Utvärdering av SilOss® inom parodontitkirurgi

Studiedesign Studien utformades som en dubbelblind, randomiserad kontrollerad klinisk studie med delad mun. Syftet med denna studie är att utvärdera effektiviteten av ett nytt syntetiskt benregenereringsmaterial (Siloss®) vid behandling av parodontala intrabeniga bendefekter. Etiskt tillstånd har erhållits från den institutionella etiska kommittén med deltagare som undertecknar ett informerat samtycke innan studien påbörjas.

Beräkning av provstorlek Provstorleken beräknades genom att betrakta denna prövning som en icke-underlägsenhetsprövning. En minsta provstorlek på 27 kommer att krävas när den minsta skillnaden mellan genomsnittliga benfyllningsnivåer före och efter behandling ska vara minst 1 mm2 vid p=0,05 med en förväntad varians på 0,8 för att ha ß=0,1.

Datakälla Totalt 30 försökspersoner valdes ut från den polikliniska avdelningen på avdelningen för parodontik. Systemiskt friska patienter med kronisk parodontit i åldersgruppen 30-55 år med minst 2 parodontala fickor ≥5 mm med minst 1 ficka i varje kvadrant som visar radiografiska bevis på vertikal benförlust inkluderades i studien. Patienter som genomgått parodontitbehandling under de senaste 6 månaderna och/eller har använt antibiotika, antioxidanter och antibakteriellt munvatten eller medicinska tandkrämer inom 6 månader efter baslinjen och rökare exkluderades från studien. Bedömning av lämplighet för bentransplantat bekräftades genom transgingival sondering för att verifiera närvaron av väl inneslutna interdentala bendefekter i lika många kvadranter.

Randomisering och blindning Randomisering och blindning inkluderade datoriserad generering av allokeringssekvensen i slumpmässiga permuterade block (blockrandomisering) och blindad utbetalning av medicin. Allokering utfördes genom att tilldela blocket av platser till studiegrupper enligt den specificerade sekvensen. Baserat på sekvensen valde den första operatören två platser för var och en av följande experimentella platser; teststället, i vilket transplantat (Siloss®) placerades och kontrollstället som endast behandlades med Hydroxyapatit-transplantat. Alla operationer utfördes av en utsedd operatör för enhetlighetens skull, medan de relevanta avläsningarna registrerades av den första operatören som var blind för platsens natur. Persiennen bröts inte förrän denna kliniska prövning var helt avslutad.

Standardisering av PPD och CAL PPD och CAL registrerades vid baslinjen och i slutet av 3, 6 och 9 månader med användning av en UNC-15 färgkodad periodontal sond. Ett alginatavtryck togs och anpassad akrylstent begränsad till de ocklusala 2/3 av den kliniska kronan användes som fast referensposition (dvs. förbindning mellan vertikalt spår och nedre kant av stenten). Ett spår preparerades i stenten för att standardisera sonderingsvinklingen under hela studieperioden.

Standardisering av röntgenbilder Standard digitala IOPA-röntgenbilder togs vid baslinjen, 3 och 6 månader med parallell-/långkon-tekniken vid förinställda parametrar med användning av ett kommersiellt tillgängligt RVG-system (Radiovisiography) (Kodak RVG 5100® Digital Radiography System, Carestream Health, Rochester, USA). Efter att bildplattan placerats i filmhållaren för parallelliseringsteknik (XCP Kits for Digital Sensors®, BlueDent, Chennai, Indien), tillsattes ytterligare silikonavtrycksmaterial (Elite HD+ Regular Body Normal Set®, Zhermack, Badia Polesine, Italien) runt bitytan och fick stelna. Detta arrangemang säkerställde standardiserad inriktning av siktanordningen och hållaren, vilket säkerställde korrekt positionering av kollimatorn vid efterföljande röntgenbilder.

Prekirurgiskt protokoll Varje patient förbereddes för operation med munhygieninstruktioner, fjällning och rothyvling minst tre månader före operation, kompletterande kemisk plackkontroll och ocklusal justering utfördes närhelst det var nödvändigt. Patienterna omvärderades för att bedöma kliniska parametrar och plackkontroll fyra veckor efter initial behandling.

Studieprotokoll Efter att de interdentala områdena undersökts buckalt och lingualt/palatalt övervägdes platsen för studie om det genomsnittliga sonderingsfickans djup (PPD) var ≥5 mm. Alla baslinjeparametrar (på operationsdagen) registrerades före det kirurgiska ingreppet. PPD, CAL och platsspecifika plackpoäng registrerades vid baslinjen och i slutet av 3, 6 och 9 månader. Kliniska parametrar registrerades med hjälp av en University of North Carolina nr.15 (UNC-15) färgkodad kirurgisk procedur. I början av det kirurgiska ingreppet ombads patienterna att skölja med 0,2 % klorhexidin i 1 min. Område som utsattes för operation bedövades genom nervblockad/infiltration beroende på operationsställe med lokalbedövning. Crevikulära snitt gjordes och flikarna höjdes med hjälp av trubbig dissektion med hjälp av en periosteal elevator. Bendefekten debriderades från granulationsvävnad och rotytan hyvlades för att avlägsna plack och tandsten, tills en jämn hård konsistens hittades. Defektens arkitektur bekräftades genom direkt observation och klassificerades baserat på antalet beniga väggar. Hos patienter som valts ut för testgruppen användes, förutom öppen flapsdebridering (OFD), Siloss® benersättningstransplantat för att fylla defekterna till den mest koronala nivån av benväggarna. Den erforderliga mängden sammansatt alloplast (Siloss®) dispenserades i en steril dappenskål och blandades med patientens eget blod och transporterades till defektstället med en amalgambärare. De mucoperiosteala flikarna placerades om och säkrades på plats med avbrutna suturer. Det kirurgiska ingreppet på kontrollstället inkluderade debridering med öppen flik följt av placering av hydroxiapatittransplantat (G-graft®, Saharanpur, UP, Indien). Det kirurgiska området skyddades och täcktes med ett parodontalt förband.

Uppföljning och postkirurgisk vård Rutinmässiga postoperativa instruktioner, orala antimikrobiella medel (amoxicillin 500 mg, TID) och analgetika (Diklofenaknatrium 50 mg + Paracetamol 325 mg två gånger dagligen) ordinerades under 5 dagar efter operationen och rutinmässiga postoperativa instruktioner förklarades. Patienterna instruerades att skölja med 10 ml 0,2 % klorhexidin munvatten två gånger dagligen under en vecka. De fick rådet att undvika att tugga på operationsstället och uppmanades att inte borsta på platsen eller manipulera den under 10 dagar en vecka efter operationen, förbandet och suturerna togs bort. Munhygieninstruktionerna förstärktes. Patienterna övervakades sedan efter 3, 6 och 9 månader. Vid vart och ett av återkallelsebesöken utfördes förstärkning av munhygienåtgärder och supragingival skalning vid behov. Efter 6 månader upprepades alla mjukdelsmätningar.

Radiografisk bedömning En enskild operatör utvärderade benfyllningen genom att använda digital subtraktionsteknik och morfometrisk områdesanalys genom att använda specifika verktyg i två bildbehandlingsprogram enligt en tidigare beskriven metod.

Digital subtraktionsteknik och morfometrisk analys Röntgenbilderna som erhölls vid 3 och 6 månader subtraherades från röntgenbilden som togs vid baslinjen med användning av kommersiellt tillgänglig bildbehandlingsprogramvara (Adobe Photoshop® 6.0, Adobe Systems, San Jose, USA). För att minska ljusstyrka och kontrastvariationer justerades båda bilderna baserat på nivåerna och kurvorna i programvaran. Före digital subtraktion flyttades båda röntgenbilderna i lämpliga riktningar efter behov, för att minska geometrisk distorsion. Dessa bilder lades sedan över och subtraherades genom att välja bilden > beräkning > uteslutning > nya kanalverktyg. Det uteslutna interdentala lagret skisserades genom att använda det polygonala lassoverktyget och lagret kopierades och sparades som ett separat gemensamt fotografisk expertgruppsdokument vid låg kompression. Morfometrisk områdesanalys. Efter digital subtraktion överfördes det digitaliserade och uteslutna interdentala lagret till programvara med öppen källkod för areaberäkning (ImageJ®, Research Services Branch, NIH, Bethesda, Maryland, USA) för areaberäkning. Skiktet omvandlades till en gråskalebild, och mätskalan ställdes in för att ta hänsyn till eventuell förstoring/minskning av röntgenbilden på grund av RVG. Arean av skiktet beräknades (i mm2) genom att först innesluta hela området med det rektangulära urvalsverktyget och sedan med hjälp av verktyget Analysera > Analysera partiklar.

Histomorfometrisk analys Från 3 försökspersoner vardera från båda grupperna erhölls benbiopsiprover under kronförlängningsprocedurer mellan 71/2 och 9 månader. Kortfattat nedsänktes proverna i 4 % buffrat formalin och dehydrerades därefter i en stigande serie av etylalkoholer. Proverna färgades sedan med hematoxylin-eosin för ljusmikroskopanalys. 11 och 12 objektglas preparerades från SILOSS®- respektive HA-grupper. 10 regioner av intresse (ROI) per objektglas visualiserades för mineraliserad vävnadsvolym genom att använda ett Olympus BX 53-mikroskop vid 40X förstoring. Före utvärdering av bensektioner i ImageJ skapades svartvita bildmasker med hjälp av Adobe Photoshop® enligt en teknik som beskrivs av Egan et al.

Kalibrera ImageJ För att kalibrera Image J, placerades en skalstreck på en bild för varje förstoring. Filen öppnades med en bild som innehöll en skalstreck infogat av mikroskopet eller kameramjukvaran som tog bilden. Längden uppmätt för skalfältet angavs som avstånd i pixlar. Längden på skalstången som märkts av mikroskopet anges som känt avstånd och efterföljande analys mättes på denna skala.

Kvantifiera den mineraliserade vävnadsvolymen i ImageJ Benvolymsmaskfilen öppnades och den totala ytan valdes genom Redigera> Urval>Välj alla och klicka på Analysera>Mät. "Trollstavsverktyget" och skifttangenten användes för att välja de svarta områdena. Genom att välja Analysera>Mät kvantifieras den mineraliserade vävnaden. Den mineraliserade vävnadsvolymen uttrycktes som (mineraliserad vävnad/total yta)*100.

Statistisk analys Platsspecifik intragruppjämförelse mellan olika grupper utfördes med användning av ANOVA följt av flera jämförelser med Bonferroni-korrigering. Envägs ANOVA följt av post hoc-testet användes för jämförelse mellan grupper och grupper. Ett p-värde på <0,05 ansågs vara statistiskt signifikant och p-värde på <0,001 ansågs vara mycket signifikant