Comparaisons du développement embryonnaire humain à l'aide d'un seul milieu avec et sans ajout d'antioxydants

Objectif de l'étude : Etude comparant le développement de blastocystes sur une même cohorte d'ovocytes en utilisant deux milieux différents, G-TL versus G-TL supplémenté en antioxydants.

Critère principal : Pourcentage de blastocystes de bonne qualité (GQB) par ovocyte fécondé au jour 5.

Critères secondaires

• Développement embryonnaire jours 3, 5 et 6
• Qualité embryonnaire jour 3, 5 et 6
• Formation totale de blastocystes (jour 5 et jour 6)
• Taux d'utilisation (embryons disponibles pour transfert et cryoconservation)
• Taux d'implantation
• Taux de grossesse clinique

Mise en place : frère embryonnaire potentiel, étude de supériorité

MATERIELS ET METHODES Intervention Nouveau type de milieu de culture embryonnaire utilisé pour la culture in vitro d'embryons humains FIV.

Analyse de puissance La planification et l'analyse de puissance ont été réalisées en collaboration avec un statisticien, Nils-Gunnar Pehrsson.

A partir de données rétrospectives par simulation, l'écart-type intra-individuel pour la différence de % GQB entre les deux stratégies médias a été estimé à 32 %. Afin de trouver une différence de 8% en GQB entre les deux médias avec une puissance de 80% avec le T-test apparié 128 couples seront nécessaires.

Randomisation Les couples seront inscrits à l'étude après vérification de la fécondation (jour 1). Un minimum de 6 zygotes est requis pour participer.

Une randomisation stratifiée des zygotes par couple sera effectuée. Pour chaque couple les zygotes seront numérotés.

Ces zygotes pour chaque couple seront ensuite bloc (par deux) randomisés sur les deux types de supports ; A (milieu de culture traditionnel = contrôle) et B (milieu antioxydant = intervention). Dans les deux groupes, la culture traditionnelle sera pratiquée. L'attribution sera effectuée dans un rapport 1:1 selon une liste de randomisation unique pour chaque couple.

Mise en aveugle Pour minimiser les biais possibles pour le résultat principal (GQE D5), l'embryologiste effectuant l'évaluation morphologique au jour 5/6 ne saura pas à quel groupe appartiennent les embryons.

Le médecin et le couple ne sauront pas à quel groupe ils ont été affectés.

Procédure de traitement de FIV Un traitement de FIV traditionnel sera effectué, y compris la stimulation ovarienne et le prélèvement d'ovocytes en utilisant les méthodes standard des cliniques.

Évaluation de l'embryon et moment de l'évaluation selon les critères de consensus Alpha/ESHRE.

Notation morphologique La morphologie des blastocystes sera notée selon le système de notation consensuelle pour les blastocystes (atelier Consensus d'Istanbul sur l'évaluation des embryons) et la morphologie sera documentée avec des photos individuelles de chaque blastocyste. La notation des blastocystes sera effectuée sous un microscope inversé les jours 5 et 6. Un blastocyste de bonne qualité est défini comme au moins Grade 2: 2: 2 selon le système de notation du consensus d'Istanbul. (Balaban et al., 2011).

DOCUMENTATION Tous les patients participant à l'étude seront documentés sur un CRF informatisé. Ce document sera lié aux dossiers des patients avec toutes les données cliniques et de laboratoire pertinentes du cycle de FIV spécifique. Grâce au système de journal (WinIVF) utilisé au Fertilitetscentrum, il sera possible de générer une liste complète de toutes les variables incluses dans l'étude.

Les patients qui ont été invités à participer à l'étude mais qui ne remplissaient pas les critères de randomisation seront également enregistrés.

ANALYSE STATISTIQUE Une population en intention de traiter (ITT) et une population selon le protocole (PP) seront définies. La principale variable d'efficacité dans cette étude de supériorité sera la différence de %GQB entre les deux types de médias pour chaque couple. L'analyse statistique principale sera un test T apparié bilatéral concernant la moyenne de la différence en % GQB entre le milieu de culture standard et le milieu antioxydant sur la population ITT. Un intervalle de confiance bilatéral à 95 % pour la différence moyenne de %GOB entre les deux médias sera calculé. Tous les tests de signification seront bilatéraux et effectués au niveau de signification de 5 %.