Srovnání lidského embryonálního vývoje s použitím jediného média s a bez přidání antioxidantů

Cíl studie: Studie srovnávající vývoj blastocyst na stejné kohortě oocytů s použitím dvou různých médií, G-TL versus G-TL doplněných antioxidanty.

Primární cíl: Procento blastocyst dobré kvality (GQB) na oplodněný oocyt v den 5.

Sekundární koncové body

• Den vývoje embrya 3, 5 a 6
• Kvalita embryí 3., 5. a 6. den
• Celková tvorba blastocyst (den 5 a den 6)
• Míra využití (embrya k dispozici pro přenos a kryokonzervaci)
• Míra implantace
• Klinická míra těhotenství

Uspořádání: Prospektivní embryonální sourozenec, studie superiority

MATERIÁLY A METODY Intervence Nový typ média pro kultivaci embryí používané pro in vitro kultivaci lidských embryí IVF.

Analýza výkonu Plánování a analýza výkonu byla provedena společně se statistikem Nilsem-Gunnarem Pehrssonem.

Z retrospektivních dat pomocí simulace byla intraindividuální SD pro rozdíl v % GQB mezi dvěma mediálními strategiemi odhadnuta na 32 %. K nalezení rozdílu 8 % v GQB mezi dvěma médii s výkonem 80 % s párovaným T-testem bude potřeba 128 párů.

Randomizace Páry budou zařazeny do studie po kontrole oplodnění (1. den). Pro účast je potřeba minimálně 6 zygot.

Bude provedena stratifikovaná randomizace zygot podle páru. U každého páru budou zygoty očíslovány.

Tyto zygoty pro každý pár pak budou blokovány (po dvou) náhodně rozděleny do dvou typů médií; A (tradiční kultivační médium = kontrola) a B (antioxidační médium = zásah). V obou skupinách se bude hrát tradiční kultura. Alokace bude provedena v poměru 1:1 podle jedinečného randomizačního seznamu pro každý pár.

Zaslepení Aby se minimalizovalo možné zkreslení primárního výsledku (GQE D5), embryolog provádějící morfologické hodnocení v den 5/6 nebude vědět, do které skupiny embrya patří.

Lékař i pár budou zaslepeni, do které skupiny byli zařazeni.

Postup léčby IVF Tradiční IVF léčba bude provedena včetně stimulace vaječníků a odběru oocytů standardními metodami na klinikách.

Hodnocení embryí a načasování hodnocení podle konsenzuálních kritérií Alpha/ESHRE.

Morfologické hodnocení Morfologie blastocyst bude hodnocena podle systému Consensus Scoring pro blastocysty (Istanbul Consensus workshop o hodnocení embryí) a morfologie bude dokumentována pomocí jednotlivých fotografií každé blastocysty. Bodování blastocyst se bude provádět pod inverzním mikroskopem 5. a 6. den. Blastocysta dobré kvality je definována jako nejméně Stupeň 2:2:2 podle systému klasifikace Istanbulského konsensu. (Balaban et al., 2011).

DOKUMENTACE Všichni pacienti účastnící se studie budou dokumentováni na počítačovém CRF. Tento dokument se bude týkat záznamů pacientů se všemi relevantními klinickými a laboratorními údaji z konkrétního cyklu IVF. Prostřednictvím žurnálového systému (WinIVF) používaného ve Fertilitetscentru bude možné vygenerovat kompletní seznam všech proměnných zahrnutých do studie.

Pacienti, kteří byli požádáni o účast ve studii, ale nesplnili kritéria pro randomizaci, budou také registrováni.

STATISTICKÁ ANALÝZA Bude definována jak populace intention-to-treat (ITT), tak populace podle protokolu (PP). Primární proměnná účinnosti v této studii superiority bude rozdíl v % GQB mezi dvěma typy médií pro každý pár. Primární statistickou analýzou bude oboustranný párový T-test týkající se průměru rozdílu v %GQB mezi standardním kultivačním médiem a antioxidačním médiem na populaci ITT. Vypočte se oboustranný 95% interval spolehlivosti pro střední rozdíl v % GOB mezi dvěma médii. Všechny testy významnosti budou oboustranné a provedené na 5% hladině významnosti.