Hodnocení SilOss® v parodontální chirurgii

Uspořádání studie Studie byla navržena jako dvojitě zaslepená randomizovaná kontrolovaná klinická studie s rozdělenými ústy. Účelem této studie je zhodnotit účinnost nového syntetického materiálu pro regeneraci kostí (Siloss®) při léčbě periodontálních intraboniálních kostních defektů. Etické schválení bylo získáno od institucionální etické komise, přičemž účastníci před zahájením studie podepsali informovaný souhlas.

Výpočet velikosti vzorku Velikost vzorku byla vypočítána tak, že se tato studie považovala za studii non-inferiority. Minimální velikost vzorku 27 bude vyžadována, když minimální rozdíl středních úrovní kostní náplně před a po ošetření má být alespoň 1 mm2 při p=0,05 s očekávaným rozptylem 0,8 pro ß=0,1.

Zdroj dat Z ambulantní části oddělení parodontologie bylo vybráno celkem 30 subjektů. Do studie byli zahrnuti systémově zdraví jedinci s chronickou parodontitidou ve věkové skupině 30-55 let s alespoň 2 periodontálními kapsami ≥5 mm s nejméně 1 kapsou v každém kvadrantu vykazující radiografickou známku vertikálního úbytku kostní hmoty. Ze studie byli vyloučeni pacienti, kteří podstoupili periodontální terapii v posledních 6 měsících a/nebo užívali antibiotika, antioxidanty a antibakteriální ústní vodu nebo léčivé zubní pasty během 6 měsíců od výchozího stavu a kuřáci. Posouzení vhodnosti pro kostní štěp bylo potvrzeno transgingivální sondou k ověření přítomnosti dobře uzavřených defektů mezizubní kosti v tolika kvadrantech.

Randomizace a zaslepení Randomizace a zaslepení zahrnovaly počítačové generování alokační sekvence v náhodných permutovaných blocích (randomizace bloků) a slepé vyplácení léků. Alokace byla provedena přiřazením bloku lokalit do studijních skupin podle zadané sekvence. Na základě sekvence vybral první operátor dvě místa pro každé z následujících experimentálních míst; testovací místo, do kterého byl umístěn štěp (Siloss®), a kontrolní místo, které bylo ošetřeno pouze hydroxyapatitovým štěpem. Všechny operace byly z důvodu jednotnosti prováděny určeným provozovatelem, zatímco příslušné odečty zaznamenával první provozovatel, který byl zaslepený k povaze místa. Slepa nebyla rozbita, dokud nebyla tato klinická studie zcela dokončena.

Standardizace PPD a CAL PPD a CAL byly zaznamenány na začátku a na konci 3, 6 a 9 měsíců pomocí UNC-15 barevně kódované periodontální sondy. Byl odebrán alginátový otisk a jako fixní referenční poloha (tj. spojení vertikální drážky a spodního okraje stentu). Ve stentu byla připravena drážka pro standardizaci angulace sondy po celou dobu studie.

Standardizace rentgenových snímků Standardní digitální IOPA rentgenové snímky byly pořízeny na začátku, po 3 a 6 měsících technikou paralelního/dlouhého kužele při předem nastavených parametrech pomocí komerčně dostupného systému RVG (Radiovisiography) (Kodak RVG 5100® Digital Radiography System, Carestream Health, Rochester, USA). Poté, co byla zobrazovací deska umístěna do držáku filmu pro paralelní techniku ​​(XCP sady pro digitální senzory®, BlueDent, Chennai, Indie), byl přidán přídavný silikonový otiskovací materiál (Elite HD+ Regular Body Normal Set®, Zhermack, Badia Polesine, Itálie). kolem kousací plochy a nechá se zatuhnout. Toto uspořádání zajišťovalo standardizované vyrovnání zaměřovače a držáku zajišťující správné umístění kolimátoru na následných rentgenových snímcích.

Předoperační protokol Každý pacient byl připraven na operaci s pokyny pro ústní hygienu, škálování a hoblování kořenů alespoň tři měsíce před operací, doplňková chemická kontrola plaku a úprava okluze byla provedena, kdykoli to bylo nutné. Čtyři týdny po počáteční terapii byli pacienti přehodnoceni za účelem posouzení klinických parametrů a kontroly plaku.

Protokol studie Poté, co byly mezizubní oblasti sondovány bukálně a lingválně/palatinálně, bylo místo zvažováno pro studii, pokud průměrná hloubka kapsy sondy (PPD) byla ≥5 mm. Všechny výchozí parametry (v den operace) byly zaznamenány před chirurgickým výkonem. PPD, CAL a místně specifické skóre plaku bylo zaznamenáno na začátku a na konci 3, 6 a 9 měsíců. Klinické parametry byly zaznamenávány pomocí barevně označeného přístroje University of North Carolina č. 15 (UNC-15). Oblast podrobená chirurgickému zákroku byla anestetizována nervovým blokem/infiltrací v závislosti na místě chirurgického zákroku za použití lokální anestezie. Byly provedeny crevikulární řezy a chlopně byly zvednuty pomocí tupé disekce s pomocí periostálního elevátoru. Kostní defekt byl zbaven granulační tkáně a povrch kořene byl ohoblován pro odstranění plaku a zubního kamene, dokud nebyla nalezena hladká tvrdá konzistence. Architektura defektu byla potvrzena přímým pozorováním a klasifikována na základě počtu přítomných kostěných stěn. U pacientů vybraných do testovací skupiny byl kromě debridementu otevřené chlopně (OFD) použit štěp pro náhradu kosti Siloss® k vyplnění defektů až do nejkoronálnější úrovně kostních stěn. Potřebné množství kompozitního alloplastu (Siloss®) bylo nadávkováno do sterilní misky s dappen a smícháno s pacientovou vlastní krví a přeneseno na místo defektu s amalgámovým nosičem. Mukoperiostální chlopně byly přemístěny a zajištěny na místě pomocí přerušovaných stehů. Chirurgický postup v kontrolním místě zahrnoval debridement otevřené chlopně následovaný umístěním hydroxyapatitového štěpu (G-graft®, Saharanpur, UP, Indie). Operační oblast byla chráněna a překryta pomocí parodontálního obvazu.

Následná a pooperační péče Po dobu 5 dnů po operaci byly předepsány rutinní pooperační pokyny, perorální antimikrobiální látky (amoxicilin 500 mg, třikrát denně) a analgetika (Diclofenac sodný 50 mg + Paracetamol 325 mg BID) a byly vysvětleny běžné pooperační pokyny. Pacienti byli instruováni, aby si vyplachovali ústní vodu 10 ml 0,2% chlorhexidinu dvakrát denně po dobu jednoho týdne. Bylo jim doporučeno, aby se vyvarovali žvýkání v místě chirurgického zákroku, a bylo jim řečeno, aby si místo nečistili kartáčkem nebo s ním nemanipulovali po dobu 10 dnů, jeden týden po operaci byl obvaz a stehy odstraněny. Byly posíleny pokyny pro ústní hygienu. Pacienti byli poté sledováni ve 3, 6 a 9 měsících. Při každé svolávací návštěvě bylo provedeno posílení opatření ústní hygieny a v případě potřeby supragingivální škálování. Po 6 měsících byla všechna měření měkkých tkání opakována.

Radiografické hodnocení Jediný operátor vyhodnotil kostní výplň pomocí techniky digitálního odečítání a morfometrické plošné analýzy pomocí specifických nástrojů ve dvou software pro zpracování obrazu podle dříve popsané metody.

Technika digitálního odečítání a morfometrická analýza Rentgenové snímky získané po 3 a 6 měsících byly odečteny od rentgenového snímku pořízeného na základní linii pomocí komerčně dostupného softwaru pro zpracování obrazu (Adobe Photoshop® 6.0, Adobe Systems, San Jose, USA). Aby se snížily odchylky jasu a kontrastu, byly oba obrázky upraveny na základě úrovní a křivek v softwaru. Před digitálním odečítáním byly oba rentgenové snímky podle potřeby posunuty ve vhodných směrech, aby se snížilo geometrické zkreslení. Tyto obrázky byly poté superponovány a odečteny výběrem obrázku > výpočet > vyloučení > nástroje nového kanálu. Vyloučená mezizubní vrstva byla načrtnuta pomocí nástroje polygonální laso a vrstva byla zkopírována a uložena jako samostatný společný dokument fotografické expertní skupiny při nízké kompresi. Morfometrická plošná analýza. Po digitálním odečtení byla digitalizovaná a vyloučená mezizubní vrstva přenesena do softwaru s otevřeným zdrojovým kódem pro výpočet plochy (ImageJ®, Research Services Branch, NIH, Bethesda, Maryland, USA) pro výpočet plochy. Vrstva byla převedena na obraz ve stupních šedi a měřítko měření bylo nastaveno tak, aby zohledňovalo jakékoli zvětšení/zmenšení rentgenového snímku kvůli RVG. Plocha vrstvy byla vypočtena (v mm2) tak, že se celá plocha nejprve uzavřela pomocí nástroje pro obdélníkový výběr a poté pomocí nástroje Analyzovat > Analyzovat částice.

Histomorfometrická analýza Od 3 subjektů z obou skupin byly získány vzorky kostní biopsie během procedur prodlužování korunky mezi 71/2 až 9 měsíci. Stručně řečeno, vzorky byly ponořeny do 4% pufrovaného formalínu a následně byly dehydratovány ve vzestupné řadě ethylalkoholů. Vzorky byly poté obarveny pomocí hematoxylin-eosin pro analýzu světelnou mikroskopií. Ze skupin SILOSS® a HA bylo připraveno 11 a 12 sklíček. 10 oblastí zájmu (ROI) na sklíčko bylo vizualizováno pro objem mineralizované tkáně pomocí mikroskopu Olympus BX 53 při 40násobném zvětšení. Před vyhodnocením řezů kostí v ImageJ byly vytvořeny černobílé masky pomocí Adobe Photoshop® podle techniky popsané Eganem a kol.

Kalibrace snímku J Ke kalibraci snímku J byla na jeden snímek pro každé zvětšení umístěna stupnice. Soubor byl otevřen s obrázkem obsahujícím měřítko vložené softwarem mikroskopu nebo fotoaparátu, který obrázek získal. Délka naměřená pro měřítko byla zadána jako vzdálenost v pixelech. Délka měřítka, jak je označena mikroskopem, je zadána jako známá vzdálenost a následná analýza byla měřena na této stupnici.

Kvantifikace objemu mineralizované tkáně v ImageJ Soubor masky objemu kosti byl otevřen a celková plocha byla vybrána pomocí Úpravy > Výběr > Vybrat vše a klikněte na Analyzovat > Změřit. K výběru černých oblastí byl použit "nástroj hůlky" a klávesa Shift. Výběrem možnosti Analyzovat>Měřit se kvantifikuje mineralizovaná tkáň. Objem mineralizované tkáně byl vyjádřen jako (mineralizovaná tkáň/celková plocha)*100.

Statistická analýza Místně specifické vnitroskupinové srovnání mezi různými skupinami bylo provedeno pomocí ANOVA, po kterém následovala vícenásobná srovnání s použitím Bonferroniho korekce. Pro vnitroskupinové a meziskupinové srovnání byla použita jednocestná ANOVA následovaná post hoc testem. P-hodnota <0,05 byla považována za statisticky významnou a p-hodnota <0,001 byla považována za vysoce významnou