Zielona herbata łagodzi redukcję ciśnienia wywołaną sesją ćwiczeń fizycznych

Przedmioty badań: Badanie z podwójnie ślepą próbą, randomizowane i placebo, przeprowadzone z piętnastoma osobami obu płci z nadciśnieniem tętniczym, aktywnymi fizycznie i ćwiczącymi przez co najmniej 3 miesiące przed próbami. Wszyscy pacjenci przyjmowali leki przeciwnadciśnieniowe z wyjątkiem beta-blokerów i przyjmowali leki podtrzymujące przez cały okres badania. Żądano, aby nie chorowały na cukrzycę, a kobiety nie przechodziły menopauzy. Badanie zostało zatwierdzone przez Komisję Etyki ds. Badań na Ludziach Centrum Nauk o Zdrowiu na Uniwersytecie Federalnym w Paraiba – CEP/CCS, zgodnie z protokołem 0120/13. Zgodnie z uchwałą 196/96 Narodowej Rady Zdrowia, osoby fizyczne były zobowiązane do podpisania The Free and Clarified Consent Term (FCCT).

Projekty badań: badani wykonali trzy eksperymentalne procedury, dwie z ćwiczeniami aerobowymi i jedną bez ćwiczeń fizycznych. Sesje z ćwiczeniami odbywały się przy uprzednim podaniu dawki zielonej herbaty lub placebo (GT+Ex lub PL+Ex), spożytego na 30 minut przed rozpoczęciem protokołu ćwiczeń. W sesji bez ćwiczeń (GT) pili zieloną herbatę i pozostawali w pozycji siedzącej przez czas przeznaczony na ćwiczenia. Pomiary tętna rejestrowano w spoczynku (RHR) oraz co dziesięć minut podczas protokołu ćwiczeń fizycznych. Pomiary BP wykonywano przed (w spoczynku), bezpośrednio po wysiłku oraz co 10 minut w okresie regeneracji trwającym 60 minut po zakończeniu protokołu ćwiczeń lub w okresie pozostawania w pozycji siedzącej. Próbki krwi pobierano przed i bezpośrednio po wysiłku fizycznym lub w okresie bez wysiłku do analizy stężenia w osoczu czynników przeciwutleniających i proutleniających (azotyny-NO i dialdehydu malonowego-MDA).

Instrumenty i procedury: Ćwiczenia fizyczne: Po wyjaśnieniu jednostkom celów badań zaproszono ich do udania się do laboratorium w celu wykonania sesji ćwiczeń. Grupy zostały poddane trzem sesjom, z których dwie dotyczyły ćwiczeń aerobowych na bieżni trwających 60 minut. Ponadto ustalono, że osoby powinny wykonywać ćwiczenia, które uzyskały od 11 do 14 punktów w subiektywnej skali odczuwanego wysiłku Borga i Noble'a. Poproszono ich o utrzymywanie intensywności ćwiczeń fizycznych od 60% do 85% HRmax (maksymalnego tętna), monitorowanego podczas sesji za pomocą miernika częstotliwości Polar model RS800CX (Polar ElectroOy, Kempele, Finlandia).

Suplementacja zielonej herbaty lub placebo: Kapsułki z zieloną herbatą i placebo zostały wyprodukowane w laboratorium mieszającym. Badacze wykorzystali 2 g suszonych liści zielonej herbaty i odkryli poprawę stresu oksydacyjnego. Grupa spożywająca zieloną herbatę spożywała kapsułki zawierające 2 g skoncentrowanego proszku, około 1960 mg polifenoli (636 mg galusanu epigallokatechiny) i 20 mg kofeiny; grupa placebo spożywała kapsułki zawierające 2 g proszku ze skrobi kukurydzianej, wszystkie połykając popijając wodą. Kapsułki podawano pacjentom po pobraniu próbek krwi przez wykwalifikowanego specjalistę. Badacze prowadzili suplementację substancji po przedwysiłkowym pobraniu krwi i sesjach rozpoczynanych zaledwie 30 minut po przyjęciu kapsułek, czyli czasu potrzebnego organizmowi na wchłonięcie składników odżywczych.

Pomiar ciśnienia krwi: BP osób mierzono wcześniej, bezpośrednio po zakończeniu ćwiczeń iw ciągu 60 minut po zakończeniu ćwiczeń. BP w spoczynku weryfikowano po tym, jak badani pozostawali w pozycji siedzącej przez 10 minut. Pod koniec sesji spacerowej sprawdzono ciśnienie krwi u osób siedzących. Podczas regeneracji BP weryfikowano co 10 minut podczas wszystkich 60 minut sesji marszowej. Przyjęto protokół zaproponowany przez Brazylijskie Towarzystwo Kardiologiczne i Brazylijskie Towarzystwo Nadciśnienia Tętniczego.

Protokół pobierania krwi: Wykonywany przed i bezpośrednio po wysiłku. Dziesięć mililitrów (ml) krwi pobrano z żyły łokciowej, z czego pięć ml umieszczono w probówkach zawierających EDTA i ostrożnie homogenizowano przez odwracanie. Pozostałe 5 ml umieszczono w probówkach bez antykoagulantu. Następnie wirowano je przy 1500 obr./min przez 20 minut. Wyizolowano osocze, umieszczono w probówkach Ependorfa i do czasu analizy przechowywano w lodówce w temperaturze 20 ºC.

Ocena stresu oksydacyjnego (MDA): Aktywność utleniającą określono ilościowo poprzez reakcję kwasu tiobarbiturowego z produktami rozkładu wodoronadtlenków. Dlatego 250 µl próbki dodano do KCl i inkubowano w łaźni wodnej utrzymywanej w temperaturze 37°C przez 60 minut. Następnie mieszaninę wytrącono 35% nadchlorowym AA i odwirowano przy 14000 obr./min w 4°C przez 10 minut. Supernatant przeniesiono do nowych Ependorfów, dodając 400 µl 0,6% kwasu tiobarbiturowego i inkubowano w 95-100°C przez 30 min. Po ochłodzeniu materiał odczytywano za pomocą spektrofotometru przy długości fali 532 nm.

Dawkowanie azotynów Metoda została oparta na zastosowaniu odczynnika Griessa. Odczynnik przygotowano stosując równe części 5% kwasu fosforowego, 0,1% N-1-naftalenodiaminy (NEED), 1% sulfanilamidu, 5% kwasu fosforowego i wody destylowanej. Aby przeprowadzić test, 100 µl supernatantu 10% homogenatu sporządzonego z buforem fosforanu potasu dodano do 100 µl odczynnika Griessa. Odnośnie białego, 100 µl odczynnika dodano do 100 µl buforu i przeprowadzono serię rozcieńczeń w celu uzyskania krzywej wzorcowej (100, 50, 25 12,5, 6,25, 3,12, 1,56 µm) azotynów. Cały test przeprowadzono w 96-dołkowej płytce z czytnikiem przy zakresie absorbancji 560 nm.

Proces analizy danych: Początkowo wszystkie dane były testowane pod kątem ich normalności i zmienności w błędzie standardowym. Następnie zastosowano jednokierunkowe testy ANOVA w celu porównania warunków podstawowych w ciągu trzech dni postępowania. Podczas analizy wykorzystano oprogramowanie Instat 3.0 (GraphPAdInstat, San Diego, CA, USA).