specyficznych przeciwciał serologicznych dla celiakii.
Wyniki określone ilościowo za pomocą czytnika ELISA przy 450 nm (A450nm) wyrażono w U/ml, a poziom przeciwciał 10 U/ml zastosowano jako wartość odcięcia do identyfikacji wyników dodatnich anty-tTG.
|
Po 3 miesiącach
|
|
Zmiana w stosunku do wartości wyjściowych przeciwciał IgA przeciw endomysium (EMA) po 30 dniach
Ramy czasowe: Po 1 miesiącu
|
Test służący do potwierdzenia aktywacji serologicznej celiakii.
IgA EMA przeszukiwano w surowicach rozcieńczonych 1:5 za pomocą pośredniej analizy immunofluorescencyjnej na kriostatycznych skrawkach przełyku małpy.
Wyniki są wyrażone jako „pozytywne/negatywne”.
|
Po 1 miesiącu
|
|
Zmiana w stosunku do wartości wyjściowych przeciwciał IgA przeciw endomysium (EMA) po 60 dniach
Ramy czasowe: Po 2 miesiącach
|
Test służący do potwierdzenia aktywacji serologicznej celiakii.
IgA EMA przeszukiwano w surowicach rozcieńczonych 1:5 za pomocą pośredniej analizy immunofluorescencyjnej na kriostatycznych skrawkach przełyku małpy.
Wyniki są wyrażone jako „pozytywne/negatywne”.
|
Po 2 miesiącach
|
|
Zmiana w stosunku do wartości wyjściowych przeciwciał IgA przeciw endomysium (EMA) po 90 dniach
Ramy czasowe: Po 3 miesiącach
|
Test służący do potwierdzenia aktywacji serologicznej celiakii.
IgA EMA przeszukiwano w surowicach rozcieńczonych 1:5 za pomocą pośredniej analizy immunofluorescencyjnej na kriostatycznych skrawkach przełyku małpy.
Wyniki są wyrażone jako „pozytywne/negatywne”.
|
Po 3 miesiącach
|
|
Zmiany patologiczne w analizie histologicznej od linii podstawowej
Ramy czasowe: Po 3 miesiącach lub w przypadku dodatnich wyników anty-tTG IgA/EMA IgA w surowicy
|
Dowód zmian histologicznych błony śluzowej dwunastnicy wywołanych przez celiakię, polegający na zmianie (<3:1) stosunku wysokości kosmków do głębokości krypt i zwiększeniu (>25) limfocytów śródnabłonkowych na 100 komórek nabłonka jelitowego, zgodnie z klasyfikacją Marsha-Oberhubera.
|
Po 3 miesiącach lub w przypadku dodatnich wyników anty-tTG IgA/EMA IgA w surowicy
|
Miary wyników drugorzędnych
Miara wyniku |
Opis środka |
Ramy czasowe |
|---|---|---|
|
Obecność wzdęć na początku badania
Ramy czasowe: Na linii bazowej
|
Ocenę intensywności wzdęć podaje się według Wizualnej Skali Analogowej lub Skali Analogowej (VAS), w zakresie 0-10.
|
Na linii bazowej
|
|
Obecność bólu brzucha na początku badania
Ramy czasowe: Na linii bazowej
|
Ocenę nasilenia bólu brzucha podaje się za pomocą Wizualnej Skali Analogowej lub Skali Analogowej (VAS), w zakresie 0-10.
|
Na linii bazowej
|
|
Obecność biegunki na początku badania
Ramy czasowe: Na linii bazowej
|
Ocenę nasilenia biegunki podaje się według Wizualnej Skali Analogowej lub Skali Analogowej (VAS), w zakresie 0-10.
|
Na linii bazowej
|
|
Obecność osłabienia na początku badania
Ramy czasowe: Na linii bazowej
|
Ocenę nasilenia astenii podaje się według Wizualnej Skali Analogowej lub Skali Analogowej (VAS), w zakresie 0-10.
|
Na linii bazowej
|
|
Zmiana wzdęcia od wartości wyjściowej po 30 dniach
Ramy czasowe: Po 1 miesiącu
|
Ocenę intensywności wzdęć podaje się według Wizualnej Skali Analogowej lub Skali Analogowej (VAS), w zakresie 0-10.
|
Po 1 miesiącu
|
|
Zmiana bólu brzucha od wartości wyjściowej po 30 dniach
Ramy czasowe: Po 1 miesiącu
|
Ocenę nasilenia bólu brzucha podaje się za pomocą Wizualnej Skali Analogowej lub Skali Analogowej (VAS), w zakresie 0-10.
|
Po 1 miesiącu
|
|
Zmiana biegunki od wartości wyjściowej po 30 dniach
Ramy czasowe: Po 1 miesiącu
|
Ocenę nasilenia biegunki podaje się według Wizualnej Skali Analogowej lub Skali Analogowej (VAS), w zakresie 0-10.
|
Po 1 miesiącu
|
|
Zmiana astenii od wartości wyjściowej po 30 dniach
Ramy czasowe: Po 1 miesiącu
|
Ocenę nasilenia astenii podaje się według Wizualnej Skali Analogowej lub Skali Analogowej (VAS), w zakresie 0-10.
|
Po 1 miesiącu
|
|
Zmiana wzdęcia od wartości wyjściowej po 60 dniach
Ramy czasowe: Po 2 miesiącach
|
Ocenę intensywności wzdęć podaje się według Wizualnej Skali Analogowej lub Skali Analogowej (VAS), w zakresie 0-10.
|
Po 2 miesiącach
|
|
Zmiana bólu brzucha od wartości wyjściowej po 60 dniach
Ramy czasowe: Po 2 miesiącach
|
Ocenę nasilenia bólu brzucha podaje się za pomocą Wizualnej Skali Analogowej lub Skali Analogowej (VAS), w zakresie 0-10.
|
Po 2 miesiącach
|
|
Zmiana biegunki od wartości wyjściowej po 60 dniach
Ramy czasowe: Po 2 miesiącach
|
Ocenę nasilenia biegunki podaje się według Wizualnej Skali Analogowej lub Skali Analogowej (VAS), w zakresie 0-10.
|
Po 2 miesiącach
|
|
Odmiana osłabienia od wartości wyjściowej po 60 dniach
Ramy czasowe: Po 2 miesiącach
|
Ocenę nasilenia astenii podaje się według Wizualnej Skali Analogowej lub Skali Analogowej (VAS), w zakresie 0-10.
|
Po 2 miesiącach
|
|
Zmiana wzdęcia od wartości wyjściowej po 90 dniach
Ramy czasowe: Po 3 miesiącach
|
Ocenę intensywności wzdęć podaje się według Wizualnej Skali Analogowej lub Skali Analogowej (VAS), w zakresie 0-10.
|
Po 3 miesiącach
|
|
Zmiana bólu brzucha od wartości wyjściowej po 90 dniach
Ramy czasowe: Po 3 miesiącach
|
Ocenę nasilenia bólu brzucha podaje się za pomocą Wizualnej Skali Analogowej lub Skali Analogowej (VAS), w zakresie 0-10.
|
Po 3 miesiącach
|
|
Zmiana biegunki od wartości wyjściowej po 90 dniach
Ramy czasowe: Po 3 miesiącach
|
Ocenę nasilenia biegunki podaje się według Wizualnej Skali Analogowej lub Skali Analogowej (VAS), w zakresie 0-10.
|
Po 3 miesiącach
|
|
Odmiana osłabienia od wartości wyjściowej po 90 dniach
Ramy czasowe: Po 3 miesiącach
|
Ocenę nasilenia astenii podaje się według Wizualnej Skali Analogowej lub Skali Analogowej (VAS), w zakresie 0-10.
|
Po 3 miesiącach
|
Współpracownicy i badacze
Sponsor
Publikacje i pomocne linki
Publikacje ogólne
- Catassi C, Fabiani E, Iacono G, D'Agate C, Francavilla R, Biagi F, Volta U, Accomando S, Picarelli A, De Vitis I, Pianelli G, Gesuita R, Carle F, Mandolesi A, Bearzi I, Fasano A. A prospective, double-blind, placebo-controlled trial to establish a safe gluten threshold for patients with celiac disease. Am J Clin Nutr. 2007 Jan;85(1):160-6. doi: 10.1093/ajcn/85.1.160.
- Branski D, Fasano A, Troncone R. Latest developments in the pathogenesis and treatment of celiac disease. J Pediatr. 2006 Sep;149(3):295-300. doi: 10.1016/j.jpeds.2006.06.003. No abstract available.
- Nilsen EM, Jahnsen FL, Lundin KE, Johansen FE, Fausa O, Sollid LM, Jahnsen J, Scott H, Brandtzaeg P. Gluten induces an intestinal cytokine response strongly dominated by interferon gamma in patients with celiac disease. Gastroenterology. 1998 Sep;115(3):551-63. doi: 10.1016/s0016-5085(98)70134-9.
- Molberg O, Mcadam SN, Korner R, Quarsten H, Kristiansen C, Madsen L, Fugger L, Scott H, Noren O, Roepstorff P, Lundin KE, Sjostrom H, Sollid LM. Tissue transglutaminase selectively modifies gliadin peptides that are recognized by gut-derived T cells in celiac disease. Nat Med. 1998 Jun;4(6):713-7. doi: 10.1038/nm0698-713. Erratum In: Nat Med 1998 Aug;4(8):974.
- Gianfrani C, Siciliano RA, Facchiano AM, Camarca A, Mazzeo MF, Costantini S, Salvati VM, Maurano F, Mazzarella G, Iaquinto G, Bergamo P, Rossi M. Transamidation of wheat flour inhibits the response to gliadin of intestinal T cells in celiac disease. Gastroenterology. 2007 Sep;133(3):780-9. doi: 10.1053/j.gastro.2007.06.023. Epub 2007 Jun 20.
- Yokoyama K, Nio N, Kikuchi Y. Properties and applications of microbial transglutaminase. Appl Microbiol Biotechnol. 2004 May;64(4):447-54. doi: 10.1007/s00253-003-1539-5. Epub 2004 Jan 22.
- Fink ML, Chung SI, Folk JE. gamma-Glutamylamine cyclotransferase: specificity toward epsilon-(L-gamma-glutamyl)-L-lysine and related compounds. Proc Natl Acad Sci U S A. 1980 Aug;77(8):4564-8. doi: 10.1073/pnas.77.8.4564.
- Picarelli A, Di Tola M, Sabbatella L, Anania MC, Calabro A, Renzi D, Bai JC, Sugai E, Carroccio A, Di Prima L, Bardella MT, Barisani D, Ribes-Koninckx C, Aliaga ED, Gasparin M, Bravi E; Multicentre Organ Culture System Study Group. Usefulness of the organ culture system in the in vitro diagnosis of coeliac disease: a multicentre study. Scand J Gastroenterol. 2006 Feb;41(2):186-90. doi: 10.1080/00365520510024151.
- Picarelli A, Maiuri L, Frate A, Greco M, Auricchio S, Londei M. Production of antiendomysial antibodies after in-vitro gliadin challenge of small intestine biopsy samples from patients with coeliac disease. Lancet. 1996 Oct 19;348(9034):1065-7. doi: 10.1016/S0140-6736(96)03060-7.
- Marino M, Casale R, Borghini R, Di Nardi S, Donato G, Angeloni A, Moscaritolo S, Grasso L, Mazzarella G, Di Tola M, Rossi M, Picarelli A. The effects of modified versus unmodified wheat gluten administration in patients with celiac disease. Int Immunopharmacol. 2017 Jun;47:1-8. doi: 10.1016/j.intimp.2017.03.012. Epub 2017 Mar 23.
Daty zapisu na studia
Główne daty studiów
Rozpoczęcie studiów
Zakończenie podstawowe (Oczekiwany)
Ukończenie studiów (Oczekiwany)
Daty rejestracji na studia
Pierwszy przesłany
Pierwszy przesłany, który spełnia kryteria kontroli jakości
Pierwszy wysłany (Oszacować)
Aktualizacje rekordów badań
Ostatnia wysłana aktualizacja (Oszacować)
Ostatnia przesłana aktualizacja, która spełniała kryteria kontroli jakości
Ostatnia weryfikacja
Więcej informacji
Terminy związane z tym badaniem
Słowa kluczowe
Dodatkowe istotne warunki MeSH
Inne numery identyfikacyjne badania
- 672/10 Rif. 1907 / 22.07.2010
Te informacje zostały pobrane bezpośrednio ze strony internetowej clinicaltrials.gov bez żadnych zmian. Jeśli chcesz zmienić, usunąć lub zaktualizować dane swojego badania, skontaktuj się z register@clinicaltrials.gov. Gdy tylko zmiana zostanie wprowadzona na stronie clinicaltrials.gov, zostanie ona automatycznie zaktualizowana również na naszej stronie internetowej .
Badania kliniczne na Nietolerancja glutenu
-
Bambino Gesù Hospital and Research InstituteZakończonyCiężka otyłość dziecięca (BMI > 97° szt. -według wykresów BMI Centers for Disease Control and Prevention-) | Zmienione testy czynnościowe wątroby | Nietolerancja glikemicznaWłochy
-
Spero TherapeuticsZakończonyKompleks Mycobacterium Avium | Niegruźlicze Mycobacterium Pulmonary DiseaseStany Zjednoczone
-
Janssen Pharmaceutical K.K.RekrutacyjnyOporna na leczenie Mycobacterium Avium Complex-lung Disease (MAC-LD)Tajwan, Republika Korei, Japonia
-
Adelphi Values LLCBlueprint Medicines CorporationZakończonyBiałaczka z komórek tucznych (MCL) | Agresywna mastocytoza układowa (ASM) | SM w Assoc Clonal Hema Lineage Non-mast Cell Lineage Disease (SM-AHNMD) | Tląca się mastocytoza układowa (SSM) | Indolentna układowa mastocytoza (ISM) Podgrupa ISM w pełni zatrudnionaStany Zjednoczone