Evaluering af SilOss® i parodontal kirurgi

Undersøgelsesdesign Studiet var designet som et splitmundet, dobbeltblindt, randomiseret kontrolleret klinisk forsøg. Formålet med denne undersøgelse er at evaluere effektiviteten af ​​et nyt syntetisk knogleregenereringsmateriale (Siloss®) til behandling af parodontale intraknogleknogledefekter. Der er indhentet etisk godkendelse fra den institutionelle etiske komité, hvor deltagerne har underskrevet et informeret samtykke forud for påbegyndelsen af ​​undersøgelsen.

Beregning af prøvestørrelse Prøvestørrelse blev beregnet ved at betragte dette forsøg som et ikke-mindreværdsforsøg. En minimumsprøvestørrelse på 27 vil være påkrævet, når minimumsforskellen mellem gennemsnitlige knoglefyldningsniveauer før og efter behandling skal være mindst 1 mm2 ved p=0,05 med forventet varians på 0,8 for at have ß=0,1.

Datakilde I alt 30 forsøgspersoner blev udvalgt fra ambulant afdeling på Paradontiafdelingen. Systemisk sunde kronisk parodontitis-personer i aldersgruppen 30-55 år med mindst 2 parodontale lommer ≥5 mm med mindst 1 lomme i hver kvadrant, der viser radiografisk bevis for vertikalt knogletab, blev inkluderet i undersøgelsen. Patienter, der har gennemgået parodontalbehandling inden for de seneste 6 måneder og/eller har brugt antibiotika, antioxidanter og antibakteriel mundskyl eller medicineret tandpasta inden for 6 måneder efter baseline, og rygere blev udelukket fra undersøgelsen. Vurdering af egnethed til knogletransplantation blev bekræftet ved transgingival sondering for at verificere tilstedeværelsen af ​​velindeholdte interdentale knogledefekter i lige så mange kvadranter.

Randomisering og blinding Randomisering og blinding omfattede computeriseret generering af allokeringssekvensen i tilfældige permuterede blokke (blokrandomisering) og blindet udbetaling af medicin. Allokering blev udført ved at tildele blokken af ​​steder til undersøgelsesgrupper i henhold til den specificerede sekvens. Baseret på sekvensen valgte den første operatør to steder for hver af de følgende eksperimentelle steder; teststedet, hvor transplantatet (Siloss®) blev anbragt, og kontrolstedet, som kun blev behandlet med Hydroxyapatit-transplantat. Alle operationerne blev udført af en udpeget operatør af hensyn til ensartetheden, mens de relevante aflæsninger blev registreret af den første operatør, som var blindet for stedets beskaffenhed. Persiennen blev ikke brækket, før dette kliniske forsøg var fuldstændigt afsluttet.

Standardisering af PPD og CAL PPD og CAL blev registreret ved baseline og ved slutningen af ​​3, 6 og 9 måneder under anvendelse af en UNC-15 farvekodet periodontal probe. Der blev taget et alginataftryk, og tilpasset akrylstent begrænset til de okklusale 2/3 af den kliniske krone blev brugt som fast referenceposition (dvs. samling af lodret rille og nedre kant af stenten). En rille blev forberedt i stenten for at standardisere sonderingsvinklen gennem hele undersøgelsesperioden.

Standardisering af røntgenbilleder Standard digitale IOPA-røntgenbilleder blev taget ved baseline, 3 og 6 måneder ved hjælp af parallelle/lang-kegle-teknikken ved forudindstillede parametre ved brug af et kommercielt tilgængeligt RVG (Radiovisiography) system (Kodak RVG 5100® Digital Radiography System, Carestream Health, Rochester, USA). Efter at billedpladen var placeret i filmholderen til paralleliseringsteknik (XCP Kits for Digital Sensors®, BlueDent, Chennai, Indien), blev der tilføjet siliciumaftryksmateriale (Elite HD+ Regular Body Normal Set®, Zhermack, Badia Polesine, Italien) rundt om bidefladen og fik lov til at sætte sig. Dette arrangement sikrede standardiseret justering af sigteanordningen og holderen, hvilket sikrede korrekt placering af kollimatoren i efterfølgende røntgenbilleder.

Prækirurgisk protokol Hver patient blev forberedt til operation med mundhygiejneinstruktioner, afskalning og rodplaning mindst tre måneder før operationen, supplerende kemisk plakkontrol og okklusal justering blev udført, når det var nødvendigt. Patienterne blev revurderet for at vurdere kliniske parametre og plakkontrol fire uger efter indledende behandling.

Undersøgelsesprotokol Efter at de interdentale områder var blevet probet bukkalt og lingualt/palatalt, blev stedet overvejet til undersøgelse, hvis den gennemsnitlige sonderingslommedybde (PPD) var ≥5 mm. Alle baseline (på operationsdagen) parametre blev registreret før den kirurgiske procedure. PPD-, CAL- og stedspecifikke plaque-scorer blev registreret ved baseline og ved slutningen af ​​3, 6 og 9 måneder. Kliniske parametre blev registreret ved hjælp af en University of North Carolina nr. 15 (UNC-15) farvekodet kirurgisk procedure Ved starten af ​​den kirurgiske procedure blev patienterne bedt om at skylle med 0,2 % klorhexidin i 1 min. Område underkastet operation blev bedøvet ved nerveblokering/infiltration afhængigt af operationsstedet ved hjælp af lokalbedøvelse. Crevikulære snit blev lavet, og klapperne blev hævet ved hjælp af stump dissektion ved hjælp af en periosteal elevator. Den ossøse defekt blev debrideret af granulationsvæv, og rodoverfladen blev høvlet for at fjerne plak og tandsten, indtil en glat hård konsistens blev fundet. Defektens arkitektur blev bekræftet ved direkte observation og klassificeret baseret på antallet af tilstedeværende knoglevægge. Hos patienter udvalgt til testgruppe blev Siloss® knogleerstatningsgraft ud over åben flapdebridement (OFD) brugt til at udfylde defekterne til det mest koronale niveau af knoglevæggene. Den nødvendige mængde komposit alloplast (Siloss®) blev dispenseret i en steril dappen skål og blandet med patientens eget blod og båret til defektstedet med en amalgambærer. De mucoperiosteale klapper blev genplaceret og fastgjort på plads ved hjælp af afbrudte suturer. Den kirurgiske procedure på kontrolstedet inkluderede åben flap-debridering efterfulgt af placering af hydroxyapatit-transplantat (G-graft®, Saharanpur, UP, Indien). Det kirurgiske område blev beskyttet og dækket med en parodontal bandage.

Opfølgning og postkirurgisk behandling Rutinemæssige postoperative instruktioner, orale antimikrobielle midler (amoxicillin 500 mg, TID) og analgetika (Diclofenacnatrium 50 mg + Paracetamol 325 mg BID) blev ordineret i 5 dage efter operationen, og rutinemæssige post-kirurgiske instruktioner blev forklaret. Patienterne blev instrueret i at skylle med 10 ml 0,2 % klorhexidin mundskyl to gange dagligt i en uge. De blev rådet til at undgå at tygge på operationsstedet, og de blev bedt om ikke at børste på stedet eller manipulere det i 10 dage en uge efter operationen, forbindingen og suturerne blev fjernet. Mundhygiejneinstruktioner blev forstærket. Patienterne blev derefter overvåget efter 3, 6 og 9 måneder. Ved hvert af tilbagekaldelsesbesøgene blev der udført styrkelse af mundhygiejneforanstaltninger og supragingival skalering, hvis det var nødvendigt. Efter 6 måneder blev alle bløddelsmålinger gentaget.

Radiografisk vurdering En enkelt operatør evaluerede knoglefyldningen ved at bruge digital subtraktionsteknik og morfometrisk områdeanalyse ved at bruge specifikke værktøjer i to billedbehandlingssoftware i henhold til en tidligere beskrevet metode.

Digital subtraktionsteknik og morfometrisk analyse Røntgenbillederne opnået efter 3 og 6 måneder blev trukket fra røntgenbilledet taget ved basislinjen ved at bruge kommercielt tilgængelig billedbehandlingssoftware (Adobe Photoshop® 6.0, Adobe Systems, San Jose, USA). For at reducere lysstyrke- og kontrastvariationer blev begge billeder justeret baseret på niveauerne og kurverne i softwaren. Før digital subtraktion blev begge røntgenbilleder flyttet i passende retninger efter behov for at reducere geometrisk forvrængning. Disse billeder blev derefter overlejret og trukket fra ved at vælge billedet > beregning > ekskludering > nye kanalværktøjer. Det udelukkede interdentale lag blev skitseret ved at bruge det polygonale lassoværktøj, og laget blev kopieret og gemt som et separat fælles fotografisk ekspertgruppedokument ved lav kompression. Morfometrisk områdeanalyse. Efter digital subtraktion blev det digitaliserede og udelukkede interdentale lag overført til open source-software til arealberegning (ImageJ®, Research Services Branch, NIH, Bethesda, Maryland, USA) til arealberegning. Laget blev konverteret til et gråtonebillede, og måleskalaen blev indstillet til at tage højde for enhver forstørrelse/reduktion af røntgenbilledet på grund af RVG. Arealet af laget blev beregnet (i mm2) ved først at omslutte hele området med det rektangulære udvælgelsesværktøj og derefter ved at bruge værktøjet Analyser > Analyser partikler.

Histomorfometrisk analyse Fra 3 forsøgspersoner hver fra begge grupper blev der opnået knoglebiopsiprøver under kroneforlængelseprocedurer mellem 71/2 til 9 måneder. Kort fortalt blev prøverne nedsænket i 4 % bufret formalin og blev efterfølgende dehydreret i en stigende serie af ethylalkoholer. Prøverne blev derefter farvet med hæmatoxylin-eosin til lysmikroskopianalyse. 11 og 12 objektglas blev fremstillet fra henholdsvis SILOSS®- og HA-grupper. 10 regioner af interesse (ROI'er) pr. objektglas blev visualiseret for mineraliseret vævsvolumen ved at bruge et Olympus BX 53-mikroskop ved 40X forstørrelse. Før evaluering af knoglesektioner i ImageJ, blev sorte og hvide billedmasker skabt ved hjælp af Adobe Photoshop® ifølge en teknik beskrevet af Egan et al.

Kalibrering af ImageJ For at kalibrere Image J blev der placeret en skalabjælke på et billede for hver forstørrelse. Filen blev åbnet med et billede, der indeholdt en målestok, indsat af mikroskopet eller kamerasoftwaren, der erhvervede billedet. Længden målt for skalalinjen blev indtastet som afstand i pixels. Længden af ​​skalastangen som mærket af mikroskopet indtastes som kendt afstand, og efterfølgende analyse blev målt på denne skala.

Kvantificering af det mineraliserede vævsvolumen i ImageJ Knoglevolumenmaskefilen blev åbnet, og det samlede areal blev valgt ved Rediger> Udvælgelse>Vælg alle og klik på Analyser>Mål. "Trevværktøjet" og shift-tasten blev brugt til at vælge de sorte områder. Valg af Analyse>Mål vil kvantificere det mineraliserede væv. Det mineraliserede vævsvolumen blev udtrykt som (mineraliseret væv/samlet areal)*100.

Statistisk analyse Stedspecifik intragruppe sammenligning mellem forskellige grupper blev udført ved hjælp af ANOVA efterfulgt af flere sammenligninger ved hjælp af Bonferroni korrektion. Envejs ANOVA efterfulgt af post hoc-testen blev brugt til sammenligning mellem grupper og grupper. En p-værdi på <0,05 blev betragtet som statistisk signifikant, og p-værdi på <0,001 blev betragtet som meget signifikant