歯周外科におけるSilOss®の評価

研究デザイン この研究は、分割口、二重盲検、ランダム化対照臨床試験として設計されました。 この研究の目的は、歯周骨内骨欠損の治療における新規合成骨再生材料 (Siloss®) の有効性を評価することです。 研究開始前に参加者がインフォームドコンセントに署名し、施設の倫理委員会から倫理的許可を得ています。

サンプルサイズの計算 サンプルサイズは、この試験を非劣性試験として考慮して計算されました。 治療前後の平均骨充填レベルの最小差が p=0.05 で少なくとも 1mm2 であり、β=0.1 の場合の予想分散が 0.8 である場合、最小サンプル サイズ 27 が必要になります。

データの出典 歯周病科の外来部門から合計 30 人の被験者が選ばれました。 5mm以上の歯周ポケットを少なくとも2つ有し、各象限に少なくとも1つのポケットを有し、X線写真で垂直方向の骨損失の証拠を示している、30～55歳の年齢層の全身的に健康な慢性歯周炎被験者が研究に含まれた。 過去6か月以内に歯周病治療を受けた患者、および/またはベースラインから6か月以内に抗生物質、抗酸化物質、抗菌性うがい薬や薬用歯磨き粉を使用した患者および喫煙者は研究から除外された。 骨移植の適合性の評価は、歯肉を通過するプロービングによって、多くの象限に十分に抑制された歯間骨欠損の存在を確認することによって確認されました。

無作為化と盲検化 無作為化と盲検化には、ランダムに並べ替えたブロックでの割り当てシーケンスのコンピュータによる生成 (ブロック無作為化) と盲検による薬剤の支払いが含まれます。 割り当ては、指定された順序に従ってサイトのブロックを研究グループに割り当てることによって実行されました。 配列に基づいて、最初のオペレーターは、以下の実験部位ごとに 2 つの部位を選択しました。移植片（Siloss®）が配置された試験部位と、ヒドロキシアパタイト移植片のみによって治療された対照部位。 すべての手術は均一性を保つために指定されたオペレーターによって行われましたが、関連する読み取り値は、部位の性質を知らなかった最初のオペレーターによって記録されました。 この臨床試験が完全に終了するまでブラインドは破られませんでした。

PPD と CAL の標準化 PPD と CAL は、色分けされた UNC-15 歯周プローブを使用して、ベースライン時と 3、6、9 か月の終了時に記録されました。 アルジネート印象が採取され、臨床歯冠の咬合側 2/3 に限定されたカスタム アクリル ステントが固定基準位置として使用されました (つまり、 垂直溝とステントの下縁の接合部）。 研究期間全体を通してプロービングの角度を標準化するために、ステントに溝が準備されました。

X 線写真の標準化 標準デジタル IOPA X 線写真は、市販の RVG (放射線可視撮影) システム (Kodak RVG 5100® Digital Radiography System, Carestream Health, Rochester,アメリカ合衆国）。 平行化技術のためにイメージング プレートをフィルム ホルダーに置いた後 (XCP Kits for Digital Sensors®、BlueDent、インド、チェンナイ)、シリコン印象材 (Elite HD+ Regular Body Normal Set®、Zhermack、Badia Polesine、Italy) を追加しました。咬合面の周囲に塗布し、固まるまで放置します。 この配置により、照準装置とホルダーの標準化された位置合わせが保証され、その後の X 線写真でのコリメータの正しい位置決めが保証されます。

術前プロトコール 各患者は、口腔衛生指導、手術の少なくとも 3 か月前にスケーリングとルートプレーニング、補助的な化学プラークコントロール、および必要に応じて咬合調整が行われることで手術の準備を整えました。 患者は、最初の治療の4週間後に臨床パラメータとプラークコントロールを評価するために再評価されました。

研究プロトコル 歯間領域を頬側および舌側/口蓋側にプローブした後、平均プローブポケット深さ (PPD) が ≥5 mm であれば、その部位を研究対象とみなしました。 すべてのベースライン (手術当日) パラメーターは、手術前に記録されました。 PPD、CAL、および部位特異的プラークスコアは、ベースライン時と、3、6、9 か月の終了時に記録されました。 臨床パラメータは、ノースカロライナ大学 no.15 (UNC-15) の色分けされた外科手術を使用して記録されました。 外科手術の開始時に、患者は 0.2 % クロルヘキシジンで 1 分間洗い流すように求められました。 手術部位の麻酔は局所麻酔を用い、手術部位に応じて神経ブロック・浸潤を行います。 溝切開を行い、骨膜エレベーターを利用した鈍的切開により皮弁を持ち上げました。 骨欠損から肉芽組織を切除し、滑らかで硬い一貫性が見つかるまで歯垢と歯石を除去するために歯根の表面を平らにしました。 欠損の構造は直接観察によって確認され、存在する骨壁の数に基づいて分類されました。 試験グループに選ばれた患者では、皮弁開創術（OFD）に加えて、骨壁の最も冠状のレベルまで欠損を埋めるためにSiloss®骨置換グラフトが利用されました。 必要量の複合アロプラスト (Siloss®) を滅菌ダッペン皿に分注し、患者自身の血液と混合し、アマルガム担体で欠損部位に運びました。 粘膜骨膜弁を再配置し、断続縫合糸を使用して所定の位置に固定した。 対照部位の外科的処置には、開腹皮弁創傷面切除術とその後のヒドロキシアパタイト移植片（G-graft®、サハランプール、UP、インド）の配置が含まれていました。 手術領域は歯周包帯を使用して保護され、覆われました。

フォローアップと術後ケア ルーチンの術後指示、経口抗菌剤 (アモキシシリン 500 mg、TID)、および鎮痛剤 (ジクロフェナク ナトリウム 50 mg + パラセタモール 325 mg BID) が術後 5 日間処方され、ルーチンの術後指示が説明されました。 患者は、10mlの0.2%クロルヘキシジンうがい薬で1週間毎日2回うがいをするように指示されました。 彼らは手術部位を噛まないように忠告され、手術後1週間は包帯と縫合糸が外された後10日間はその部位をブラッシングしたり操作したりしないように言われた。 口腔衛生指導が強化されました。 その後、患者は 3 ヵ月、6 ヵ月、9 ヵ月後にモニタリングされました。 リコール訪問のたびに、口腔衛生対策の強化、および必要に応じて歯肉縁上のスケーリングが実施されました。 6 か月後に、すべての軟組織の測定を繰り返しました。

X線撮影評価 1人のオペレーターが、前述の方法に従って2つの画像処理ソフトウェアの特定のツールを使用して、デジタルサブトラクション技術と形態計測領域分析を使用して骨充填を評価しました。

デジタルサブトラクション技術と形態計測分析 市販の画像処理ソフトウェア（Adobe Photoshop® 6.0、Adobe Systems、San Jose、USA）を使用して、3 か月および 6 か月で取得した X 線写真をベースラインで撮影した X 線写真から差し引いた。 明るさとコントラストの変動を減らすために、両方の画像はソフトウェアのレベルと曲線に基づいて調整されました。 デジタル減算の前に、幾何学的歪みを減らすために、両方の X 線写真が必要に応じて適切な方向に移動されました。 次に、これらの画像を重ね合わせ、[画像] > [計算] > [除外] > [新しいチャネル ツール] を選択して減算しました。 除外された歯間層は、多角形なげなわツールを使用して輪郭が描かれ、その層がコピーされ、別の共同写真専門家グループ文書として低圧縮で保存されました。 形態計測領域分析。 デジタル減算後、デジタル化され除外された歯間層は、面積計算のためにオープンソース ソフトウェア (ImageJ®、NIH、米国メリーランド州ベセスダの研究サービス部門) に転送されました。 レイヤーはグレースケール画像に変換され、RVG による X 線写真の拡大/縮小を考慮して測定スケールが設定されました。 レイヤーの面積は、最初に長方形選択ツールで領域全体を囲み、次に [分析] > [粒子の分析] ツールを使用して計算されます (mm2 単位)。

組織形態計測分析 両グループの各被験者 3 名から、7 か月半から 9 か月の間の歯冠延長処置中に骨生検標本を採取しました。 簡単に説明すると、標本を 4% 緩衝ホルマリンに浸漬し、その後、一連の漸増エチルアルコール中で脱水しました。 次に、光学顕微鏡分析のためにヘマトキシリン・エオシンを使用して標本を染色しました。 11 枚と 12 枚のスライドがそれぞれ SILOSS® グループと HA グループから調製されました。 Olympus BX 53 顕微鏡を倍率 40 倍で使用して、スライドあたり 10 の関心領域 (ROI) を石灰化組織の体積について視覚化しました。 ImageJ で骨切片を評価する前に、Egan et al. が説明した手法に従って Adob​​e Photoshop® を使用して白黒画像マスクを作成しました。

ImageJ のキャリブレーション Image J をキャリブレーションするには、各倍率の 1 つの画像上にスケール バーを配置しました。 画像を取得した顕微鏡またはカメラ ソフトウェアによって挿入されたスケール バーを含む画像を含むファイルが開かれました。 スケール バーに対して測定された長さは、ピクセル単位の距離として入力されました。 顕微鏡によってラベル付けされたスケール バーの長さが既知の距離として入力され、その後の分析はこのスケールで測定されました。

ImageJ での石灰化組織ボリュームの定量化 骨ボリューム マスク ファイルが開かれ、編集 > 選択 > すべて選択して、分析 > 測定をクリックして総面積を選択しました。 「杖ツール」と Shift キーを使用して黒い領域を選択しました。 Analyze>Measure を選択すると、石灰化組織が定量化されます。 石灰化組織の体積は、(石灰化組織/総面積)*100として表されました。

統計分析 さまざまなグループ間の部位特異的なグループ内比較を、ANOVA を使用して実行し、続いてボンフェローニ補正を使用して多重比較を実行しました。 一元配置分散分析とそれに続く事後検定をグループ内およびグループ間の比較に使用しました。 <0.05 の p 値は統計的に有意であるとみなされ、<0.001 の p 値は非常に有意であるとみなされます。