Zelený čaj zmírňuje snížení tlaku vyvolané fyzickým cvičením

Subjekty studie: Dvojitě zaslepená studie, randomizovaná a placebo, prováděná s patnácti hypertoniky obou pohlaví, fyzicky aktivními a praktikujícími cvičení po dobu nejméně 3 měsíců před studiemi. Všichni pacienti užívali antihypertenzní medikaci kromě beta-blokátorů a udržovali si medikaci po celou dobu studie. Bylo po nich požadováno, aby nebyly diabetik a ženy neměly menopauzu. Výzkum byl schválen Etickou komisí pro výzkum s lidskými bytostmi Centra zdravotních věd na Federální univerzitě v Paraiba-CEP/CCS podle protokolu 0120/13. Jednotlivci byli povinni podepsat The Free and Clarified Consent Term (FCCT) podle rezoluce 196/96 National Health Council.

Návrhy studie: subjekty prováděly tři experimentální procedury, dvě cvičily aerobní cvičení a jedno bez fyzických cvičení. Cvičení byla prováděna za předchozího podávání zeleného čaje nebo placeba (GT+Ex nebo PL+Ex), požitých 30 minut před začátkem cvičebního protokolu. V sezení bez cvičení (GT) požili zelený čaj a zůstali sedět během stejné doby určené ke cvičení. Měření srdeční frekvence bylo registrováno v klidu (RHR) a každých deset minut během protokolu fyzického cvičení. Měření TK bylo prováděno před (v klidu), bezprostředně po cvičení a každých deset minut během zotavovacího období 60 minut po ukončení cvičebního protokolu nebo v době, kdy zůstali sedět. Vzorky krve byly odebrány před a bezprostředně po cvičení nebo období bez cvičení pro analýzu plazmatické koncentrace anti- a prooxidačních činidel (nitrit-NO a malondialdehyd-MDA).

Nástroje a postupy: Fyzická cvičení: Poté, co byly jednotlivcům objasněny účely výzkumu, byli pozváni, aby pokračovali do laboratoře za účelem provedení cvičení. Skupiny byly podrobeny třem sezením, z toho dvěma aerobním cvičením na běžeckém pásu po dobu 60 minut. Dále bylo stanoveno, že jednotlivci by měli cvičit cviky s bodováním mezi 11 a 14 v Borgově a Nobleově subjektivní stupnici vnímané námahy. Byli požádáni, aby udrželi intenzitu fyzických cvičení od 60 % do 85 % HRmax (maximální srdeční frekvence), monitorovanou během sezení pomocí frekvenčního měřiče Polar model RS800CX (Polar ElectroOy, Kempele, Finsko).

Suplementace zeleného čaje nebo placeba: Zelený čaj a placebo kapsle byly vyrobeny v laboratoři. Výzkumníci použili 2 g sušených listů zeleného čaje a objevili zlepšení oxidačního stresu. Skupina konzumující zelený čaj požívala kapsle s 2 g koncentrovaného prášku, přibližně 1960 mg v polyfenolech (636 mg epigalokatechin galátu) a 20 mg kofeinu; placebo skupina konzumovala tobolky obsahující 2 g prášku z kukuřičného škrobu, všechny spolkla s vodou. Kapsle byly podávány pacientům poté, co zkušený odborník odebral vzorky krve. Vědci provedli suplementaci látek po odběru krve před cvičením a sezeních zahájených pouze 30 minut po požití kapslí, což je doba, kterou tělo potřebuje k vstřebání živin.

Měření krevního tlaku: Jednotlivcům byl předem zkontrolován krevní tlak, bezprostředně po skončení cvičení a během 60 minut po cvičení. TK v klidu byl ověřen poté, co subjekty zůstaly sedět 10 minut. Na konci chůze byl TK zkontrolován u sedících subjektů. Během zotavování byl TK ověřován každých 10 minut během všech 60 minut chůze. Přijatý protokol byl ten, který navrhla Brazilská kardiologická společnost a Brazilská společnost pro hypertenzi.

Protokol o odběru krve: Provádí se před a bezprostředně po cvičení. Z antekubitální žíly bylo odebráno deset mililitrů (ml) krve, z nichž pět ml bylo umístěno do zkumavek obsahujících EDTA a pečlivě homogenizováno převrácením. Dalších pět ml bylo umístěno do zkumavek bez jakéhokoli antikoagulantu. Poté byly centrifugovány při 1500 otáčkách za minutu po dobu 20 minut. Plazma byla izolována, umístěna do ependorfových zkumavek a chlazena při 20 °C až do analýzy.

Hodnocení oxidačního stresu (MDA): Oxidační aktivita byla kvantifikována reakcí kyseliny thiobarbiturové s produkty rozkladu hydroperoxidů. Proto bylo 250 ul vzorku přidáno do KCl a inkubováno ve vodní lázni udržované při 37 °C po dobu 60 minut. Poté byla směs precipitována 35% AA chloristou a centrifugována při 14 000 ot./min a 4 °C po dobu 10 minut. Supernatant byl přenesen do nových ependorfových nádob, přidáním 400 ul 0,6% kyseliny thiobarbiturové a inkubován při 95-100 °C po dobu 30 minut. Po ochlazení byl materiál odečten spektrofotometrem při vlnové délce 532 nm.

Dávkování dusitanů Metoda byla založena na použití Griessova činidla. Činidlo bylo připraveno za použití stejných dílů 5% kyseliny fosforečné, 0,1% N-1-naftalendiaminu (NEED), 1% sulfanilamidu, 5% v kyselině fosforečné a destilované vody. K provedení testu bylo 100 ul 10% supernatantu homogenátu připraveného s pufrem fosforečnanu draselného přidáno ke 100 ul Griessova činidla. Pokud jde o bílou, 100 ul činidla bylo přidáno do 100 ul pufru a byly provedeny série ředění, aby se získala standardní křivka (100, 50, 25 12,5, 6,25, 3,12, 1,56 um) dusitanu. Celý test byl proveden na 96jamkové destičce se čtečkou v rozsahu absorbance 560 nm.

Proces analýzy dat: Nejprve byla testována všechna data týkající se jejich normality a variability ve směrodatné chybě. Následně byly aplikovány jednocestné testy ANOVA za účelem srovnání bazálních podmínek do tří dnů od zahájení řízení. Během analýzy byl použit software Instat 3.0 (GraphPAdInstat, San Diego, CA, USA).