Porównanie rozwoju embrionalnego człowieka przy użyciu jednego podłoża z dodatkiem i bez dodatku przeciwutleniaczy

Cel badania: Badanie porównujące rozwój blastocysty w tej samej kohorcie oocytów przy użyciu dwóch różnych pożywek, G-TL i G-TL z dodatkiem przeciwutleniaczy.

Pierwszorzędowy punkt końcowy: odsetek blastocyst dobrej jakości (GQB) na zapłodniony oocyt w dniu 5.

Drugorzędowe punkty końcowe

• Rozwój zarodka dzień 3, 5 i 6
• Jakość zarodków dzień 3, 5 i 6
• Całkowite tworzenie blastocyst (dzień 5 i dzień 6)
• Wskaźnik wykorzystania (zarodki dostępne do transferu i kriokonserwacji)
• Wskaźnik implantacji
• Wskaźnik ciąż klinicznych

Konfiguracja: rodzeństwo potencjalnego zarodka, badanie wyższości

MATERIAŁY I METODY Interwencja Nowy rodzaj pożywek do hodowli zarodków wykorzystywanych do hodowli in vitro zarodków ludzkich IVF.

Analiza mocy Planowanie i analiza mocy zostały wykonane wspólnie ze statystykiem, Nilsem-Gunnarem Pehrssonem.

Na podstawie danych retrospektywnych z wykorzystaniem symulacji wewnątrzosobnicze SD dla różnicy w % GQB między dwiema strategiami medialnymi oszacowano na 32%. Aby znaleźć różnicę 8% w GQB między dwoma mediami o mocy 80% ze sparowanym testem T, potrzebnych będzie 128 par.

Randomizacja Pary zostaną włączone do badania po sprawdzeniu zapłodnienia (dzień 1). Do udziału wymagane jest minimum 6 zygot.

Zostanie przeprowadzona warstwowa randomizacja zygot według par. Dla każdej pary zygoty będą ponumerowane.

Te zygoty dla każdej pary będą następnie blokowane (po dwa) losowo do dwóch typów pożywek; A (tradycyjna pożywka hodowlana = kontrola) i B (pożywka przeciwutleniająca = interwencja). W obu grupach prezentowana będzie kultura tradycyjna. Alokacja zostanie przeprowadzona w stosunku 1:1 zgodnie z unikalną listą randomizacyjną dla każdej pary.

Zaślepienie Aby zminimalizować możliwe obciążenie dla pierwotnego wyniku (GQE D5), embriolog przeprowadzający ocenę morfologiczną w dniu 5/6 nie będzie wiedział, do której grupy należą zarodki.

Zarówno lekarz, jak i para nie będą wiedzieć, do której grupy zostali przydzieleni.

Procedura leczenia IVF Zostanie przeprowadzone tradycyjne leczenie IVF, w tym stymulacja jajników i pobranie oocytów, przy użyciu standardowych metod stosowanych w klinikach.

Ocena zarodka i czas oceny zgodnie z kryteriami konsensusu Alpha/ESHRE.

Ocena morfologiczna Morfologia blastocysty zostanie oceniona zgodnie z systemem Consensus Scoring dla blastocyst (konsensusowe warsztaty w Stambule dotyczące oceny zarodków), a morfologia zostanie udokumentowana indywidualnymi zdjęciami każdej blastocysty. Ocena blastocysty zostanie przeprowadzona pod odwróconym mikroskopem w dniu 5 i dniu 6. Dobra jakość blastocysty jest zdefiniowana jako co najmniej stopień 2:2:2 zgodnie z systemem klasyfikacji Istanbul Consensus. (Balaban i in., 2011).

DOKUMENTACJA Wszyscy pacjenci biorący udział w badaniu zostaną udokumentowani w skomputeryzowanym CRF. Dokument ten będzie powiązany z dokumentacją pacjentów wraz ze wszystkimi istotnymi danymi klinicznymi i laboratoryjnymi z konkretnego cyklu IVF. Dzięki systemowi dzienników (WinIVF) stosowanemu w Fertilitetscentrum możliwe będzie wygenerowanie kompletnej listy wszystkich zmiennych uwzględnionych w badaniu.

Pacjenci, którzy zostali zaproszeni do udziału w badaniu, ale nie spełnili kryteriów randomizacji, również zostaną zarejestrowani.

ANALIZA STATYSTYCZNA Zostaną zdefiniowane zarówno populacja ITT, jak i populacja Per Protocol (PP). Podstawową zmienną skuteczności w tym badaniu wyższości będzie różnica w % GQB między dwoma typami mediów dla każdej pary. Podstawową analizą statystyczną będzie dwustronny sparowany test T dotyczący średniej różnicy w % GQB między standardową pożywką hodowlaną a pożywką przeciwutleniającą w populacji ITT. Zostanie obliczony dwustronny 95% przedział ufności dla średniej różnicy w %GOB między dwoma podłożami. Wszystkie testy istotności będą dwustronne i przeprowadzone na poziomie istotności 5%.